黄娟
- 作品数：9 被引量：12H指数：2
- 供职机构：武汉工程大学化工与制药学院绿色化工过程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程理学更多>>
- 硅基质膜吸附柱对质粒DNA再吸附能力的研究被引量：2
- 2014年
- 为了更好地降低生物学实验成本,对市场上质粒提取试剂盒中吸附柱可重复利用性进行了初步研究。探讨了不同溶液、保存时间、pH值、离子浓度以及温度对吸附柱再吸附能力的影响。结果表明:使用后的吸附柱经过一定的处理可以有效地恢复其对质粒DNA的再吸附能力。确定最佳处理条件为:在离子浓度为0.01mol·L-1、pH值为2.04的PBS缓冲溶液中于4℃保存6d。经过处理,吸附柱的再吸附能力相对其第1次吸附能力有所增强。
- 刘传青向玲娟黄娟陈孝平
- 关键词：质粒吸附柱琼脂糖凝胶电泳
- 离子液体1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐对酿酒酵母AY93161的毒性及其酒精发酵过程的影响被引量：3
- 2013年
- 为了考察离子液体在由木质纤维原料制备可发酵糖中的残留对后续酒精发酵过程的影响,对离子液体1-乙基-3-甲基咪唑醋酸盐([Emim]Ac)对酿酒酵母AY93161的毒性及其酒精发酵过程的影响进行研究。通过亚甲基蓝染色,利用OLYMPUS CX41显微镜观察不同[Emim]Ac浓度下对数生长期酵母细胞的形态结构,出芽情况及代谢活性,发现在[Emim]Ac浓度高于5g·L-1时,酵母细胞的形态结构会发生变化,在[Emim]Ac浓度高于0.1g·L-1时,随着[Emim]Ac浓度的增加,酵母的出芽速率及代谢活性降低。通过平板培养和液体悬浮培养测得[Emim]Ac对酵母的半有效浓度EC50和半抑制浓度IC50分别为4.45、7.70g·L-1。通过测定不同[Emim]Ac浓度下酵母酒精发酵的过程数据,发现在[Emim]Ac浓度低于0.1g·L-1时,对酵母酒精发酵过程几乎无影响,在[Emim]Ac浓度高于0.1g·L-1时,对酵母酒精发酵有抑制作用,[Emim]Ac对酵母酒精发酵的抑制作用主要是由其对菌体生长的抑制所致。
- 余培雷明科郑璐黄娟杜治平吴元欣朱圣东
- 关键词：毒性酒精发酵
- 还原响应性海藻酸钠/四氧化三铁载药纳米凝胶的制备与表征
- 黄娟薛亚楠张寒温凯凯罗晓刚蔡宁喻发全
- 关键词：海藻酸钠纳米凝胶
- 还原响应性含硒纳米胶束的制备及其载药性能研究
- 2017年
- 以亲水性单甲氧基聚乙二醇(mPEG)与一端修饰有疏水性十六烷醇的3,3′-二硒代二丙酸(DSeDPA)通过酯化反应合成了两亲性聚合物mPEG-Se-Se-C_(16),以此为载体制备了负载抗癌药物阿霉素(DOX)的载药胶束,通过Raman光谱、FTIR和~1HNMR对中间体和聚合物结构进行表征。TEM、DLS和CMC分析发现胶束呈规则的圆球状,纳米载药胶束粒径为(198±5)nm(PDI=0.239),聚合物的临界胶束浓度为0.079 mg·mL^(-1)。载药胶束的包封率为51.92%,载药率为9.01%。药物释放和细胞毒性研究表明,基于二硒键的纳米载药胶束有显著的GSH敏感性,能将DOX快速、完全地释放出来,对肿瘤细胞具有精确的选择性和特异性,对正常细胞无明显毒性。
- 王金梅周原黄娟
- 关键词：药物释放细胞毒性
- 尺寸可控的海藻酸钠/阿霉素复合纳米球的制备与表征
- 海藻酸钠(Alg)具有良好的生物降解性、生物相容性和生物粘附性,因此在药物载体方面的应用较为广泛。利用Ca与Alg中羧基间的络合作用,以CaCl为交联剂,可以很容易制备Alg的凝胶、微米球。方法简单,不引进任何其他有毒有...
