潘博宇
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：武汉工程大学化工与制药学院绿色化工过程省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原核表达的人乙醛脱氢酶2(ALDH2)的活性及稳定性研究被引量：2
- 2015年
- 对由原核载体表达的人乙醛脱氢酶2(Aldehyde dehydrogenase 2,简称ALDH2)纯化工艺、酶活性改善、稳定性以及保存条件分别进行了参数的优化,以期为ALDH2商品化剂型开发提供理论依据。通过NAD(P)+酶活测定法,检测不同纯化工艺、金属离子以及不同保存条件对ALDH2的酶活性的影响。通过SDS-PAGE检测ALDH2在模拟胃液和胰液中的稳定性。结果显示,低离子磷酸盐缓冲液透析有利于ALDH2酶活性的恢复,且真空冷冻干燥处理可导致ALDH2酶活性下降。K+、Zn2+、Mg2+、Mn2+、Ca2+均能提高ALDH2酶活性。ALDH2在模拟胃液中稳定性良好,但在模拟胰液中迅速被降解。与此同时,ALDH2酶液在-20℃下能良好地保持其稳定性及酶活,但在4℃和30℃下保存一个月酶活急剧下降。以上结果表明,低离子磷酸盐缓冲液透析法、K+均能提高ALDH2的酶活性,同时该酶可耐受模拟胃液的降解作用,且添加山梨酸钾的ALDH2于-20℃可良好地保持其稳定性及酶活。
- 王荷花潘博宇黄娟陈孝平吴元欣
- 关键词：纯化活性剂型
- 单克隆抗体治疗恶性肿瘤的临床应用进展被引量：3
- 2014年
- 单克隆抗体（单抗）指由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌的高度均一性的特异性抗体。1975年Kohler和Milstein将小鼠骨髓瘤细胞与用绵羊红细胞免疫后的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既能产生抗绵羊红细胞抗体,又能进行＂永生化＂地分裂繁殖,从而创立了单抗杂交瘤技术。
- 潘博宇王荷花陈孝平
- 关键词：肿瘤曲妥珠单抗西妥昔单抗
- 甘草酸、甘草苷对肿瘤细胞中硫氧还蛋白的核定位影响及其临床意义被引量：3
- 2016年
- 目的通过选用甘草的主要单药活性成分作用于人宫颈癌HeLa细胞,探索其对硫氧还蛋白(thioredoxin-1,Trx)在肿瘤细胞核中定位的影响。方法选取甘草酸(glycyrrhizic acid,GCA)、甘草苷(liquiritin,LQ)两种单药分别设置药物浓度梯度与作用时间梯度实验组。再将一定浓度的GCA、LQ分别与临床化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)或表柔比星(epirubicin,EPI)两两联用设置联合用药实验组。通过Western blot测定Trx在HeLa细胞核中表达量的变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测药物对HeLa细胞增殖抑制的影响。结果 Trx在细胞核内的含量变化均随2种单药浓度的增大和药物作用时间的延长呈下降趋势;GCA、LQ对细胞的毒性较小,且其与低剂量化疗药物联用对细胞核中Trx表达量的影响,与单纯高剂量化疗药物作用效果相近。结论 GCA和LQ均可使Trx在HeLa细胞核中的表达下降,且其与临床化疗药物联用有望降低后者的使用剂量,从而表现出一定的潜在临床应用价值。
- 潘博宇王荷花张小骥黄娟吴元欣陈孝平
- 关键词：甘草酸甘草苷硫氧还蛋白肿瘤细胞核定位
- 从生物学角度对癌症的基础性认识
- 2013年
- 随着我国经济社会的快速发展,国民生活水平已有很大的提高。然而,工业生产排放的大量有害物质造成的环境污染,人们长期以来养成的不良生活习惯等,都有可能对人们造成严重的健康伤害。它们可能会使人体内部正常的细胞发生代谢紊乱,产生癌变。近年来,我国癌症发病率呈现出不断升高的趋势,其在社会生活中所产生的不良后果引起了人们的高度关注。本文从生物学角度,对"癌症"这个话题进行全面的解析,并对癌症的研究及相关防治进行展望。
- 潘博宇王荷花
- 关键词：癌细胞
- 人乙醛脱氢酶2的原核表达及其活性的鉴定被引量：2
- 2014年
- 商品化的乙醛脱氢酶主要从动物细胞、肝细胞线粒体中提取,其来源受到很大的限制,而且价格昂贵。为了解决乙醛脱氢酶原料有限的问题,利用微生物发酵法获取乙醛脱氢酶。将人乙醛脱氢酶2基因(aldh2)克隆至原核表达载体p ET32a中,构建重组载体p ET32a-ALDH2。将构建的重组载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导,SDS-PAGE电泳结果显示目的蛋白得到大量表达;且对诱导表达条件进行优化。结果显示,在37℃,1.0 mmol/L IPTG诱导表达6 h为最优表达条件。由于目的蛋白几乎都是以包涵体形式表达,为了得到有活性的乙醛脱氢酶,对包涵体变性、复性和纯化进行了研究。试验数据显示,酶的最终得率为14.49 U/L。并通过用Bradford法,测定复性蛋白的浓度约为77μg/m L,进行活性检测表明,该复性蛋白具有乙醛脱氢酶活性,酶活性约为1.449 U/m L。通过构建重组载体p ET32a-ALDH2和优化表达条件,aldh2在原核表达宿主E.coli BL21(DE3)得到大量表达;此外,利用透析复性法得到的复性蛋白酶活性有所提高。
- 黄娟王荷花张小骥潘博宇陈孝平吴元欣
- 关键词：乙醛脱氢酶2克隆
