李金松
- 作品数：43 被引量：110H指数：7
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人博卡病毒VP2蛋白的原核表达及血清学检测方法的建立被引量：3
- 2012年
- 目的获得高表达量的人博卡病毒（HBoV1、HBoV2）VP2蛋白，建立血清学检测方法。方法按照大肠埃希菌密码子使用偏性，对HBoV1、HBoV2VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化合成。将合成的目的基因克隆至表达载体pET30a，构建重组表达质粒pET30a-VP2，转化大肠埃希菌BL21（DE3），使用IPTG诱导表达并摸索最佳表达条件；粗提取蛋白进行Ni亲和层析纯化后建立间接酶联免疫吸附试验（ELISA），进行临床血清标本筛查，分析人群HBoV1、HBoV2感染情况。结果优化合成的HBoV1、HBoV2VP2基因正确连接至pET30a载体，开放阅读框正确，用1mmol／LIPTG过夜诱导表达（25℃）得到高表达量的VP2蛋白，目的蛋白主要以包涵体的形式存在。粗提取蛋白经Ni—NTA亲和层析，在pH4．5时获得较理想的纯化蛋白，以其为抗原建立ELISA检查方法，筛查临床血清标本IgG抗体水平，结果显示健康儿童HBoV1阳性率为62．2％，HBoV2阳性率为55．5％，混合感染率为37％。结论本研究成功将H-BoV1、HBoV2VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化，得到了较高的蛋白表达量，所建立的ELISA法可以应用于HBoV1、HBoV2人群血清流行病学调查。
- 蒿叶霞高基民金玉李晓乐李金松谢志萍敖元云陈惜倩陈克娜段招军
- 关键词：人博卡病毒密码子酶联免疫吸附试验
- 人A组G2P[4]型轮状病毒的分离培养和鉴定被引量：1
- 2022年
- 目的对我国轮状病毒A组G2P[4]流行株进行分离培养和鉴定。方法采用轮状病毒抗原胶体金法筛查56份病毒性腹泻患儿粪便标本,对阳性样本VP7和VP4基因测序确定其G和P基因型别,并接种至MA-104细胞,持续传代。运用SDS-PAGE电泳、实时荧光定量PCR、间接免疫荧光、嗜斑实验和电镜等技术进行鉴定。结果检出轮状病毒阳性样本46份,测序确定G2P[4]型2株,细胞培养盲传5代,嗜斑纯化后G2P[4]型毒株RNA PAGE电泳图呈DS-1株轮状病毒的(4:2:3:2)形态,电镜下呈车轮状形态,轮廓清晰,病毒滴度随时间变化逐步上升。结论成功从粪便样本中分离和培养出G2P[4]型A组轮状病毒。
- 高升辉王明雯李利利李丹地宋敬东王雅璐毛彤瑶吴建军李金松段招军
- 关键词：轮状病毒PAGE电泳电镜
- GII.8和GII.9型诺如病毒P蛋白糖结合特征研究
- 2023年
- 目的了解GII.8和GII.9型诺如病毒P蛋白的糖结合特征。方法利用大肠杆菌系统获得GII.8和GII.9诺如病毒P颗粒蛋白,通过寡糖和唾液结合实验,研究P颗粒蛋白与组织血型抗原等糖的相互作用,再采用序列比对和结构比较,分析GII.8和GII.9糖结合位点的序列和结构特征。结果GII.8 P蛋白与所检测的寡糖无明显结合,与部分人A/B/O型别唾液样本有结合。GII.9 P蛋白结合H双糖,与人A/B/O型别唾液有很好结合。序列和结构分析均显示GII.8 P蛋白具有与GIII.9相似的潜在糖受体结合位点,其位点与流行株GII.4等型别的糖受体区区相近。结论非流行株GII.8和GII.9 P蛋白与不同组织血型抗原的结合能力不同,提示可能会造成流行的差异,需要对非流行株开展持续的分子监测。
- 吴铮苏韫曦丛鑫魏宇航孔翔羽靳淼李丹地李金松孙晓曼段招军
- 关键词：诺如病毒
- 2019年我国5岁以下腹泻住院患儿星状病毒感染的流行特征分析被引量：1
