王九平
- 作品数:87 被引量:454H指数:12
- 供职机构:第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- HBV野生株及C区突变株调节HLA-Ⅰ表达的作用被引量:1
- 2006年
- 目的研究乙型肝炎病毒(HBV)及其C区突变对机体人类白细胞抗原-Ⅰ(HLA-Ⅰ)表达的影响和机制。方法构建HBVC区突变株G87、V60的真核表达载体,转染HepG2细胞,检测转染细胞中HLA-Ⅰ的表达以及抗原提呈相关基因LMP2、TAP1和tapasin的mRNA表达。结果各转染细胞株均能有效表达HBsAg;各转染细胞株均有HLA-Ⅰ表达,野生株略高于C区突变株G87、V60;TAP1mRNA表达上调,LMP和tapasinmRNA均未见明显表达。结论HBV能诱导HepG2细胞内HLA-Ⅰ分子的合成,使TAP1基因转录增强,HLA-Ⅰ的表达上调。相对于HBV野生株而言,C区突变株G87、V60使宿主细胞内HLA-ⅠmRNA及其蛋白的表达水平降低。
- 王九平王临旭李军张颖潘蕾王平忠陈伟红
- 关键词:肝炎病毒乙型
- 乙型肝炎病毒C基因G87变异对宿主细胞HLA-I表达的影响被引量:1
- 2004年
- 目的 探讨HBVC基因G87变异对宿主细胞表面HLA I表达的影响。方法 采用定点突变技术和亚克隆技术 ,将HBV野生型基因组质粒构建为C基因G87变异株表达载体 (EBO G87)和野生株表达载体 (EBO WT) ,以脂质体技术分别转染HepG2细胞 ,转染细胞经FITC标记的鼠抗HLA ABCmAb染色 ,流式细胞术测定细胞表面HLA I的表达。结果 构建的EBO G87和EBO WT重组载体经内切酶双酶切鉴定及核苷酸序列测定证实。HepG2细胞表面HLA I表达的平均荧光强度 ,EBO空载体转染的细胞为 2 3,EBO WT转染的细胞明显增强至 18 8,EBO G87转染的细胞增至 10 5。结论 2株HBV上调HLA I表达强度不同 ,C基因G87变异可使宿主细胞表面的HLA
- 陈伟红刘志华潘蕾张岩张颖洪沙王九平周永兴
- 关键词:肝炎病毒乙型点突变基因MHC
- 肾综合征出血热患者流产胎儿分离毒株84FLi的全基因序列分析被引量:2
- 2002年
- 目的 克隆和测定汉滩病毒疫苗生产株 84FLi的全基因组序列 ,了解其分子基础。方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,分节段扩增 84FLi株L、M和S基因片段的cDNA ,直接用PCR产物或克隆入pMD18 T载体后进行测序。结果 84FLi株L、M、S 3个片段的全基因组序列为6 5 33,36 16和 16 88个核苷酸 ,分别编码 2 15 1,1135 ,4 2 9个氨基酸。A、C、G、T 4种核苷酸分别为 3830 ,2 0 5 0 ,2 5 10和 344 7个 ,GC含量为 38 5 2 % ,AT含量为 6 1 4 8%。序列同源性分析表明 84FLi株与分离自广州的RG9株和分离自安徽的Chen4株高度同源。S片段核苷酸的同源性 99 6 %。与HTNV的国际标准毒株 76 118的 3个片段核苷酸同源性分别为 83 7%、84 0 %和 87 2 % ,氨基酸同源性分别为97 5 %、96 0 %和 97 9%。结论 84FLi株属于汉滩型病毒 ,并与分离自国内的汉滩病毒同源性较高 。
- 李新红杨为松杭长寿白雪帆马本江黄长形李光玉王九平
- 关键词:肾综合征出血热流产胎儿分离毒株全基因序列分析
- 乙型肝炎病毒P基因YMDD变异的意义
- 2004年
- 目的:了解拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中HBV P基因YMDD变异的意义,为临床治疗提供指导. 方法:用定量PCR监测40例拉米夫定治疗期间的HBV DNA 动态变化,对治疗48 wk时HBV DNA仍为阳性的患者, 采用Uniarray技术和基因芯片检测YMDD突变. 结果:拉米夫定治疗48 wk时,HBV DNA转阴者23例(57.5%). HBV DNA仍为阳性者17例,其中8例在治疗过程中出现HBV DNA定量反跳.用基因芯片法与Uniarray技术共检测出7例YMDD变异(5例出现于8例HBV DNA定量反跳者), 变异率为17.5%(7/40). 结论:拉米夫定治疗过程中,可导致部分患者的HBV YMDD 发生变异.该变异使多数患者HBV DNA定量反跳.检测HBV YMDD变异对慢性乙型肝炎的治疗具有重要的指导意义.
