刘铮
- 作品数：6 被引量：4H指数：2
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- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
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- IL-12对HIV痘病毒载体疫苗毒性和免疫原性的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨提高HIV痘病毒天坛株载体疫苗(vTKgpe)的免疫原性及细胞免疫反应。方法用同源重组方法在HIV痘病毒天坛株载体疫苗基因组中插入鼠白介素12(IL12)基因,获得重组病毒vTKgpe-IL12。首先经鼻腔免疫检测其毒力,然后以酶联免疫斑点实验(ELISPOT)和胞内因子染色(ICS)检测vTKgpe-IL12的细胞免疫反应,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测体液免疫应答。结果重组病毒vTKgpe-IL12能正确表达mIL12和HIV抗原。mIL12对vTKgpe毒性和体液免疫应答无影响。相对vTKgpe而言,vTKgpe-IL12在末次免疫后10d,对细胞免疫应答的强度没有影响;在末次免疫后30d,针对Env的细胞免疫应答有所提高,针对gag-pol的细胞免疫应答略有下降。vTKgpe-IL12诱导的细胞免疫反应30d时比10d显著下降,尤其是针对gag-pol的细胞免疫应答显著降低。结论应用DNA初免-痘病毒加强免疫策略时,在痘病毒重组疫苗中加入IL12增强了对env的细胞免疫反应,而降低了对gag-pol的细胞免疫反应。
- 田美娟刘颖马燕刘铮凌大伟段丹丽邬超彭虹邵一鸣
- 正痘病毒基因结构及功能研究的几项进展被引量：1
- 2013年
- 正痘病毒载体在重组疫苗研究中有广泛前景,但其罕见但较为严重的副反应阻碍了发展。正痘病毒属中具有较宽宿主范围的痘苗病毒和牛痘病毒具有典型的宿主范围基因K1L、CP77和C7L。这三个基因对不同宿主细胞具有选择性,可以扰乱宿主细胞信号通路,并且与病毒的毒力相关。
- 刘铮刘颖邵一鸣
- 关键词：痘苗病毒牛痘病毒
- 缺失宿主范围基因的重组痘苗病毒载体构建及在HIV-1抗原重组疫苗中的应用
- 痘苗病毒已被广泛应用于作为其它病原或肿瘤疫苗的重组载体,能诱导体液和细胞免疫和黏膜免疫反应,在艾滋疫苗研究中包括临床前以及人体实验中HIV-1重组痘苗病毒活载体疫苗研究最为广泛。痘苗病毒天坛株(VTT)是中国消灭天花的主...
- 刘铮
- 关键词：毒力免疫原性
- 文献传递
- 缺失C8-K3片段重组天坛痘苗病毒的免疫策略研究
- 2013年
- 目的探索不同的DNA疫苗初免-重组痘苗病毒加强免疫策略的效果,为建立最佳免疫方案提供依据。方法对小鼠进行DNA疫苗初免,之后分别加强免疫一针、两针和三针重组痘苗病毒VTT△C8-K3-gag,在不同时间点采取血样及制备脾细胞,检测针对痘苗病毒和HIV特异性体液免疫及细胞免疫应答。结果三种免疫策略中,DNA疫苗初免-VTT△C8-K3-gag加强免疫两次的效果最佳,诱导的针对p55的结合抗体滴度达到106,分泌IFN-γ的T细胞数为342/106细胞。针对痘苗病毒的体液和细胞免疫应答显著低于加强免疫三针诱导的免疫反应。结论DNA疫苗初免-VTT△C8-K3-gag加强免疫两针可诱导较高水平的HIV免疫应答,同时保证了较低水平的载体免疫反应。