- 2022年
- 目的了解2019年我国5岁以下腹泻住院患儿星状病毒(Astrovirus,AstV)感染的流行特点,为AstV腹泻防控提供参考。方法收集2019年各监测哨点医院的5岁以下腹泻住院患儿粪便样本及临床信息。采用RT-PCR检测AstV,描述AstV感染的流行特征。结果采集5岁以下腹泻住院患儿粪便标本共4918份,检测4531份,AstV阳性检出率为5.30%,四川省AstV阳性检出率最低(1.23%),甘肃省AstV阳性检出率最高(14.36%);AstV在男性患儿和女性患儿中阳性检出率分别为5.14%和4.52%,无明显性别差异(P>0.05);AstV感染无明显年龄、城乡差别和季节特征(P>0.05);AstV阳性病例中,常见临床表现为腹泻伴呕吐等症状,腹泻次数多为0~2次,粪便性状常为水样便。结论AstV是我国5岁以下腹泻住院患儿的主要病原之一,临床诊疗时须予以考虑,需持续开展监测。
- 王明雯高升辉孙晓曼李静欣李金松李丹地段招军
- 关键词：病毒性腹泻星状病毒
- 一株人轮状病毒G2P[4]型毒株的近似全基因组进化分析
- 2022年
- 目的分析轮状病毒G2P[4]型2020BJ株的近似全基因组进化特征。方法运用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)进行轮状病毒基因组扩增,将扩增产物测序,对所得序列进行系统进化和同源性分析。结果获得人轮状病毒G2P[4]型2020BJ株近似全长的11个节段核酸序列,序列分析表明其为G2-P[4]-I2-R2-C2-M2-A2-N2-T2-E2-H2基因型(DS-1-Like);进化分析表明与日本、印度、孟加拉及意大利等国家毒株亲缘关系较近;亲缘关系较近的毒株间抗原表位的氨基酸存在差异。结论与2020BJ亲缘关系较近的5株G2P[4]型轮状病毒VP7和VP4的抗原表位的氨基酸存在差异,可能导致流行特征不同,应加强轮状病毒监测。
- 高升辉李利利李丹地朱曦王萌璇王明雯吴建军李金松
- 关键词：轮状病毒基因型全基因组系统进化树
- 儿童不明原因急性重症肝炎的监测和应对
- 2022年
- 自2022年4月份以来,多个国家向世界卫生组织(WHO)报告了儿童不明原因急性重症肝炎病例(已排除由肝炎病毒A-E和其它导致急性肝炎的常见病因)较以往大幅增加。这些病例高度散发,发病人群为16岁以下儿童及青少年,病情进展快、症状重。早期病例约10%预后不佳。WHO认为此次不明原因急性重症肝炎事件已成为全球关注的暴发事件。欧盟疾控中心(ECDC)评估其为"令人担忧的公共卫生事件"。本文就此次全球儿童不明原因急性重症肝炎事件的进展、监测和应对等进行综述,供相关领域学者及公共卫生机构参考。
- 李金松段招军
- 关键词：急性肝炎腺病毒新型冠状病毒
- ARIMA模型在浙江省2007—2017年其它感染性腹泻发病情况预测中的应用被引量：3
- 2021年
- 目的探讨应用差分整合移动平均自回归模型(autoregressive integrated moving average,ARIMA)分析预测2007—2017年浙江省其它感染性腹泻发病情况。方法利用国家人口与健康科学数据中心公共卫生科学数据中心提供的浙江省2007—2016年各月其它感染性腹泻发病人数的数据,用SPSS 25.0软件构建时间序列分析ARIMA模型,预测2017年每月的发病人数,并用该中心提供的实际值对模型进行评估。结果对基于2007—2016年其它感染性腹泻发病情况建立的ARIMA模型进行训练和序列验证,再通过建立Box-Ljung检验和BIC检验,最终确定ARIMA(0,1,2)(0,1,0)_(12)为非平稳时间序列最优模型,2017年的预测值与2017年实际数据对比,准确性较高。结论ARIMA(0,1,2)(0,1,0)_(12)模型对浙江省其它感染性腹泻流行的预测效果较好,预测结果将为其它感染性腹泻的监测和预防提供理论支撑。