- 王平忠张岩白雪帆张颖李谨革陈红梅王九平
- 关键词:乙型肝炎病毒P基因定量PCR拉米夫定基因变异
- 血管内皮细胞抗汉坦病毒的固有免疫被引量:4
- 2009年
- 王平忠王九平白雪帆贾战生黄长形姜泓
- 关键词:血管内皮细胞汉坦病毒固有免疫
- 共聚焦定量分析拉米夫定脂质纳米粒对细胞内HBeAg表达的抑制作用
- 2003年
- 目的 用共聚焦定量分析方法 ,观察拉米夫定脂质纳米粒对细胞内HBV基因表达的作用。方法 构建半乳糖修饰的十六酸拉米夫定脂质纳米粒 (LAP -GSLN) ,将其定向导入 2 2 15细胞 ,对导入的细胞所表达HBeAg进行间接免疫荧光染色 ,用共聚焦技术对其含量进行定量分析。结果 导入LAP -GSLN的细胞内HBeAg荧光量与单纯加入拉米夫定 (LA)比较 ,导入LAP -GSLN的细胞内HBeAg荧光量明显减少。结论 LAP -GSLN与 2 2 15细胞上的半乳糖受体结合 ,将LA导入细胞而发挥对HBeAg抑制作用。
- 王九平骆抗先白雪帆张三奇李谨革张颖薛克昌白宪光郝春秋羿伟
- 关键词:拉米夫定脂质纳米粒HBEAG乙型肝炎
- 汉滩病毒S基因在Vero-E6细胞中的分段表达被引量:1
- 2004年
- 目的 体外研究汉滩病毒 (HTNV)S基因及其 5’端、3’端表达的意义 ,为核蛋白T细胞表位的研究奠定基础。方法 设计 2套引物 ,用PCR方法从PBV2 2 0 -S2 2原核质粒中扩增出S基因全读码框 (37- 132 6bp)及S基因 5’端 (37-5 0 1bp) ,S基因 3’端 (5 0 2 - 132 6bp)用TA克隆将其克隆入 pcDNA3 1/V5 -His -TOPO载体中 ,成功构建 pcDNA3 1-S及pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C真核表达载体 ,并通过脂质体转染至Vero -E6细胞中 ,进行了瞬时表达。 结果 间接免疫荧光成功检测到 pcDNA3 1-S及pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C在Vero -E6细胞中的表达。 结论 pcDNA3 1-S及 pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C真核表达载体有较高的转染效率 ,目的基因能在宿主细胞中表达 ,有利于研究HTNV -S基因在T细胞表位研究中的意义。
- 潘蕾白雪帆黄长形李光玉王九平
- 关键词:汉滩病毒S基因VERO-E6细胞核蛋白
- 腺病毒表达Ribozy me在细胞内对HBV的免疫作用被引量:8
- 2003年
- 了解利用腺病毒载体表达针对乙型肝炎病毒 (HBV)的核酶在细胞内对HBV表达的抑制作用。将针对HBV的多位点核酶克隆入腺病毒载体中 ,利用包装细胞包装出含核酶及突变核酶的重组腺病毒 ,将腺病毒感染 2 2 15细胞 (含HBV) ,检测感染细胞中核酶及突变核酶的表达 ,利用ELISA、打点杂交及激光共聚焦等方法 ,检测核酶对细胞内乙型肝炎病毒表达的抑制作用。结果显示核酶及突变核酶的确被克隆入腺病毒载体 ,并经过包装后可形成包装腺病毒 ,感染 2 2 15细胞后可表达出目的核酶 ,并发挥核酶的剪切作用 ,其对HBV表达的抑制率最高可达 87 1%。证实包装腺病毒表达的多位点核酶对HBV的复制有明确的抑制作用 ,支持核酶的抗病毒效果 。
- 李谨革张嵘周永兴连建奇王九平
- 关键词:肝炎病毒乙型基因疗法
- 乙型肝炎患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体的表达及意义被引量:2
- 1994年
- 乙型肝炎患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体的表达及意义王九平,刘俊彬,阎荣近年来,研究证明淋巴细胞上存在着多种激素受体,糖皮质激素受体(GCR)便是其中之一。作者采用放射配体法观察各型乙型肝炎(乙肝)患者外周血淋巴细胞上GCR的变化,从受体水平研究乙肝...
- 王九平刘俊彬阎荣
- 关键词:乙型肝炎糖皮质激素受体
- 肾综合征出血热患者TNF-α、IL-6、IL-4、IFN-γ水平变化及意义
- 肾综合征出血热(HFRS)是由汉坦病毒引起的流行地域广泛、发病率和病死率较高、引起毛细血管广泛损伤的急性传染病。其主要临床症状为发热、低血压休克、出血和肾功能衰竭。迄今,发病机制尚未完全阐明。体外实验证实,病毒感染的原代...
- 王平忠陈延平徐哲王九平张岩张颖白雪帆
- 文献传递