韩磊
- 作品数：39 被引量：105H指数：6
- 供职机构：天津市神经病学研究所更多>>
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- miR-221与miR-222通过靶基因TIMP3调控胶质瘤细胞侵袭能力被引量：4
- 2011年
- 目的 探讨miR-221和miR-222在胶质瘤细胞侵袭过程中的作用及其机制.方法 采用反义寡核苷酸下调miR-221和miR-222表达,Transwell、Western blot、荧光素酶实验及体内实验分别检测细胞侵袭能力、体内肿瘤生长、相关基因蛋白表达变化及靶基因鉴定.结果 下调miR-221和miR-222表达能明显抑制胶质瘤细胞侵袭能力,同时相关侵袭蛋白MMP2和MMP9表达下降.miRNA靶基因预测软件分析、Western blot、荧光素酶实验证实TIMP3是miR-221和miR-222的靶基因.裸鼠皮下肿瘤模型显示下调miR-221和miR-222表达抑制体内肿瘤生长.免疫组化发现TIMP3表达上调,MMP2和MMP9表达下调.结论 在胶质瘤细胞中,侵袭相关蛋白TIMP3是miR-221和miR-222的一个新靶基因.
- 翟博智张春智韩磊浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤MIR-221MIR-222TIMP3
- 敲低U251细胞miR-221/222表达对其基因组表达的影响
- 2011年
- 目的 采用基因表达谱芯片和生物信息学方法研究miR-221/222对胶质瘤U251细胞株信号通路的调控作用.方法 miR-221/222反义寡核苷酸瞬时转染人胶质瘤细胞株后提取总RNA进行基因表达谱检测,对差异表达基因行生物信息学分析,将核心转录因子进行实验验证.结果 敲低胶质瘤U251细胞中miR-221/222表达后,基因表达谱分析确定158个差异表达基因;生物信息学分析发现干扰素-α信号通路是受差异表达基因调节最显著的通路,其中STAT1和STAT2是干扰素-α通路的核心蛋白.结论 抑制miR--221/222基因簇表达可部分通过干扰素-α通路上调STAT1和STAT2 mRNA的翻译水平,并使U251细胞mRNA的表达谱发生改变.
- 杨旸张春智杨卫东韩磊张安玲浦佩玉康春生
- 关键词：MIR-221MIR-222神经胶质瘤
- RNA干扰敲低Dicer对胶质瘤细胞恶性表型的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 观察应用RNA干扰（RNAi）技术敲低Dicer酶后,在体外对U251人胶质瘤细胞生物学特征的影响.方法 构建针对Dicer基因的小分子干扰RNA重组腺病毒表达载体（rAd-Dicer）转染至U251细胞.应用RT-PCR检测Dicer mRNA水平的变化,应用免疫荧光和Western blot方法检测Dicer基因在蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析比较.应用MTT法、流式细胞术和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后生物学行为的变化.结果 rAd-Dicer可显著抑制U251细胞Dicer基因的表达;与正常对照组（control）和阴性对照组（rAd-HK）比较,Western blot分析结果显示p-AKT,MMP2/9,PCNA,Cyclin a,VEGF,CD34功能蛋白在rAd-Dicer转染组细胞中表达明显上调;细胞周期结果表明rAd-Dicer转染组进入S期的细胞数增加了 14.1%～15.3%,MTT和Transwell实验结果显示rAd-Dicer转染组细胞增殖速率和体外侵袭能力显著增强.结论 敲低Dicer酶表达后,U251细胞表型具有更为恶性转化的倾向,由此初步推测全面抑制细胞microRNAs表达有可能促进肿瘤生成.
