董兰
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 供职机构：广州市儿童医院更多>>
- 发文基金：广州市重大科技攻关项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIF-1αsiRNA重组腺病毒对缺氧肺微血管内皮细胞HIF-1α和ET-1表达的影响
- 2009年
- 目的研究缺氧诱导因子-1αsiRNA重组腺病毒(Ad/siHIF-1α)对缺氧肺微血管内皮细胞(RPMVECs)HIF-1α及其下游基因ET-1表达的影响。方法原代培养肺微血管内皮细胞(RPMVECs);应用HEK293细胞大量扩增Ad/siHIF-1α。将RPMVECs分6组:A组(正常对照:常氧下5%CO2、95%空气、37℃培养);B组(含100μmol/L COCl2培养基培养4h);C组(Ad/siHIF-1α感染24h后,加入COCl2培养4h);D组(Ad/siHIF-1α感染48h后,加入COCl2培养4h);E组(Ad/siHIF-1α感染72h后,加入COCl2继续培养4h);F组(单纯腺病毒感染72h后,加入COCl2培养4h)。采用荧光定量PCR法检测HIF-1α和ET-1mRNA表达;Western blotting法检测HIF-1α蛋白表达;ELISA法检测ET-1蛋白表达。结果与B组比较,C、D及E组HIF-1αmRNA、HIF-1α蛋白表达显著下调,差异有显著性(均P<0.05);与B组比较,C、D及E组ET-1mRNA、ET-1蛋白也相应下调,差异有显著性(均P<0.05)。结论Ad/siHIF-1α能够有效沉默缺氧诱导的大鼠肺血管内皮细胞HIF-1α基因,继而影响其下游ET-1基因的表达,为下一步在动物体内研究HIF-1α及其下游基因ET-1在新生儿肺出血发病机制中发挥作用。
- 陶莉董兰何柳芳陈克正吕回
- 关键词：小分子干扰RNA缺氧诱导因子-1腺病毒肺微血管内皮细胞缺氧
- 低温缺氧/复温供氧损伤性人脐静脉内皮细胞缺氧诱导因子-1α的表达
- 2005年
- 目的检测低温缺氧/复温供氧缺损的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达。方法原代培养HUVECs随机分为对照组(C组)和三个实验组(H2,H4,H4R2组),H2和H4组予以单纯低温(10℃)缺氧(5%O2)培养2及4h,H4R2组低温缺氧4h后,再于常温(37℃)高氧(95%O2)环境培养2h。结合形态学和细胞存活率反映HUVECs损伤程度,采用免疫组化(SP法)检测HIF-1α蛋白表达水平。结果H4R2组细胞膨胀呈球形,细胞存活率明显下降(与另3组比较,P<0.01);H2,H4组HIF-1α表达升高(与C组比较,P<0.05),H4R2组下降(与H2,H4组比较,P<0.05),但仍较C组高。结论低温缺氧/复温供氧可致HUVECs损伤,且主要发生于复温供氧期,HIF-1α参与了此过程。
- 陶莉何柳芳董兰陈克正
- 关键词：低温缺氧人脐静脉内皮细胞缺氧诱导因子-1Α
- 新生儿肺出血病因、发病机制及临床防治研究
- 陈克正陈晓文王卫陶莉吕回赵宁高晓燕董兰何柳芳司徒勋马岳
- 成果用于降低新生儿肺出血病死率。该课题通过临床及动物实验，对肺出血病因、病理、发病机制研究共有11项创新，科研成果转化为临床应用，包括诊断、治疗、预防、预后等共有8项。课题达到国内领先、国际先进水平。
- 关键词：
- 关键词：新生儿肺出血发病机制动物实验
- 人脐静脉内皮细胞中还原型辅酶Ⅱ氧化酶对缺氧诱导因子-1α及内皮素-1表达的影响及其机制探讨被引量：7
- 2006年
- 目的研究人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶对缺氧诱导因子(HIF)1α和内皮素(ET)1表达的影响及其机制。方法HUVECs培养液共25瓶,分为A(常氧)组、B(缺氧)组、C(NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素+常氧)组、D(可迅速降解HIF1α的外源性H2O2+缺氧)组及E(H2O2+夹竹桃麻素+常氧)组,每组各5瓶。各组处理3h后收集培养上清液及提取细胞总蛋白,分别用WesternBlot法和ELISA法检测细胞中HIF1α蛋白水平和上清液中ET1水平。结果A组HIF1α灰度扫描比值为0.336±0.012,ET1值为5.87±2.22pg/mL,均呈低水平表达;B及C组HIF1α灰度扫描比值分别为0.773±0.018及0.888±0.022,ET1值分别为95.38±8.06pg/mL及33.67±4.21pg/mL,水平均显著高于A组(均P<0.05);D及E组HIF1α灰度扫描分别为0.330±0.016及0.318±0.034,比值呈低水平表达,但ET1值分别为108.43±8.38pg/mL及109.66±5.80pg/mL,水平均显著高于A组(均P<0.05)。结论缺氧或夹竹桃麻素可诱导HUVECs的HIF1α和ET1表达升高,H2O2可抑制HIF1α表达,但仍使ET1表达升高。其机制可能是作为氧感受器的NADPH氧化酶通过改变细胞内氧化还原状态而使HIF1α表达发生变化,其下游基因ET1表达除受HIF1α调控外,还存在H2O2的调控机制。
- 董兰陈克正何柳芳
- 关键词：内皮细胞缺氧诱导因子内皮素夹竹桃麻素NADPH氧化酶缺氧
