陈星
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
- 供职机构：首都医科大学附属北京朝阳医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律农业科学更多>>
- 使用偏爱密码子大幅度提高苯丙氨酸脱氨酶在食品级乳酸乳球菌中的表达被引量：8
- 2006年
- 为获得苯丙氨酸脱氨酶(PAL)在食品级乳酸乳球菌中的高效表达,将欧芹palcDNA(palnat)及根据乳酸乳球菌偏爱密码子设计人工合成的pal基因(palart)重组并转化到两种乳酸乳球菌NICE诱导表达系统中,测定基因工程菌表达PAL酶的量及活性,对比分析密码子偏爱性对乳酸乳球菌表达外源蛋白的影响。结果表明在两种乳酸乳球菌NICE表达系统中,使用偏爱密码子均可显著提高PAL酶的表达效率,使NZ9000/pNZ8048表达系统表达量提高22.23倍,NZ3900/pNZ8149系统提高35.90倍。此研究获得了安全高效表达PAL,可用于治疗苯丙酮尿症的基因工程菌。
- 陈星高斌贾兴元苏畅吕月平王战勇范新萍肖白刘敬忠
- 关键词：乳酸乳球菌密码子
- 基因工程苯丙氨酸解氨酶对多发性骨髓瘤U266细胞的作用研究
- 2008年
- 目的为寻找对多发性骨髓瘤新的治疗方法，从基因工程乳酸乳球菌提纯苯丙氨酸解氨酶（PAL），探讨PAL酶对多发性骨髓瘤U266细胞系的影响作用。方法利用已构建成功的高表达PAL的基因工程乳酸乳球菌，结合物理、化学、生物学等方法，设计一种简便、高效提纯PAL酶的方法。培养人多发性骨髓瘤U266细胞系，在不同浓度基因工程PAL酶作用后，以MTT法检测细胞增生；流式细胞仪检测细胞凋亡；HPLC检测细胞培养液中苯丙氨酸（phe）浓度。结果①用本研究所设计方法从基因工程乳酸乳球菌NZ3900／pNZ8149-pal^art中提取的PAL酶比活性可达同量原菌的92．5％；②0．1～2．0U／ml的PAL提取液作用24h后能显著抑制U266细胞生长，并呈剂量依赖性；③只添加提取过程所用试剂的对照组细胞生长无明显抑制；④0．1U／ml、0．2U／ml、2．0U／ml的PAL酶作用24h后的MM细胞早期凋亡率分别为（21．92±0．95）％、（50．64±0．86）％、（90．86±2．91）％；⑤PAL酶作用24h后细胞培养液中phe浓度随PAL酶活性增加而降低。结论本研究所设计方法可从基因工程乳酸菌高效提取PAL酶；提取过程中的添加试剂对MM细胞生长无明显抑制作用；PAL酶能显著抑制MM细胞体外生长，诱导细胞早期凋亡；PAL酶可降低培养液中的phe水平，且phe浓度与MM细胞生长的抑制作用具有相关性。
- 陈星王璞刘晋纬肖白陈文明刘敬忠
- 关键词：苯丙氨酸解氨酶基因工程多发性骨髓瘤凋亡
- 人工合成苯丙氨酸脱氨酶基因在乳酸乳球菌中的食品级表达被引量：5
- 2006年
- 目的将人工合成具有乳酸菌偏好密码子的苯丙氨酸脱氨酶基因(PALart),在乳酸乳球菌中克隆并进行食品级表达,以期进一步用于治疗苯丙酮尿症的研究。方法以欧芹苯丙氨酸脱氨酶氨基酸序列为准,人工合成以乳酸菌偏爱密码子编码相同氨基酸序列的基因PALart,将该基因克隆到食品级乳酸乳球菌高效表达系统pNZ8149/NZ3900中而获得基因工程菌,用HPLC法测定诱导表达出的苯丙氨酸脱氨酶活性。结果获得了能表达苯丙氨酸脱氨酶活性的阳性克隆pNZ8149-PALart/NZ3900。该酶的表达量与诱导物乳链菌肽的浓度有关。反应液pH值能明显影响工程菌转化苯丙氨酸为肉桂酸的转化率;以10mmol/L的苯丙氨酸作为底物,在pH8.0的磷酸盐缓冲液中,于37℃反应18h,其转化率可达64%。结论获得具有活性PALart食品级表达的乳酸乳球菌株,为进一步将其制成口服制剂用于治疗经典型苯丙酮尿症模型动物的实验研究打下基础。
- 贾兴元陈星苏畅吕月平高斌肖白刘敬忠
- 关键词：苯丙氨酸乳酸乳球菌基因表达
- 食品级乳酸乳球菌高效表达苯丙氨酸脱氨酶及动物疗效实验研究
- 经典型苯丙酮尿症(PKU)是由于苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因缺陷引起肝细胞内PAH酶活力严重缺乏所致的常染色体隐性遗传病。大量的苯丙氨酸(phenylalanine，PHE)在体内积累，引起中枢神经系统受损和不可逆的智力...