- 韩磊张安玲岳晓许鹏杨旸王广秀贾志凡浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤DICERRNA干扰生物学表型
- 抑制组蛋白去乙酰化酶与DNA甲基转移酶活性对胶质瘤恶性表型的影响
- 2012年
- 目的:探讨阻断组蛋白去乙酰化酶与DNA甲基转移酶的活性后对胶质瘤恶性表型的抑制作用。方法:选择丙戊酸(VPA)为组蛋白去乙酰化酶抑制剂,5-氮杂-2′-脱氧胞苷(Aza)为DNA甲基转移酶抑制剂。将U251胶质瘤细胞分为对照组、VPA治疗组、Aza治疗组和VPA+Aza联合治疗组。采用四唑盐(MTT)比色法分析肿瘤细胞增殖活性,流式细胞术分析细胞周期,Annexin V-FITC染色检测细胞凋亡,2D MatrigeⅠ、3D MatrigeⅠ、TransweⅡ法检测胶质瘤细胞侵袭能力,并建立U251细胞裸鼠皮下移植瘤模型,进行肿瘤局部多点注射上述药物治疗,治疗24d,每4天测量肿瘤体积。结果:与对照组比较,在治疗2d后各治疗组肿瘤细胞的增殖均出现明显抑制,S期和G2/M期细胞比例减少,诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,治疗组细胞凋亡率明显下降,侵袭和运动迁移能力均明显下降,各治疗组鼠移植瘤体积增长较对照组明显减缓,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。以上结果均以VPA+Aza联合治疗组最为显著。结论:联合阻断DNA甲基转移酶和组蛋白去乙酰化酶活性可抑制胶质瘤表观遗传学特征,抑制胶质瘤恶性表型。
- 王晓蕊杜汋浦佩玉康春生韩磊
- 关键词：神经胶质瘤组蛋白去乙酰化酶抑制剂肿瘤侵润
- miR-27b通过调控β-catenin/Tcf-4通路调节胶质瘤恶性表型
- 目的我们的前期研究发现证实miR-27b在高级别胶质瘤细胞系高表达。但是,目前还没有miR-27b在胶质瘤恶性表型的功能研究。我们此项研究的目的是为了证实miR-27b在胶质瘤中的潜在功能及其相关机制。方法 RT-PCR...
- 陈灵朝韩磊张开亮史振东张安玲郑永日浦佩玉蒋传路康春生
- 关键词：胶质瘤
- 文献传递
- 反义miR-21增加U251脑胶质瘤细胞对5-氟尿嘧啶化疗敏感性的研究被引量：8
- 2010年
- 目的探讨as—miR-21增加U251脑胶质瘤细胞对5-FU化疗敏感性的效果。方法透析法制备5-FU／PAMAM载体，透射电镜观察形态，紫外分光光度计检测载药率和包封率；流式细胞仪检测转染效率并分析细胞凋亡比例；MTT法检测共转染后细胞生长抑制效果；免疫荧光检测Ki67和Bcl-2蛋白表达；Transwell检测细胞侵袭能力变化。结果纳米微粒形态规整；平均包封率为66．21％，平均载药量为31．77％；PAMAM转染效率为70．53％；共转染组细胞生长显著抑制（F=273．345，P=0．000）；凋亡比例升高（F=43．21，P=0．000），Ki67、Bcl-2表达均下调；细胞侵袭能力显著下降。结论PAMAM可以有效同载as—miR-21和5-FU，且更加有效地抑制U251脑胶质瘤细胞的体外生长并增加对5-FU的化疗敏感性。
- 任玉周旋原续波许鹏王广秀贾志凡张安玲韩磊浦佩玉康春生
- 关键词：PAMAM
- IGF-II和IGF-IR在结直肠癌的表达及其临床意义研究
- 目的： 研究胰岛素样生长因子Ⅱ（Insulin-like growth factor-Ⅱ, IGF-Ⅱ）和胰岛素样生长因子Ⅰ受体（Insulin-like growth factor-IR, IGF-IR）在结直肠...
