李洋
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
- 供职机构：上海师范大学信息与机电工程学院更多>>
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- 大鼠中性氨基酸转运蛋白SNAT1-HA融合蛋白的构建和表达(英文)
- 2011年
- Na+偶联的中性氨基酸转运蛋白SNAT1是一种膜蛋白,属于转运蛋白第38家族(SLC38),在中枢神经系统(CNS)中起到重要的生理学作用.为了更容易地检测SNAT1在细胞膜上的表达,以pBK-CMVΔ-SNAT1为模板,用PCR,双酶切和T4连接酶连接的方法在SNAT1的C端加上了一个HA标签蛋白,构建了一个新质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA.用该质粒瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293T),转染36 h以后,融合蛋白SNAT1-HA可以用HA抗体检测.Western blot结果显示在约54 kDa处有一条特异性条带,与预期分子量大小一致.利用重组质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA可以更方便地检测到SNAT1在细胞膜上的表达与定位,为进一步研究SNAT1结构与功能奠定了基础.
- 王函孟雯董晓云李洋张舟
- 关键词：融合蛋白
- 长江口冲积岛屿苔藓植物多样性及其特点被引量：3
- 2008年
- 在对长江口崇明、长兴、横沙和九段沙四个冲积岛屿的野外调查和标本鉴定基础上,记录报道苔藓植物16科28属50种.崇明岛种类最为丰富,有15科24属42种;长兴岛、横沙岛次之,分别有5科10属18种和6科11属17种;九段沙最少,仅有3科4属4种.分析结果表明:长江口诸岛苔藓植物生境以土生为主,植物地理区系成分以北温带及东亚成分占多数,其中中国特有成分4种.大部分苔藓植物为常见的随人种类,人类活动是影响长江口诸岛苔藓植物物种多样性的主要因素之一.长江口各岛屿的苔藓植物物种多样性与岛屿形成时间、岛屿面积之间存在密切关系,反映了河口沙洲环境的总体特征.
- 李洋张娇娇曹同
- 关键词：长江口苔藓植物物种多样性
- 浙江省藓类植物新记录陈氏藓(Chenia leptophylla)及其地理分布被引量：1
- 2009年
- 在对杭嘉湖平原苔藓植物调查采集和标本鉴定的基础上,发现并报道了浙江藓类植物新记录陈氏藓属(Chenia)及陈氏藓[Chenia leptophylla(C.Müll.)Zand.];对陈氏藓的形态特征作了描述和图示;对其在世界和中国的地理分布进行了讨论,提供了世界和中国分布图。
- 李洋曹同张娇娇
- 关键词：苔藓植物
- 大鼠谷氨酰胺转运蛋白SNAT2-EGFP融合蛋白的表达与鉴定被引量：1
- 2011年
- 谷氨酰胺转运蛋白是中枢神经系统中一种重要的中性氨基酸转运蛋白,对谷氨酰胺的跨膜转运十分重要。为了更方便地研究大鼠谷氨酰胺转运蛋白2(SNAT2)在细胞膜上的表达与定位,利用亚克隆技术将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)构建于SNAT2的C端,通过菌液PCR、酶切和DNA测序鉴定重组真核表达质粒;将测序正确的重组质粒瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293T cells),用Western blot和激光共聚焦电子显微镜荧光检测技术鉴定SNAT2-EGFP的表达与亚细胞定位。结果表明,SNAT2-EGFP融合蛋白重组质粒在细胞中表达并正确定位于细胞膜上。SNAT2-EGFP融合蛋白重组质粒的成功构建为今后深入研究SNAT2的结构和功能提供了一个有效的工具。
- 孟雯王函董晓云李洋张舟
- 关键词：增强型绿色荧光蛋白融合蛋白
- pBK-CMV ⊿-EGFP-SNAT2质粒载体构建及其表达鉴定(英文)
- 2012年
- SNAT2是SLC38基因家族编码的Na+偶联中性氨基酸转运蛋白中属于system A的成员之一.它在谷氨酸-谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用.增强型绿色荧光蛋白EGFP的连接对于SNAT2在细胞表达中的定位以及检测都有很大的帮助.采用PCR扩增和酶切技术将EGFP连接到质粒pBK-CMV⊿-SNAT2中SNAT2的N端.通过酶切后琼脂糖凝胶电泳和测序验证得到pBK-CMV⊿-EGFP-SNAT2质粒载体,将构建好的质粒瞬时转染进人胚肾细胞(HEK293 cells)用Western blot和激光共聚焦电子显微镜检测EGFP-SNAT2的表达与亚细胞定位.结果表明:EGFP-SNAT2在细胞中正确表达并定位于细胞膜上.pBK-CMV⊿-EGFP-SNAT2质粒载体的构建对于进一步研究SNAT2的结构和功能具有重要意义.
- 李洋张舟
- 关键词：EGFP
- 一种基于周期自适应的垂直切换算法被引量：1
- 2017年
- 提出了一种基于周期自适应的垂直切换算法.在切换发起阶段,移动终端会根据接收信号的强度不断调整接口的激活间隔时间,扫描可能存在的无线信号.在切换判决阶段,采用多属性判决法对每种网络的综合性能进行判断.仿真表明,相比于传统方案中以固定周期扫描无线信号,提出的方案在节省终端功率的基础上能够更及时地发现新的无线网络,并能更快地接入综合性能最好的网络.
- 李洋张静
- 关键词：异构网络垂直切换多属性
- 钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2-HA融合蛋白的构建及鉴定被引量：1
- 2012年
- 钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2在哺乳动物组织中广泛表达,具有转运中性氨基酸的功能,在谷氨酸-谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用.为了方便测定SNAT2在细胞膜上的表达和定位,本研究采用PCR扩增和酶切连接将HA标签蛋白与SNAT2的C末端连接,构建了真核生物表达载体pBK-CMVΔ(1098-1300)-SNAT2-HA表达载体.用脂质体转染法将该表达载体瞬时转染到HEK293T细胞中,通过Western blot法检测到SNAT2-HA融合蛋白在细胞膜上的正确表达和定位.pBK-CMVΔ(1098-1300)-SNAT2-HA表达载体的成功构建,为今后对SNAT2的结构和功能的研究提供了有效方法.
- 董晓云王函孟雯李洋张舟
- 关键词：融合蛋白
