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兰州地区5岁以下婴幼儿病毒性腹泻的分子流行病学研究被引量：22: 2011年; 目的调查兰州地区5岁以下婴幼儿病毒性腹泻的流行情况，了解四种主要腹泻病毒在儿童中的分布情况。方法采集2009年7月至2010年6月兰州大学第一医院儿科5岁以下腹泻患儿粪便标本290份及儿童保健中心健康婴幼儿正常粪便标本114份，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测轮状病毒抗原，采用巢式聚合酶链反应对轮状病毒阳性标本进行分型；采用反转录．聚合酶链反应（RT—PCR）检测杯状病毒和星状病毒，聚合酶链反应（PCR）检测腺病毒。结果290份腹泻标本中四种病毒的阳性率分别为：轮状病毒39．31％，杯状病毒11．38％，腺病毒10．69％，星状病毒4．83％；对114份轮状病毒阳性标本G、P分型，G3型及P[8]型为优势株；114份正常标本轮状病毒检出率为0，杯状病毒检出7例，星状病毒检出1例，腺病毒检出5例。结论病毒性病原在兰州地区婴幼儿腹泻中占有重要地位，长期系统的监测具有重要意义。; 罗璇金玉李宇宁李金松程卫霞蒿叶霞王永霞崔淑娴段招军; 关键词：流行病学

人博卡病毒VP2蛋白的原核表达及血清学检测方法的建立被引量：3: 2012年; 目的获得高表达量的人博卡病毒（HBoV1、HBoV2）VP2蛋白，建立血清学检测方法。方法按照大肠埃希菌密码子使用偏性，对HBoV1、HBoV2VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化合成。将合成的目的基因克隆至表达载体pET30a，构建重组表达质粒pET30a-VP2，转化大肠埃希菌BL21（DE3），使用IPTG诱导表达并摸索最佳表达条件；粗提取蛋白进行Ni亲和层析纯化后建立间接酶联免疫吸附试验（ELISA），进行临床血清标本筛查，分析人群HBoV1、HBoV2感染情况。结果优化合成的HBoV1、HBoV2VP2基因正确连接至pET30a载体，开放阅读框正确，用1mmol／LIPTG过夜诱导表达（25℃）得到高表达量的VP2蛋白，目的蛋白主要以包涵体的形式存在。粗提取蛋白经Ni—NTA亲和层析，在pH4．5时获得较理想的纯化蛋白，以其为抗原建立ELISA检查方法，筛查临床血清标本IgG抗体水平，结果显示健康儿童HBoV1阳性率为62．2％，HBoV2阳性率为55．5％，混合感染率为37％。结论本研究成功将H-BoV1、HBoV2VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化，得到了较高的蛋白表达量，所建立的ELISA法可以应用于HBoV1、HBoV2人群血清流行病学调查。; 蒿叶霞高基民金玉李晓乐李金松谢志萍敖元云陈惜倩陈克娜段招军; 关键词：人博卡病毒密码子酶联免疫吸附试验

人博卡病毒HJBOV结构蛋白VP2的表达及血清学流行病学研究: 蒿叶霞; 文献传递网络资源链接

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