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α-亚麻酸减轻糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤被引量：2: 2012年; 目的研究摄食α-亚麻酸(ALA)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤的影响。方法构建高脂饲料-链脲霉素诱导的2型糖尿病大鼠模型(HFD-STZ),每日灌胃给予正常或HFD-STZ大鼠ALA处理(500μg/kg),4周后行心肌缺血(30 min)/再灌注(4或6 h),并检测心肌梗死范围、血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞凋亡,用Western blot检测PI3K、Akt等。结果 HFD-STZ大鼠MI/R损伤加重,虽摄食ALA 4周对正常动物MI/R损伤无影响,但可将HFD-STZ大鼠的心梗面积减小至37.7%±5.4%,显著低于对照组的45.6%±8.5%(P<0.05),且血清CK、LDH活性及细胞凋亡减少;还可增加HFD-STZ大鼠心肌PI3K表达及Akt磷酸化。结论长期摄食ALA有效减轻糖尿病大鼠MI/R损伤,可能与激活PI3K-Akt信号有关。; 田菲张薇周和平刘楠楠于军陈宝莹张海锋; 关键词：Α-亚麻酸糖尿病心肌缺血再灌注损伤

选择性κ阿片受体激动剂U50,488H改善高脂血症引起的血管内皮功能障碍及其机制: 背景:高脂血症及其引起的血管内皮功能障碍是动脉粥样硬化等心血管疾病发病的重要环节,本文研究了选择性κ阿片受体激动剂U50,488H对高脂血症大鼠血管内皮结构与功能的影响及其机制。方法与结果:8周龄雄性SD大鼠随机分为正常...; 裴建明郑煦暘田菲; 关键词：高脂血症内皮功能障碍; 文献传递

水飞蓟素诱导高转移表型肺癌细胞系（Anip973）细胞凋亡的分子机制研究: 2009年; 目的探讨水飞蓟素诱导高转移表型肺癌细胞系A．i0973细胞凋亡的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTF）比色法、倒置显微镜和电子显微镜等形态学检测、流式细胞仪（FCM）技术检测、DNA Ladder分析、PARP的表达分析以及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和caspase-9表达活性分析。结果水飞蓟素对人高转移表型肺癌细胞系埘p973细胞的增殖有显著抑制作用。随着浓度的增加，倒置显微镜下可见细胞数目减少，胞体变小、变圆，到高浓度时出现较多的死亡细胞。扫描电镜观察发现，凋亡细胞表现出典型的超微结构特征。流式细胞仪检测显示G1期细胞比例增多，S期细胞明显减少，G2期细胞略有减少，并出现明显的凋亡峰。水飞蓟素作用后的Anip973细胞出现明显的DNA Ladder和PARP降解增加等凋亡特征。凋亡相关蛋白Bax表达增加、caspase-3和caspase-9酶活性增加，而Bcl-2表达降低。结论水飞蓟素可以在体外抑制人肺腺癌细胞Anip973的增殖作用，并通过激活线粒体依赖的easpase凋亡通路，诱导其凋亡。; 李文海梁军王春梅刘楠楠田菲胡运生刘锟; 关键词：水飞蓟素细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

微波诱导鼠成骨肉瘤细胞凋亡的研究: 2009年; 目的:探讨微波诱导鼠成骨肉瘤细胞系UMR106细胞凋亡及其适宜作用剂量、作用时间.方法:以微波不同剂量和时间作用于鼠成骨肉瘤细胞系,采用形态学观察、MTT法、软琼脂集落形成实验、FCM等方法观察微波诱导成骨肉瘤细胞的凋亡.结果:不同剂量的微波照射大鼠成骨肉瘤细胞后细胞形态发生了改变,随照射剂量的增高,细胞逐渐脱离基质;成骨肉瘤细胞在不同剂量的微波进行相同时间(1h)照射下存活率均显著下降,并呈剂量依赖性;微波作用于UMR106细胞的IC50为100W/m2微波辐射下不同时间后,细胞的存活率显著下降,呈时间依赖性;微波辐射下大鼠成骨肉瘤细胞出现G1期阻滞.结论:微波辐射可诱导大鼠成骨肉瘤细胞凋亡,其最佳作用时间和剂量为1h和100W/m2.; 曾慈梅刘楠楠田菲王爽; 关键词：微波成骨肉瘤凋亡

