郭海勇
- 作品数：48 被引量：142H指数：9
- 供职机构：吉林师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 抗菌肽的基因克隆表达及其在畜牧业中的应用前景被引量：3
- 2008年
- 抗菌肽是具有抗菌活性的一类短肽,具有分子量低、热稳定、广谱的抗菌、抗病毒及抑制肿瘤的生物活性,是动物防御体系的一个重要组成部分,在机体抵抗病原的入侵方面起着重要的作用。本文主要综述了抗菌肽基因的克隆与表达的研究进展并展望了抗菌肽在畜牧业生产中的应用前景。
- 郭伟生吴哲郭海勇钱爱东
- 关键词：基因
- 猪流行性腹泻病毒HBMC2012株的分离鉴定及其致病性研究被引量：9
- 2016年
- 为从腹泻仔猪肠道内分离鉴定猪流行性腹泻病毒(PEDV)并明确其致病性,本文研究应用Vero-81细胞从腹泻仔猪小肠及其内容物中分离鉴定了一株PEDV(HBMC2012株),分析了其遗传变异特征,并将该病毒分离株经口腔感染5头3 d健康初生仔猪,观察其临床表现和病理变化,检测病毒在组织中的分布,分析病毒血症和经粪便排毒的动态。结果显示,分离的PEDV HBMC2012株可以引起明显的细胞病变,与目前国内及美国流行的PEDV株同源性高,与2010年之前的国内流行PEDV株、欧洲株CV777和韩国株DR13同源性低。该病毒株可以导致仔猪出现PED典型的临床症状与病理变化,病毒主要分布于空肠后端、回肠和十二指肠黏膜上皮细胞内,病毒血症和粪便排毒至少持续14 d。该研究结果为PEDV的致病机制和弱毒疫苗研究奠定了基础。
- 朱卫霞郭海勇陈立功李艳琴宋勤叶李潭清赵丹萍
- 关键词：猪流行性腹泻病毒遗传进化分析初生仔猪
- 猪流行性腹泻病毒HBMC2012株的分离鉴定及其致病性分析
- 为从腹泻仔猪肠道内分离鉴定猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),分析病毒遗传变异特征,明确其致病性.将无菌处理的腹泻仔猪小肠及其内容物悬液接种到Vero-81细胞,...
- 朱卫霞郭海勇陈立功李艳琴宋勤叶李潭清赵丹萍
- 关键词：流行性腹泻病毒
- 禽流感新型预防疫苗及诊断试剂盒的研发
- 钱爱东金宁一张文慧鲁会军唐艳林单晓枫宋桂才田明尧王春芳张辉郭海勇陈义峰马丽华刘成宏王好李影高云航王伟利赵云娇谭守国胡桂学刘笑扬
- 1.任务来源：该项目“禽流感新型预防疫苗及诊断试剂盒的研发”(合同编号20065020)为吉林省科技发展计划项目-重大农业科技专项项目。2.应用领域和技术原理：(1)应用领域：畜禽养殖和动物疫病防控。(2)技术原理：该项...
- 关键词：
- 关键词：禽流感预防疫苗诊断试剂盒基因工程
- 榆耳液体发酵菌丝体多糖提取方法的比较研究被引量：1
- 2014年
- 以榆耳液体发酵菌丝体为原料,比较研究水提法、酶法和超声波法提取榆耳菌丝体多糖的提取率,结果表明,水提法提取率最低,为3.47%;其次是超声波法,提取率为3.92%;酶法提取率最高,为4.70%.酶法提取效果优于其他两种方法,可显著提高榆耳菌丝体多糖的提取率.
- 郭海勇邢晓瑞何云亭韩育李彬彬鲍庆晗孙文怡于长春
- 关键词：榆耳菌丝体多糖水提法超声提取法
- 葡萄球菌GST-mTSST-1融合蛋白的纯化及其免疫活性鉴定
- 2011年
- 将DH5α/pGXmTSST基因工程菌用IPTG诱导表达,经超声波破碎、离心、收集上清再用谷胱甘肽琼脂糖凝胶柱(GS4B)亲和层析纯化金黄色葡萄球菌无毒诱变GST-mTSST-1融合蛋白.以SDS-PAGE分析该融合蛋白的表达量和纯度,经双向免疫琼脂扩散试验鉴定GST-mTSST-1融合蛋白的免疫活性.结果表明,GST-mTSST-1融合蛋白在重组菌中可溶性表达,通过GS4B胶亲和层析纯化,SDS-PAGE电泳分析得到纯度较高的目的蛋白,其相对分子质量约为47 000,与理论值一致.兔抗GST-mTSST-1抗血清可特异识别天然rTSST-1蛋白中与GST-mTSST-1融合蛋白相对应的抗原组份,证实GST-mTSST-1融合蛋白具有与野生型rTSST-1相同的表面抗原决定簇,具有较好的免疫原性.