- 陈星
- 关键词：苯丙酮尿症乳酸乳球菌细胞生物学基因缺陷染色体隐性遗传病
- 文献传递
- 高质量提取大豆叶片总RNA的改良方法被引量：9
- 2008年
- 豆科植物总RNA的提取相对比较困难,大豆叶片富含多糖、蛋白质,传统方法提取效果均不理想。在总RNA的提取方法Trizol法和热酚-氯化锂沉淀法的基础上,针对大豆叶片的特殊性,做了适当的改良,从而获得了完整性好,高纯度的大豆叶片总RNA,并成功进行了基因片段的RT-PCR实验,结果证实所获得的RNA完全可以适应后续实验要求。
- 姚滢秋陈星王璞梁燕闫梅肖白
- 关键词：大豆RNA
- 3个STR基因座变异亲子鉴定1例被引量：5
- 2010年
- 1案例
1.1案情
因户口申报需要,自称父亲的男子（假定父）、孩子和自称母亲的女子（假定母）来本中心要求进行亲子鉴定。采集指血备检。
- 任贺郭剑章陈星刘芳俞丽娟肖白刘雅诚
- 关键词：法医遗传学亲子关系突变STR
- 多重连接探针扩增技术在凝血因子Ⅸ基因大片段缺失的血友病B基因携带者诊断中的应用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨多重连接探针扩增技术（MLPA）在血友病B（HB）基因诊断中的应用。方法采用MLPA和短串联重复序列（STR）基因连锁分析对由于凝血因子IX（F9）基因大片段缺失导致测序失败的2个HB家系进行基因诊断。结果MLPA检测结果显示，2例HB患者内基因存在1或2个外显子的缺失，缺失位置Ratio值〈0．10；患者母亲相应位置Ratio值为0．50±0．05，可判断为携带者；其他女性受检者Ratio值为0．71～1．30，可排除携带者。基因连锁分析与MLPA判断结论一致。结论MLPA为HB的直接基因诊断提供了一种新的方法，可用于测序无法检出的f、9基因大片段缺失的携带者诊断。
- 陈星梁燕闫梅刘敬忠
- 关键词：多重连接探针扩增技术血友病B基因诊断
- 从基因工程乳酸菌中高效提取苯丙氨酸解氨酶的方法研究
- 2008年
- 为从高表达苯丙氨酸解氨酶(PAL)的基因工程乳酸乳球菌NZ3900/pNZ8149-palart中有效提取所表达的PAL酶,针对乳酸乳球菌的特点,结合各种物理、化学、生物学等方法,探索出一条简便、高效的技术路线。对提取物进行了酶活性测定、分析及细菌活性鉴定。结果表明,该混合法可以完全导致细菌死亡,所提取的酶蛋白结构完整,其酶活性达到了等量活菌的92.5%,且该方法中所用到的各种试剂对体外培养细胞的生长无明显影响,为PAL酶在科研及生物医药领域的应用提供了可靠来源。
- 陈星王璞姚滢秋肖白
- 关键词：乳酸乳球菌
- 苯丙酮尿症的诊断与治疗研究研究进展
- 苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)是常见的氨基酸代谢障碍性疾病,属常染色体隐性遗传病,是少数几种可以早期诊断和治疗的先天性遗传病。2000年中华预防医学会儿童保健分会新生儿筛查组收集了各地新生儿筛查数据...
- 陈星刘敬忠
- DXS52（St14）在血友病甲基因诊断中的方法改进及应用被引量：4
- 2011年
- 目的改进DXS52（St14）在血友病甲（hemophiliaA，HA）基因连锁分析中的实验方法并应用于基因诊断，报道DXS52位点与F搿基因发生重组的2个家系。方法采用PCR和琼脂糖凝胶电泳对61个非倒位HA家系的DXS52位点进行基因检测，并用FⅦ基因内的Bcl Ⅰ、HindⅢ、Xba Ⅰ、STR1、STR13、STR22和STR24这7个位点以及DXS52位点对这61个家系进行基因连锁分析。结果DXS52位点在43个HA家系中可提供信息，可诊断率为70．5％（43／61）。其中8个家系仅DXS52单个位点能提供信息，占13．1％；两个家系的DXS52与FⅦ基因发生基因重组。结论采用新的实验条件可使DXS52位点基因检测得到准确清晰的实验结果。该位点可诊断率高，目前是HA连锁基因分析中不可缺少的诊断位点，但该位点位于FⅦ基因外，与FⅦ基因间存在重组可能，单独应用于诊断时应谨慎。
- 闫梅梁燕陈星范新萍肖白刘敬忠
- 关键词：血友病甲基因重组
