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重组李斯特细菌载体HIV疫苗LmHIV CN54 gag的培养温度及免疫剂量与其毒力及免疫原性的关系研究: 刘莹刘芳王荣敏刘颖邵一鸣王书晖

缺失C8-K3片段重组天坛痘苗病毒的免疫策略研究: 2013年; 目的探索不同的DNA疫苗初免-重组痘苗病毒加强免疫策略的效果,为建立最佳免疫方案提供依据。方法对小鼠进行DNA疫苗初免,之后分别加强免疫一针、两针和三针重组痘苗病毒VTT△C8-K3-gag,在不同时间点采取血样及制备脾细胞,检测针对痘苗病毒和HIV特异性体液免疫及细胞免疫应答。结果三种免疫策略中,DNA疫苗初免-VTT△C8-K3-gag加强免疫两次的效果最佳,诱导的针对p55的结合抗体滴度达到106,分泌IFN-γ的T细胞数为342/106细胞。针对痘苗病毒的体液和细胞免疫应答显著低于加强免疫三针诱导的免疫反应。结论DNA疫苗初免-VTT△C8-K3-gag加强免疫两针可诱导较高水平的HIV免疫应答,同时保证了较低水平的载体免疫反应。; 刘铮刘颖王书晖张其程王荣敏侯爵刘畅吉栩邵一鸣; 关键词：痘苗病毒天坛株 DNA疫苗免疫策略

重组痘苗病毒HIV疫苗肌注初免蛋白疫苗滴鼻加强后激发高强度黏膜IgA应答反应被引量：1: 2015年; 目的研究痘苗病毒载体HIV疫苗和蛋白疫苗联合运用所激发的黏膜免疫应答，探讨不同途径免疫产生黏膜免疫应答的异同，进一步证实MF59佐剂在激发疫苗黏膜免疫应答方面的效果。方法以表达HIV-1中国流行株CN54 Gag—Pol—Env基因的重组痘苗病毒天坛株rTV，重组HIV-1膜蛋白gp140三聚体为抗原，辅以水包油型佐剂（oil—in—water）MF59，在小鼠模型上，通过不同免疫途径组合联合免疫BALB／c小鼠，即重组痘苗病毒初免，免疫途径为滴鼻或肌注，gp140与MF59混合物加强免疫，免疫途径为滴鼻、肌注或皮下，探讨能诱导高效黏膜免疫应答的免疫策略。通过ELISA方法对小鼠血清中HIV-1特异性的IgG和IgA及唾液和阴道分泌物中IgA进行检测。结果MF59是一种良好的黏膜佐剂，能显著增强HIV蛋白疫苗的黏膜免疫应答，所激发的黏膜IgA滴度与鞭毛素蛋白（SF）和霍乱毒素B亚单位（CTB）的黏膜佐剂活性相当；重组痘苗病毒初免（肌注），gp140与MF59加强（滴鼻）联合免疫策略能诱导高水平的血清IgA和黏膜IgA抗体（P〈0．05），其抗体滴度分别高达1：15000和1：600。结论重组痘苗病毒天坛株rTV系统途径免疫小鼠后蛋白疫苗黏膜途径加强能激发高强度黏膜免疫应答，这一免疫策略及组合可为阻断通过口腔和阴道黏膜传播的艾滋病疫苗研究提供参考。; 刘芳刘莹王荣敏邵一鸣刘颖王书晖; 关键词：HIV疫苗重组痘苗病毒蛋白疫苗

痘苗病毒天坛株C8L—K3L片段缺失表达载体的生物学性能研究: 2013年; 目的研究缺失C8L．K3L片段的痘苗病毒天坛株载体的生物学性能及外源基因的免疫原性。方法构建缺失C8L-K3L区域的重组痘苗病毒天坛株载体VrITT△c8-K3-gag。在4种细胞上检钡0了重组载体的增殖能力、在小鼠和家兔模型上进行毒力评价，并在BALB／c小鼠进行了免疫效果评价。结果与Vrrr相比，VTTAC8-K3-gag在CEF、BHK-21、HeLa细胞中复制能力显著下降，在Vero细胞中失去复制能力。VTYAC8-K3-gag在小鼠和家兔模型中毒力均有显著降低。VTT△C8-K3-gag免疫小鼠第4周后诱导的痘苗病毒特异结合抗体与中和抗体滴度分别达到5．6×10^3和1．0×10^4，第9周滴度弦到5．8×10^5和5．25×10^3，与VTKgpe相比均显著下降3～9倍，但E3刺激后的细胞免疫应答无显著变化。VTT△C8-K3-gag单独免疫或与DNA疫苗联合免疫诱导的HIV特异性抗体水平和细胞免疫应答均与VTKgpe无差异。结论VTrAC8-K3-gag是一个安全性较高且具有深入研究价值的HIV候选疫苗株。; 刘铮刘颖王书晖张其程刘莹侯爵王荣敏邵一鸣; 关键词：痘苗病毒天坛株毒力免疫应答

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王荣敏

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