- 齐国斌杨梅竹黄娟薛亚楠喻发全
- 关键词：ALGINATEDOXNANOPARTICLE
- 文献传递
- 原核表达的人乙醛脱氢酶2(ALDH2)的活性及稳定性研究被引量：2
- 2015年
- 对由原核载体表达的人乙醛脱氢酶2(Aldehyde dehydrogenase 2,简称ALDH2)纯化工艺、酶活性改善、稳定性以及保存条件分别进行了参数的优化,以期为ALDH2商品化剂型开发提供理论依据。通过NAD(P)+酶活测定法,检测不同纯化工艺、金属离子以及不同保存条件对ALDH2的酶活性的影响。通过SDS-PAGE检测ALDH2在模拟胃液和胰液中的稳定性。结果显示,低离子磷酸盐缓冲液透析有利于ALDH2酶活性的恢复,且真空冷冻干燥处理可导致ALDH2酶活性下降。K+、Zn2+、Mg2+、Mn2+、Ca2+均能提高ALDH2酶活性。ALDH2在模拟胃液中稳定性良好,但在模拟胰液中迅速被降解。与此同时,ALDH2酶液在-20℃下能良好地保持其稳定性及酶活,但在4℃和30℃下保存一个月酶活急剧下降。以上结果表明,低离子磷酸盐缓冲液透析法、K+均能提高ALDH2的酶活性,同时该酶可耐受模拟胃液的降解作用,且添加山梨酸钾的ALDH2于-20℃可良好地保持其稳定性及酶活。
- 王荷花潘博宇黄娟陈孝平吴元欣
- 关键词：纯化活性剂型
- 人乙醛脱氢酶2的原核表达及其活性的鉴定被引量：2
- 2014年
- 商品化的乙醛脱氢酶主要从动物细胞、肝细胞线粒体中提取,其来源受到很大的限制,而且价格昂贵。为了解决乙醛脱氢酶原料有限的问题,利用微生物发酵法获取乙醛脱氢酶。将人乙醛脱氢酶2基因(aldh2)克隆至原核表达载体p ET32a中,构建重组载体p ET32a-ALDH2。将构建的重组载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导,SDS-PAGE电泳结果显示目的蛋白得到大量表达;且对诱导表达条件进行优化。结果显示,在37℃,1.0 mmol/L IPTG诱导表达6 h为最优表达条件。由于目的蛋白几乎都是以包涵体形式表达,为了得到有活性的乙醛脱氢酶,对包涵体变性、复性和纯化进行了研究。试验数据显示,酶的最终得率为14.49 U/L。并通过用Bradford法,测定复性蛋白的浓度约为77μg/m L,进行活性检测表明,该复性蛋白具有乙醛脱氢酶活性,酶活性约为1.449 U/m L。通过构建重组载体p ET32a-ALDH2和优化表达条件,aldh2在原核表达宿主E.coli BL21(DE3)得到大量表达;此外,利用透析复性法得到的复性蛋白酶活性有所提高。
- 黄娟王荷花张小骥潘博宇陈孝平吴元欣
- 关键词：乙醛脱氢酶2克隆
- 甘草酸、甘草苷对肿瘤细胞中硫氧还蛋白的核定位影响及其临床意义被引量：3
- 2016年
- 目的通过选用甘草的主要单药活性成分作用于人宫颈癌HeLa细胞,探索其对硫氧还蛋白(thioredoxin-1,Trx)在肿瘤细胞核中定位的影响。方法选取甘草酸(glycyrrhizic acid,GCA)、甘草苷(liquiritin,LQ)两种单药分别设置药物浓度梯度与作用时间梯度实验组。再将一定浓度的GCA、LQ分别与临床化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)或表柔比星(epirubicin,EPI)两两联用设置联合用药实验组。通过Western blot测定Trx在HeLa细胞核中表达量的变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测药物对HeLa细胞增殖抑制的影响。结果 Trx在细胞核内的含量变化均随2种单药浓度的增大和药物作用时间的延长呈下降趋势;GCA、LQ对细胞的毒性较小,且其与低剂量化疗药物联用对细胞核中Trx表达量的影响,与单纯高剂量化疗药物作用效果相近。结论 GCA和LQ均可使Trx在HeLa细胞核中的表达下降,且其与临床化疗药物联用有望降低后者的使用剂量,从而表现出一定的潜在临床应用价值。
- 潘博宇王荷花张小骥黄娟吴元欣陈孝平
- 关键词：甘草酸甘草苷硫氧还蛋白肿瘤细胞核定位
- 人乙醛脱氢酶2的原核表达及条件的优化
- 2014年
- 通过双酶切、连接转化等方法将人乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因克隆至载体pGEX-4T-1上,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ALDH2。重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明目的蛋白得到大量表达。由于此载体本身带有融合蛋白标签GST(谷胱甘肽转移酶),所以得到了部分可溶性的目的蛋白。通过对表达条件进行探讨,发现在28℃下,以终浓度0.1mmol·L-1的IPTG诱导表达10h,可溶性的目的蛋白约占总蛋白的25%。表明,融合蛋白标签GST及较低的诱导温度有利于提高人乙醛脱氢酶2基因在大肠杆菌内的可溶性表达。
- 黄娟张小骥刘传青向玲娟陈孝平吴元欣
- 关键词：乙醛脱氢酶2原核表达融合蛋白