- 刘铮刘颖王书晖张其程王荣敏侯爵刘畅吉栩邵一鸣
- 关键词：痘苗病毒天坛株DNA疫苗免疫策略
- 痘苗病毒天坛株C8L—K3L片段缺失表达载体的生物学性能研究
- 2013年
- 目的研究缺失C8L．K3L片段的痘苗病毒天坛株载体的生物学性能及外源基因的免疫原性。方法构建缺失C8L-K3L区域的重组痘苗病毒天坛株载体VrITT△c8-K3-gag。在4种细胞上检钡0了重组载体的增殖能力、在小鼠和家兔模型上进行毒力评价，并在BALB／c小鼠进行了免疫效果评价。结果与Vrrr相比，VTTAC8-K3-gag在CEF、BHK-21、HeLa细胞中复制能力显著下降，在Vero细胞中失去复制能力。VTYAC8-K3-gag在小鼠和家兔模型中毒力均有显著降低。VTT△C8-K3-gag免疫小鼠第4周后诱导的痘苗病毒特异结合抗体与中和抗体滴度分别达到5．6×10^3和1．0×10^4，第9周滴度弦到5．8×10^5和5．25×10^3，与VTKgpe相比均显著下降3～9倍，但E3刺激后的细胞免疫应答无显著变化。VTT△C8-K3-gag单独免疫或与DNA疫苗联合免疫诱导的HIV特异性抗体水平和细胞免疫应答均与VTKgpe无差异。结论VTrAC8-K3-gag是一个安全性较高且具有深入研究价值的HIV候选疫苗株。
- 刘铮刘颖王书晖张其程刘莹侯爵王荣敏邵一鸣
- 关键词：痘苗病毒天坛株毒力免疫应答
- IL-15基因佐剂对DNA初始-重组痘苗病毒加强免疫效果的影响被引量：2
- 2012年
- 目的比较IL-15在DNA疫苗初始和重组天坛痘苗病毒加强免疫阶段对免疫原性的影响。方法应用PCR方法构建重组片段I8R-pE/L-IL-15-GFP-G1L,通过同源重组将IL-15基因插入到表达HIV-1CN54Gag,Pol和Env基因的重组天坛艾滋病疫苗rTV的基因组中。HIV DNA疫苗在0、3、6周与质粒pIL-15共免疫BALB/c小鼠,或仅使用DNA疫苗,rTV和rTV-IL-15在12周分别进行加强免疫。末次免疫后1、4周应用ICS和ELISPOT方法检测小鼠脾淋巴细胞中HIV特异性细胞免疫。末次免疫后1、4周和12周ELISA方法检测小鼠血清中Gp120特异性抗体。结果 IL-15基因正确插入重组天坛艾滋病疫苗rTV基因组中,成功构建了重组病毒rTV-IL-15。各组免疫小鼠均诱导出HIV特异性细胞和体液免疫。尽管各组诱导的HIV特异性CD8+T细胞免疫反应差异无统计学意义,但加强免疫后4周,DNA-IL-15/rTV-IL-15组分泌IFN-γ、TNF-α以及IFN-γ/TNF-α双因子的CD8+T效应记忆细胞百分比均值显著高于DNA-IL15/rTV组(P<0.05),分别为0.86%,0.37%和0.31%。DNA/rTV-IL-15组的gp120抗体滴度在加强免疫后1周即达到1∶40 381,显著高于DNA-IL-15/rTV组和DNA-IL-15/rTV-IL-15组(P=0.000 1,P=0.020 5),且抗体滴度持续至12周未见明显下降。而DNA-IL-15/rTV组和DNA-IL-15/rTV-IL-15组的抗体滴度则从加强免疫1周后逐渐上升,在12周达到高峰(1∶11 143,1∶16 889),DNA-IL-15/rTV组4周和12周的抗体滴度显著高于1周(P=0.009,P=0.012)。结论在初始和加强免疫阶段使用IL-15佐剂可以提高CD8+T效应记忆细胞应答水平。
- 田美娟刘莹刘铮彭虹马燕邵一鸣刘颖
- 关键词：白细胞介素15
