柴政
- 作品数:13 被引量:35H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金:黑龙江省科技攻关计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程更多>>
- 溶瘤新城疫病毒D90株反向遗传操作系统的建立及其对肿瘤的治疗
- 新城疫病毒属于禽副粘病毒科成员,已表明一些新城疫毒株具有明显溶瘤活性。在与临床和临床研究中,利用自然分离的溶瘤型新城疫病毒对肿瘤进行治疗是安全、有效的。本研究以自然源性的溶瘤型新城疫病毒D90株为研究对象,在对NDV-D...
- 柴政符芳张雪云姜福成王香玲郑楠李曦
- 溶瘤型新城疫病毒D90株的全长感染性cDNA及其构建方法和应用
- 本发明公开了溶瘤型新城疫病毒D90株的全长感染性cDNA及其构建方法和应用。所述溶瘤型新城疫病毒D90株的全长感染性cDNA可以与辅助质粒组成反向遗传操作系统。该感染性cDNA及其反向遗传操作系统可用于拯救具有溶瘤功能的...
- 李曦柴政符芳
- 文献传递
- 一种抗副猪嗜血杆菌的猪源嵌合抗体及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种抗副猪嗜血杆菌的猪源嵌合抗体及其构建方法和应用,本发明的一种猪源嵌合抗体由一条轻链和一条重链通过二硫键和非共价键联结形成,所述的轻链从N端到C端依次包括鼠源抗副猪嗜血杆菌单抗轻链可变区和猪IgG轻链恒定区...
- 李曦符芳柴政田华彬
- 文献传递
- 伪狂犬病毒gB基因的表达及单克隆抗体的制备被引量:1
- 2014年
- 为了研究伪狂犬病毒gB基因的原核表达并制备其单克隆抗体,试验采用含有伪狂犬病毒(PRV)gB蛋白抗原表位的基因作为模板进行扩增,得到大小为588 bp的扩增产物,将其克隆到表达载体pET-32a(+)中,转化表达菌Transetta(DE3),经诱导表达得到目的蛋白;以纯化后的重组gB蛋白为抗原,免疫Balb/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞。结果表明:表达的重组gB蛋白约为44 ku,以包涵体形式存在,具有良好的反应原性;获得的2株杂交瘤细胞均能够稳定分泌抗gB蛋白的特异性单克隆抗体(McAb)。
- 邱佳符芳柴政姜福成田华彬郎月坤郑楠李曦张彦龙
- 关键词:伪狂犬病毒原核表达单克隆抗体
- 新城疫病毒D90毒株抑制人胃癌BGC-823细胞的体外研究
- 2017年
- 为了探究NDV-D90对BGC-823细胞的抑制作用,通过细胞毒性、肿瘤细胞侵袭和流式细胞术实验,来确定新城疫病毒D90毒株(Newcastle disease virus,NDV-D90)对胃癌细胞株BGC-823(低分化)的抑制作用。结果显示:NDV-D90能抑制BGC-823细胞的增殖和侵袭,病毒在BGC-823细胞中有很强的复制能力,并且NDV-D90对BGC-823细胞主要造成坏死并伴随着少量的凋亡。
- 李昆鹏隋红柴政郭佃磊张雪云王香玲李曦余丽芸
- 关键词:凋亡坏死
- 一种抗副猪嗜血杆菌的猪源嵌合抗体及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种抗副猪嗜血杆菌的猪源嵌合抗体及其构建方法和应用,本发明的一种猪源嵌合抗体由一条轻链和一条重链通过二硫键和非共价键联结形成,所述的轻链从N端到C端依次包括鼠源抗副猪嗜血杆菌单抗轻链可变区和猪IgG轻链恒定区...
