李友军
- 作品数：11 被引量：56H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 喉癌相关基因LCRG1的克隆和功能研究
- 喉癌是严重危害人类健康的一类恶性肿瘤。选用在mRNA差异显示研究中获得的在喉癌组织中表达显著下调且代表新基因的EST之一(AF10056),设计引物进行cDNA文库筛选,得到一全长为3 448bp的cDNA序列,其开放读...
- 李友军谢海龙陈主初何春梅
- 文献传递
- 肺癌差异表达cDNA序列的分离与鉴定被引量：7
- 2002年
- 背景与目的:肺癌癌变的分子机理至今还不很清楚,其关键是未找到与肺癌密切相关的基因。本研究拟分离和鉴定肺癌差异表达cDNA序列,为进一步克隆肺癌相关基因打下基础。方法:采用mRNA差异显示、克隆、反向点杂交、测序和Reversetranscription-PCR(RT-PCR)方法分离在肺癌组织和肺癌细胞系中表达下调或不表达,以及在肺癌组织和肺癌细胞系中过表达的差异cDNA序列。结果:mRNA差异显示获得16条差异的片段。将差异片段进行克隆、反向点杂交、测序、同源性比较,共获得10条不同的cDNA序列。其中2条为新基因,8条与已知基因高度同源。进一步RT-PCR证实LXDD1、LXDD2两条cDNA序列在肺癌及正常肺支气管粘膜组织中存在差异表达。结论:运用mRNA差异显示,成功分离了10条差异表达cDNA序列,并证实其在肺癌及正常肺支气管粘膜组织中存在表达差异。这些差异表达cDNA序列可能与肺癌的发生发展密切相关。
- 谢海龙李友军陈主初关勇军何春梅
- 关键词：肺肿瘤MRNA差异显示CDNA
- BRG1在肺癌组织和肿瘤细胞系中表达下调原因初探
- 2007年
- 前期的研究表明:在肺癌及多种肿瘤细胞系中,BRG1(brahma-related gene 1)的mRNA和蛋白质表达下调或缺失,但影响BRG1表达下调的原因并不清楚.因此,用PCR-SSCP(single strand conformation polymor-phism)方法检测18例肺癌组织和15株肿瘤细胞系DNA,并经测序证实:其中有1例肺癌组织的BRG1外显子25第3590位碱基存在T→C的点突变,其编码的BRG1蛋白第1171位氨基酸相应地由Val(缬氨酸)→Ala(丙氨酸),该突变位于BRG1蛋白最重要的功能区(依赖DNA的ATP酶区),提示BRG1突变在肺癌发生中可能起一定的作用.同时,对未检测到BRG1mRNA表达的6例肺癌组织和9株肿瘤细胞系还进行了DNA甲基化分析,结果发现:这些肺癌组织和肿瘤细胞系中BRG1启动子区均无异常甲基化.这说明BRG1在肺癌中表达下调的机制尚需进一步研究.
- 关勇军蔡秀梅李友军何春梅陈主初
- 关键词：肺癌突变检测甲基化分析
- 基因组印记与肿瘤易感性被引量：7
- 2002年
- 基因组印记 (Genom ic Imprinting)是一种遗传后的基因调控方式 ,导致单亲的等位基因表达 ,参与机体许多生理和病理过程。近年来的研究表明基因组印记与癌变和肿瘤易感性密切相关。本文就基因组印记在癌变和肿瘤易感性中的作用作一简要综述。
- 李友军
- 关键词：基因组印记肿瘤易感性癌变
- 肺癌相关基因HLCDG1的克隆和表达分析被引量：6
- 2003年
- 背景与目的:比较基因组杂交和微卫星多态性位点全基因组扫描结果显示肺癌患者在染色体3p、5q、6q、9p、10q、11p、13q、17p、19p等区域存在高频率的杂合性缺失,提示可能有多个未知的易感基因或抑癌基因与肺癌的发生、发展相关。本研究选用在mRNA差异显示研究中获得的在肺癌组织中表达下调且代表新基因的表达序列标签(expressedsequencetag,EST)LXDD1为进一步研究对象,克隆其全长cDNA。方法:采用Northern杂交验证LXDD1在肺癌中的表达差异,并用MTN(MultipleTissueNorthernBlotsTM)膜检测其在正常组织中的表达及其所代表基因的转录本大小;克隆其全长cDNA,并利用生物信息学对该序列进行初步分析;用差异RT-PCR检测新基因在肺癌组织、配对癌旁非癌组织、肺癌细胞系和其它肿瘤细胞系中的表达。结果:成功地克隆了一个在肺癌中表达下调的新基因HLCDG1(humanlungcarcinomadeletedgene1),GenBank登录号为AF447582,全长cDNA为3.113kb,预测其开放阅读框编码一个含166个氨基酸的跨膜蛋白质,通过电子-聚合酶链反应(electric-polymerasechainreaction,e-PCR)将该基因定位于5q33。结论:HLCDG1基因是一个在肺癌中表达下调的新基因,这提示HLCDG1可能与肺癌的发生、发展相关。
- 谢海龙陈主初何春梅李友军邹飞雁关勇军
- 关键词：肺癌基因克隆基因表达基因组杂交微卫星基因多态性
- STGC3新基因的克隆及功能初步分析被引量：14
- 2004年