中央杏仁核内CGRP能阳性突触的超微结构研究被引量：1: 2012年; 目的:观察降钙素基因相关肽(calcitonin-gene-related peptide,CGRP)样阳性终末在中央杏仁核(cen-tral nucleus of amygdala,CeA)内形成的突触的超微结构。方法:应用免疫荧光组织化学和包埋前免疫电镜等方法,观察CGRP样阳性终末在CeA内所形成的突触分布形式及结构特点。结果:CGRP样阳性终末在中央杏仁核内可以与细胞体、树突干和树突棘等结构形成突触;轴-体突触几乎全为对称性突触,而轴-树突触和轴-棘突触则多为非对称性突触。在所有的非对称性突触里,轴-树突触占84.9%,而轴-棘突触占15.1%。CGRP样阳性轴-树的突触后致密带的平均长度为(790.77±313.55)nm,而轴-棘突触的突触后致密带的平均长度为(723.34±357.20)nm,两者之间没有显著性差异。结论:CGPR样阳性的兴奋性突触尤其是轴-树突触在伤害性信息传递以及痛相关情绪的产生中发挥了重要作用。; 鲁亚成田菲李云庆董玉琳; 关键词：中央杏仁核 CGRP

U50,488H对高脂大鼠血管内皮功能的影响: 2015年; 目的探讨κ-阿片受体(κ-OR)选择性激动剂U50,488H对高脂大鼠血管内皮功能的影响及其机制。方法成年SD大鼠分别饲以正常和高脂饲料14周,腹腔隔日注射U50,488H和κ-OR阻断剂nor-BNI,麻醉后下腔静脉取血,检测总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白(LDL)的水平。透射电子显微镜观察动脉内皮细胞和平滑肌细胞的超微结构改变。观察胸主动脉对内皮依赖性血管舒张剂乙酰胆碱(ACh)及内皮非依赖性血管舒张剂(SNAP)的舒张反应。结果高脂饲料喂养可引起大鼠血清TC和LDL显著升高;主动脉血管内皮依赖性舒张功能显著降低。透射电镜下可见动脉内皮细胞和平滑肌细胞的超微结构出现损伤。U50,488H可显著减轻高脂血症引起的血管内皮依赖性舒张功能障碍和动脉内皮细胞与平滑肌细胞超微结构损伤,κ-OR阻断剂nor-BNI可以阻断U50,488H的上述作用。结论高脂血症大鼠存在内皮功能障碍,U50,488H可通过激活κ-OR改善高脂血症导致的内皮结构改变和功能障碍。; 褚晓月郑煦阳田菲李嘉贾敏李娟裴建明; 关键词：Κ-阿片受体高脂血症血管内皮功能

银杏黄酮对急性心肌缺血/再灌注的药理作用被引量：16: 2007年; 目的本研究通过观察银杏黄酮对家兔心肌缺血/再灌注的作用,为其临床应用寻找新的证据。方法家兔随机分为2组,对照组和银杏黄酮组,每组5只,口服给药,连续7d。以常规方法制备兔心肌缺血/再灌注模型。记录心率、血压、左心室内压、左心室内压微分变化。同时观察银杏黄酮对家兔急性心肌缺血/再灌注治疗后减轻心肌梗死的情况。结果心肌缺血及再灌注后心率、血压、左心室内压等在银杏黄酮治疗组与正常对照组无显著差异。左心室内压微分在心肌缺血和缺血/再灌注中,银杏黄酮组与对照组有显著差异(P<0.05)。银杏黄酮治疗后对家兔急性心肌缺血/再灌注可减轻心肌梗死,银杏黄酮组与对照组有显著差异(P<0.01)。结论银杏黄酮对急性心肌缺血/再灌注后心率、血压、心左室内压无明显影响,但却非常明显地减少由于缺血所造成的心肌组织的梗死面积。; 陈健康卫张蕊刘水冰唐小凤田菲田琼王跃民; 关键词：银杏黄酮