- 李曦符芳柴政田华彬
- 文献传递
- PRRSV高致病性毒株和经典毒株SYBR GreenⅠ实时荧光PCR鉴别方法的建立被引量:11
- 2009年
- 根据猪生殖与呼吸综合征病毒高致病性毒株、经典毒株Nsp2基因序列的差异,应用Oligo软件设计了2对特异引物,建立了鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。用该方法检测JEV、CSFV、FMDV和PRCV均呈阴性,表明该方法特异性良好;敏感性试验结果表明,该方法的最低检出量为1 TCID50/0.1 mL;批内、批间重复性试验显示,其变异系数均低于0.3%,具有良好的重复性。应用该方法对人工感染动物进行检测,自感染后第3、5、7、10、142、1 d分别采集全血,检测结果均为阳性。证实,本试验所建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可以快速、准确地鉴别PRRSV高致病性毒株和经典毒株。
- 柴政李曦王小武符芳张永欣肖晶蔡雪辉周艳君宋淑萍
- 关键词:猪生殖与呼吸综合征病毒SYBR
- 副猪嗜血杆菌单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定
- 2014年
- 为筛选具有临床诊断价值的副猪嗜血杆菌(H.parasuis)单克隆抗体(MAb),本研究采用H.parasuis 5型强毒株(HPS-5)免疫BALB/c小鼠,利用常规细胞融合技术制备了一株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株.Western blot结果表明该MAb能够特异性识别所有H.parasuis标准菌株;免疫共沉淀技术与蛋白质谱分析显示该MAb所识别的蛋白为ATP结合盒转运蛋白(ABCT)家族的寡肽透过酶(OppA);利用MAb对噬菌体12肽库进行淘选,8个阳性噬菌体克隆展示有“KTPAE-R”保守序列,对应于H.parasuis SH29755株和SH0165株的469位~475位的氨基酸残基.对OppA氨基酸序列比对结果表明H.parasuis与其它10种猪常见细菌病病原序列一致性为9.1%~74.5%,本研究结果为进一步研究H.parasuis感染的病原学诊断建立了良好的基础.
- 杨玉菊郑楠符芳柴政姜福成王香玲张雪云王卓李曦
- 关键词:副猪嗜血杆菌病原学诊断
- 猪源化嵌合抗体在杆状病毒中的表达被引量:1
- 2014年
- 为构建具有活性的抗副猪嗜血杆菌(H.parasuis)鼠-猪嵌合单链抗体(scFv),本研究以H.parasuis单克隆抗体(MAb)杂交瘤细胞1D8株的总RNA制备的cDNA为模板,通过RT-PCR分别扩增抗MAb轻链、重链可变区序列及猪抗体轻链和重链恒定区序列,并将这些片段经重叠延伸PCR分别扩增可变区与恒定区的轻链与重链的序列。将扩增的两个目的基因克隆于双向表达载体pFast-Bac-Dual中,并进一步以其构建的重组杆粒,转染Sf9昆虫细胞筛选制备稳定表达的抗H.parasuis猪源化嵌合的scFv重组杆状病毒。Western blot、ELISA、体外和体内的抑菌试验表明,抗H.parasuis猪源化嵌合scFv具有中和活性和抑制细菌增殖的能力,可以为进一步的H.parasuis的抗体治疗奠定基础。
- 杨玉菊姜福成柴政符芳郑楠王香玲郭殿磊李曦
- 关键词:副猪嗜血杆菌杆状病毒表达
- PRRSV和PCV-2以及PRV多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立被引量:23
- 2008年
- 根据GenBank中登录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白基因、猪圆环病毒2型(PCV-2)rep蛋白基因和猪伪狂犬病病毒(PRV)gE基因的核苷酸序列分别设计了3对特异性引物,成功建立了同时检测PRRSV、PCV-2、PRV的多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光PCR方法。敏感性试验结果显示,PRRSV、PCV-2的敏感性可达250拷贝/μL,PRV的敏感性可达500拷贝/μL。表明,该方法具有较好的特异性、重复性和敏感性,可以用于PRRSV、PCV-2和PRV的快速检测。
- 王小武符芳柴政孔令达蔡雪辉宋淑萍许红喜李曦
- 关键词:猪生殖与呼吸综合征病毒猪伪狂犬病病毒