- 高升辉王明雯李丹地李静欣李金松吴建军段招军
- 关键词：ARIMA时间序列其它感染性腹泻发病数
- 1株轮状病毒疫苗衍生株的分离和鉴定
- 2023年
- 目的对1例免疫功能正常的急性胃肠炎(Acute gastroenteritis,AGE)成人患者感染的轮状病毒(Rotavirus,RV)疫苗衍生株(Vaccine-derived strain,VDS)进行鉴定和探究其AGE病因。方法采集与1名接种口服五价人-牛重配RV减毒活疫苗(Pentavalent oral live human-bovine reassortant rotavirus vaccine,RV5)儿童密切接触且患AGE的母亲的粪便标本,采用实时逆转录聚合酶链反应(Real-time reverse transcription-polymerase chain reaction,Real-time RT-PCR)、RT-PCR或PCR筛查RV等常见致AGE的病毒,采用MA104细胞对RV进行分离培养,通过RT-PCR扩增和测序获得全基因组,采用聚丙烯凝胶电泳进行双链RNA电泳带型鉴定,利用在线分型工具分型,进行Blastn和Blastp序列比对。结果从该AGE患者粪便标本中筛查出RV;细胞培养在盲传第二代时产生明显的细胞病变效应;该分离株经VP4/VP7基因测序显示为源于RV5的G4P[5]基因型RV5 VDS,且呈现A组RV独特的4∶2∶3∶2双链RNA电泳图谱;与RV5原型株相比,该分离株的NSP3节段核苷酸发生G283 T变异,推导氨基酸发生D95Y变异,其他节段的核苷酸和氨基酸序列相似性为100%。结论该成人AGE患者感染的RV5 VDS可能来自接种RV5的儿童,但导致该成人AGE的可能性较小;尚需加强监测以评估其公共卫生意义。
- 何莲花冯瑄陈燕姜慧敏李金松张少白段招军
- 关键词：轮状病毒轮状病毒疫苗急性胃肠炎
- 儿童轮状病毒胃肠炎免疫预防专家共识(2024年版)
- 2024年
- 轮状病毒胃肠炎(Rotavirus gastroenteritis,RVGE)是严重威胁5岁以下儿童健康的全球性公共卫生问题。中国RVGE相关疾病负担重,防控难度大。本共识在《儿童轮状病毒胃肠炎免疫预防专家共识(2020版)》和《世界卫生组织轮状病毒疫苗立场文件—2021年7月》的基础上,系统综述了RVGE流行病学、已上市轮状病毒(Rotavirus,RV)疫苗的安全性、有效性和免疫保护持久性、RV疫苗免疫策略等国内外研究进展,增补了常见的RVGE诊疗方案。本共识旨在从预防为主和医防融合的角度出发,推动落实以疫苗接种为重点的RVGE综合性防控措施,降低儿童RVGE疾病负担,为从事疾病预防控制、疫苗接种、临床诊疗等多领域的工作人员提供参考。
- 轮状病毒胃肠炎专家共识编写组段招军李金松张静邓莉赵鲁卿李丹地李静欣
- 关键词：轮状病毒胃肠炎轮状病毒疫苗免疫预防
- 小鼠肠道类组织三维培养体系的建立及用于喜马拉雅旱獭甲型肝炎病毒增殖研究
- 2017年
- 目的建立小鼠肠道类组织并用于喜马拉雅旱獭甲肝病毒（Marmota Himalayana hepatovirus，MHHAV）增殖研究。方法用高浓度EDTA消化Balb／C小鼠肠道隐窝，在基质胶上培养，并传代冻存肠道类组织，后单层培养接种在96孔板上，感染MHHAV，使用Real—time qPCR检测不同时点病毒浓度．并与多种常规用于培养甲肝病毒的细胞系进行比较病毒增殖情况。结果成功建立了小鼠肠道类组织培养体系，MHHAV在常用于培养甲肝病毒的细胞系上不增殖，但在小鼠肠道类组织上能够明显增殖，病毒在4d左右增殖约3700倍。结论小鼠肠道类组织能够用于MHHAV的分离培养。
- 林琳陈爱珺陈爱珺李利利
- 关键词：病毒增殖