- 郭海勇孙文怡刘斯牛雪娇王丽
- 关键词：金黄色葡萄球菌融合蛋白免疫活性纯化
- 金黄色葡萄球菌中毒性休克综合征毒素-1 PCR检测方法的建立与初步应用
- 2019年
- 试验旨在建立敏感、特异快速检测金黄色葡萄球菌超抗原中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)的PCR方法。根据TSST-1毒素基因(tst基因)的序列,设计合成了特异性引物,优化了PCR方法的引物浓度、退火温度及DNA模板量,测定了方法的灵敏度与特异性,并应用所建立的PCR方法检测了67株金黄色葡萄球菌分离株中的tst基因。结果表明,建立的PCR方法的最佳退火温度为55℃、引物浓度为0.4μmol/L,检测灵敏度为20 pg DNA,与表皮葡萄球菌、猪链球菌、四联球菌、沙门氏菌和大肠杆菌等均不发生交叉反应。在67株金黄色葡萄球菌分离株中,13株携带tst基因,其中鸡源分离株中携带tst基因的菌株约占9.1%(1/11),牛源分离株中携带tst基因的菌株约占21.4%(12/56)。本研究建立的PCR方法能够快速、特异、敏感地检测金黄色葡萄球菌超抗原TSST-1毒素基因,为动物源性食品中TSST-1的检测及产TSST-1毒素菌株的流行病学调查提供重要技术支持。
- 张晓丽陈卓于佳鑫孙悦青王洋栾剑周晓梅郭海勇
- 关键词：金黄色葡萄球菌超抗原PCR
- 葡萄球菌GST-mTSST-1融合蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2007年
- 以纯化的金黄色葡萄球菌无毒诱变超抗原GST-mTSST-1融合蛋白作为检测抗原,通过优化ELISA反应条件,初步建立了检测血清特异性GST-mTSST-1抗体的间接ELISA方法,监测了小鼠血清中特异性GST-mTSST-1抗体水平的动态变化规律。方阵试验确定的GST-mTSST-1抗原的最适包被浓度为5.0μg/mL,血清最佳稀释倍数为1∶100,ELISA阳性反应的临界值为D490 nm≥0.219,批内和批间重复试验的变异系数均小于10%。应用该方法对试验小鼠血清进行检测,结果表明,建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性、特异性和较好的重复性,适用于检测特异性GST-mTSST-1血清抗体。
- 郭海勇崔京春钱爱东
- 关键词：金黄色葡萄球菌融合蛋白间接ELISA超抗原
- 猪流行性腹泻病毒血清IgA抗体间接ELISA方法的建立被引量：11
- 2019年
- 建立了检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)IgA抗体的间接ELISA方法,旨在为PEDV感染检测与免疫效果评价提供技术手段。以重组PEDV结构蛋白(S1蛋白)作为包被抗原,采用方阵滴定法确定抗原包被浓度、封闭液、稀释液以及待测血清和酶标抗体的最佳工作浓度,建立了PEDV IgA抗体检测间接ELISA方法。进而检测方法的特异性、批内与批间重复性,评价建立方法与国外试剂盒的符合率,分析ELISA检测血清特异性IgA抗体水平与中和抗体的相关性。结果显示,ELISA方法的最佳抗原包被浓度为1 mg/L,封闭液和抗体稀释液为含5%犊牛血清的PBS,待检血清和酶标抗体的工作浓度分别为1∶40与1∶1 500倍稀释。结果表明,该ELISA能够特异地检测PEDV抗体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型等病毒的抗血清无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数低于10%,与现有试剂盒的总符合率为94.8%,血清特异性IgA抗体水平与中和抗体呈正相关(r=0.69,P<0.001)。
- 孙立旦陈立功周双海李艳琴郭海勇李潭清宋勤叶
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S1蛋白间接ELISAIGA中和抗体
- 山羊胚胎胃肠道细菌的分离与鉴定
- 2013年
- 对不同妊娠日龄的山羊胚胎胃肠道细菌进行分离、纯化和培养,得到10个细菌菌株,通过细菌培养特性、显微镜检、生化试验和16S rDNA基因序列测定及同源性分析。结果表明：10个细菌菌株的平均数量为（0.8~1.0）×10^2cfu/g,且分别属于葡萄球菌属（Staphylococcus）、肠杆菌属（Enterobactersp.）、芽孢菌属（Bacillus）和明串珠菌属（Leuconostoc）4个菌属。
- 于超郭海勇吴同磊王建钱爱东
- 关键词：胃肠道微生物菌群