- 韩磊
- 关键词：结直肠癌结直肠腺瘤IGF-IRCA19-9
- RNA干扰技术联合抑制AKT1和COX-2表达对U251胶质瘤细胞增殖的影响
- 2010年
- 目的 探讨应用RNA干扰（RNAi）技术抑制U251恶性胶质瘤细胞株AKT1和COX-2表达后,在体外对U251细胞增殖的抑制作用.方法 构建靶向AKT1和COX-2的RNAi重组腺病毒表达载体（rAd-A＋C）转染至U251细胞.应用Realtime PCR检测AKT1和COX-2 mRNA水平的变化;应用Western blot检测AKT1和COX-2蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析;应用MTr法和流式细胞术评价肿瘤细胞的增殖活性.结果 rAd-A＋C可显著抑制U251细胞AKT1和COX-2的表达;与对照组和无义序列处理组（rAd-HK）比较,Western blot分析结果显示下游相关因子PCNA、Cyclin D1表达下降,而p53表达上调;细胞周期分析结果表明rAd-A＋C处理组进入S期的细胞数较对照组减少了7.0%～7.8%,出现G0/G1期阻滞;MTT法分析显示rAd-A＋C处理组细胞生长抑制率＞58%.结论 靶向AKT1和COX-2的RNAi技术可显著抑制U251细胞AKT1和COX-2表达,在体外对U251细胞增殖活性产生明显抑制作用.因此,RNAi重组腺病毒表达载体介导的基因治疗可成为胶质瘤靶向治疗的新策略.
- 韩磊张安玲岳晓杨旸王广秀贾志凡浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤AKT1RNA干扰增殖活性
- Ad-PTEN对乳腺癌细胞系MCF-7生长抑制作用的影响及机制
- 2010年
- 目的探讨携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-PTEN)和LY294002对乳腺癌细胞系MCF-7生长抑制作用的影响及机制。方法在MCF-7中导入Ad-PTEN和PI3K抑制剂LY294002。Western blotting法检测PTEN/PI3K/AKT及其下游相关蛋白表达,MTT法检测MCF-7细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期,Annexin V法检测细胞凋亡率。结果与DMSO组、空载病毒和LY294002组相比,联合组(LY294002+Ad-PTEN)PTEN蛋白明显上调,而PI3K/AKT及下游蛋白水平显著下降;联合组细胞阻滞于G0/G1期;细胞凋亡率增加明显;自培养第2天起,联合组细胞生存率呈下降趋势。结论Ad-PTEN联合LY294002通过阻滞细胞周期、促进细胞凋亡抑制MCF-7的增殖能力,两者具有正向协同作用;其机制可能与下调PI3K/AKT信号通路下游蛋白有关。
- 刘哲李文良宋云朋许朋韩磊
- 关键词：PI3K抑制剂乳腺癌细胞
- 小干扰RNA敲低Dicer对人脑胶质瘤细胞生物学特征的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究敲低Dicer酶的表达全面抑制徽小RNA（microRNA，miRNA）成熟对TJ905人脑胶质瘤细胞的生物学特征的影响。方法采用RNA干扰（RNAinterference，RNAi）技术敲低Dicer酶的表达，逆转录PCR、Western印迹及免疫荧光检测TJ905细胞转染小干扰RNA（smallinterferen，siRNA）后Dicer酶表达情况；应用流式细胞术检测、噻唑兰比色分析法试验及Tranwell试验评价细胞生长、增殖和侵袭等生物学特征变化。结果转染siRNA靶向Dicer酶后，Dicer酶被敲低，S期细胞增多，细胞增殖加速，细胞侵袭生长能力增强。结论敲低Dicer酶全面抑制miRNAs成熟后，肿瘤细胞表型具有更为恶性变的倾向，由此初步推测全面抑制细胞miRNAs表达有可能促进肿瘤生成。
- 张安玲康春生韩磊王广秀贾志凡浦佩玉
- 关键词：小干扰RNADICER酶胶质瘤生物学特征