重组质粒pFLAG-CMV2-FcDDR2的构建及应用: 2015年; 目的构建人盘状结构域受体2(DDR2)与IgG Fc段嵌合受体的重组质粒(pFLAG-CMV2-Fc DDR2),检测其自主磷酸化水平。方法设计Fc DDR2克隆引物,以质粒pSec Tag2B-Fc DDR2为模板,PCR扩增IgG Fc段与DDR2跨膜区和胞内区的c DNA序列(Fc DDR2),将其插入pFLAG-CMV2真核表达载体中。PCR扩增鉴定并测序验证重组质粒pFLAG-CMV2-Fc DDR2后,将其转染人胚肾HEK293T细胞,Western blot法验证HEK293T细胞中目标蛋白Fc DDR2的表达效率。将pcDNA3.1-DDR2转染HEK293T细胞,给予2型胶原蛋白刺激后作为阳性对照,用小鼠来源抗DDR2抗体免疫沉淀`pFLAG-CMV2-Fc DDR2阳性的HEK293T细胞及胶原刺激的pcDNA3.1-DDR2阳性的HEK293T细胞,4G10抗体分析DDR2的磷酸化水平,评价Fc DDR2的自主磷酸化能力。结果重组质粒pFLAG-CMV2-Fc DDR2的PCR扩增产物为大小约2800 bp左右的片段,与预期相符,测序验证正确。Western blot结果提示pFLAG-CMV2-Fc DDR2转染后的HEK293T细胞,FLAG-Fc DDR2表达水平显著上调。免疫沉淀结合Western blot分析提示FcDDR2的磷酸化水平与胶原刺激后的DDR2水平相当。结论成功构建了pFLAG-CMV2-FcDDR2真核表达载体,Fc DDR2的自主磷酸化与胶原蛋白刺激后DDR2的活化水平相当,可以用作DDR2经胶原蛋白刺激后的活化替代形式。; 赵薇张昭黄同列穆楠田菲张伟; 关键词：重组质粒磷酸化

聚丙烯酰胺水凝胶对 L929细胞的细胞毒性研究: 比较国产聚丙烯酰胺水凝胶（FH）与进口聚丙烯酰胺水凝胶（IT）的细胞毒性。用 MTT 法检测 L929细胞在不同浓度的两种聚丙烯酰胺中的相对增殖率（RGR,%）,按通用标准评价材料的细胞毒性。L929细胞在12．5%的 ...; 田菲吴军正鲁开化艾玉峰田薇; 关键词：聚丙烯酰胺水凝胶细胞毒性; 文献传递

盘状结构域受体2胞外区在酵母系统中的融合表达、纯化和功能鉴定被引量：1: 2007年; 目的:盘状结构域受体2(discoidin domain recep-tor2,DDR2)是一种与肿瘤细胞转移相关的蛋白酪氨酸激酶,研究DDR2在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)软骨破坏和肿瘤转移中的作用.方法:在毕赤酵母中表达DDR2胞外区片段(不含信号肽和跨膜区,命名为DR),并将所表达的蛋白进行纯化和功能鉴定,以备将来用作DDR2的特异性阻断剂.结果:获得了两株较高表达His-DR融合蛋白的毕赤酵母克隆;其表达的蛋白质中可溶性部分约占全部融合蛋白的18%;经Ni-NTA(nitric-tri-acetic acid)柱纯化后,获得了纯度约90%以上的可溶性His-DR融合蛋白;竞争结合抑制实验显示,His-DR具有阻断和细胞表面天然DDR2受体结合的功能.结论:所表达的融合蛋白His-DR具有抑制天然DDR2功能的作用.; 陈健康张伟刘楠楠刘利兵田菲铁茹; 关键词：盘状结构域受体2 胞外区基因表达阻断剂

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田菲

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