高丽丽
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- PKR抑制胰岛β细胞生长的机制研究被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨PKR激活诱导的胰岛β细胞生长抑制及其相关分子机制。方法:采用PKR激动剂BEPP处理INS-1细胞,MTT法检测其对细胞活力的影响;EdU荧光标记结合流式细胞术测定胰岛β细胞增殖及细胞周期变化;免疫印迹技术评价PKR下游信号分子eIF2α蛋白及其磷酸化水平变化,并检测细胞周期相关蛋白cyclin D1的表达。结果:MTT显示BEPP呈剂量和时间依赖性抑制INS-1细胞生长活力(P<0.05);EdU荧光标记显示细胞增殖显著下降;流式细胞术表明BEPP处理组G1期细胞比例明显升高,而S期细胞比例显著下降(P<0.05);Western blot结果表明:BEPP能下调eIF2α磷酸化而不是其蛋白水平,同时伴随cyclin D1蛋白含量显著降低(P<0.05)。结论:PKR激活剂BEPP能诱导eIF2α磷酸化,阻断蛋白合成,且通过下调cyclin D1蛋白水平,诱导胰岛β细胞G1期阻滞,抑制其增殖,从而导致机体胰岛β细胞整体功能的失代偿和2型糖尿病的发生。
- 陈珊珊王怡顾丽泽高丽丽郭军
- 关键词：胰岛Β细胞PKRCYCLIND1细胞增殖
- PKR通过SUMO化修饰调控胰岛β细胞P53功能上调
- 2016年
- 目的:探讨PKR通过SUMO化修饰上调P53功能,阐明胰岛β细胞增殖抑制的分子机制。方法:转染wt-PKR质粒并结合BEPP刺激,诱导PKR在胰岛β细胞特异性激活。免疫印迹和免疫共沉淀技术检测P53及P53-SUMO-1蛋白结合水平变化;并给予SUMO化抑制剂Spectomycin B1,分析其相关分子机制。结果:免疫印迹和实时定量PCR检测表明:PKR特异激活能诱导P53蛋白水平而不是mRNA水平上调;免疫共沉淀分析显示:PKR促进了SUMO-1与P53蛋白结合水平的增加;而Spectomycin B1能抑制PKR诱导的P53蛋白水平及其与SUMO结合的增加。结论:PKR能通过促进P53的SUMO化修饰,上调其功能,诱导胰岛β细胞增殖抑制,可能参与2型糖尿病的发生和病程发展。
- 宛晓梦潘漪周晓艳高丽丽郭军
- 关键词：胰岛Β细胞PKRP53SUMO化修饰
- RIG-I上调抑制胰腺β细胞增殖机制研究
- 2016年
- 目的 :探讨维甲酸诱导基因I(retinoic acid inducible gene-I,RIG-I)在小鼠胰岛β细胞株NIT-1生长中的作用及其相关分子机制。方法:应用不同浓度(1、5、10、20、50和100μmol/L)的RIG-I特异性激动剂维甲酸(retinoic acid,RA)分别刺激NIT-1细胞6、12、24 h,上调RIG-I。MTT法检测细胞生长活力;real-time PCR测定RIG-I的m RNA水平;免疫印迹法检测RIG-I和细胞周期蛋白P27蛋白水平;Ed U和流式细胞术检测β细胞的增殖和分裂周期。结果:维甲酸处理能刺激NIT-1细胞RIG-I蛋白水平增加(P<0.05),能剂量依赖地抑制NIT-1细胞生长活力(P<0.05),且诱导NIT-1细胞G1期阻滞和周期抑制蛋白P27蛋白水平增加(P<0.05)。结论:RIG-I的功能增强能诱导小鼠胰岛β细胞P27蛋白水平上调,一定条件下抑制β细胞增殖和诱导细胞周期G1期阻滞,从而导致机体胰岛β细胞整体功能的失代偿,可能是2型糖尿病发生发展的重要诱因。
- 潘漪高丽丽王鼎玉陈婷婷郭军
- 关键词：维甲酸胰腺Β细胞P27