- 背景与目的:研究显示,染色体3p21是鼻咽癌高频率杂合性丢失位点,本研究在对3p21区域与鼻咽癌相关的表达序列标签(expressedsequencetag,EST)筛选的基础之上,进行鼻咽癌相关新基因的克隆和功能研究。方法:采用cDNA克隆质粒测序及RACE方法,获取新基因全长cDNA。利用因特网上核酸、蛋白质数据库及蛋白质分析软件进行生物信息学分析。通过构建pEGFP-C2/STGC3绿色荧光表达载体,与脂质体共转染COS7、CNE2细胞,进行基因表达蛋白质定位分析。用Northernblot法检测STGC3在人其他正常组织及肿瘤细胞系表达状况。结果:在3p21区域获得一个全长为1271bp的cDNA新序列,生物信息学分析与已知基因无明显同源性,属于一个新基因,编码146个氨基酸,定位于染色体3p21,被命名为STGC3(GenBank登录号:AY078383)。蛋白质定位分析显示,STGC3融合蛋白存在于细胞浆及细胞核内;MTETMArray2多组织膜Northernblot显示该基因在人正常组织及肿瘤细胞均有表达,并在淋巴瘤等多种肿瘤细胞株中阳性杂交信号弱。结论:STGC3属于一个新基因,其表达的蛋白质存在于细胞浆及细胞核内。在鼻咽癌及多种肿瘤细胞株表达下调。
- 贺修胜肖志强陈主初赵素萍朱建华贺智敏李友军田芳余艳辉
- 关键词：鼻咽癌新基因胞浆肿瘤细胞株生物信息学分析细胞核
- 喉癌相关基因LCRG1蛋白的细胞亚定位及生物学特性研究被引量：6
- 2001年
- 目的:研究我们实验室最近克隆的喉癌相关基因LCRG1编码蛋白的细胞亚定位以及其是否具有抑瘤功能。方法:采用绿色荧光蛋白(GFP)荧光定位的方法,研究该基因编码蛋白的细胞亚定位;通过绘制细胞生长曲线,以及运用转染细胞软琼脂集落形成试验和裸鼠致瘤试验,研究喉癌相关基因LCRG1在喉癌细胞系Hep-2中的生物学特性。结果:喉癌相关基因LCRG1编码的蛋白定位在细胞核内;将LCRG1cDNA导入到不表达该基因的喉癌细胞系Hep-2中,观察到明显的生长抑制作用,表现为抑制Hep-2细胞的停泊非依赖性生长和抑制裸鼠致瘤性。结论:喉癌相关基因LCRG1具有一定的抑瘤功能。
- 李友军关勇军谢海龙陈主初何春梅段朝军
- 关键词：喉肿瘤生物学特性
- 肺癌组织和肿瘤细胞系中BRG1的表达分析被引量：10
- 2007年
- BRG1(brahma-related gene1)是进化上高度保守的SWI/SNF染色质重塑复合物的成员之一.研究表明:BRG1具有抑瘤基因的特征,可能与肿瘤的发生发展有关.我们采用RT-PCR、Northern杂交和Westernblotting证实:肺腺癌细胞系A549和鼻咽癌细胞系HNE2、HNE3、CNE1中无BRG1的表达,而肺鳞癌细胞系NCI-H520、永生化正常人支气管上皮细胞系HBE和鼻咽癌细胞系HONE1、HNE1、CNE2中有BRG1的表达.同时,通过RT-PCR检测10例肺癌组织标本,发现60%(6/10)的肺癌组织中BRG1的mRNA水平明显下调,而配对正常肺组织中BRG1的mRNA表达未见改变.对29例肺癌组织和10例配对正常肺组织切片进行免疫组化染色,结果显示:肺癌组织中BRG1蛋白表达的阳性率为37.9%(11/29),配对正常肺组织中BRG1蛋白表达的阳性率为90%(9/10),两者的差异有显著性(P<0.05).这提示BRG1确实在肺癌组织及多种肿瘤细胞系中表达下调或缺失,在肺癌发病过程中可能起一定的作用.
- 关勇军蔡秀梅李友军何春梅何琼琼程瑞雪陈主初
- 关键词：肺癌肿瘤细胞系
- 喉癌相关基因LCRG1的鉴定和功能初步研究
- 2001年
- 陈主初李友军等
- 关键词：基因克隆肿瘤发生
- HLCDG1基因转染对肺癌细胞生长的影响被引量：4
- 2003年
- 背景与目的:HLCDGI基因是我们实验室最近克隆的新基因,它位于5q33,介于D5S436～D5S470之间,在肺癌组织中明显表达下调或缺失。本研究旨在观察HLCDGI基因是否具有抑制肺癌细胞生长的能力。方法:构建HLCDGI基因的重组质粒pcDNA3.1(+)/HLCDGI,通过脂质体转染,将HLCDGI基因cDNA导入肺癌细胞系A549中,经G418筛选,获得稳定表达的细胞克隆。RT-PCR检测HLCDGI基因表达,并采用细胞生长抑制实验、软琼脂集落形成实验及裸鼠致瘤性实验,分析HLCDGI基因转染细胞恶性表型。结果:RT-PCR结果表明转染HLCDGI 基因的细胞HLCDGI mRNA明显表达。转染HLCDGI基因组、转染空载体组和未转染组,3组细胞生长倍增时间分别为70.0 h、43.3 h和39.5 h,转染HLCDGI基因组与两对照组之间的差异有显著性(P<0.05)。计算软琼脂中细胞克隆形成率,结果分别为8.5％、29.0％和35.0％,转染HLCDGI基因的细胞克隆形成率明显降低。将转染HLCDGI基因的细胞、转染空载体的细胞和未转染的细胞分别注射入无胸腺的裸鼠体内,43天后处死动物,剥离出肿瘤组织并称重,各组瘤块平均重量分别为0.120g、0.612g和0.924g,转染HLCDGI基因的细胞成瘤能力与两对照组细胞比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:HLCDGI在肺癌A549细胞中表达。
- 邹飞雁谢海龙陈主初何春梅关勇军李友军
- 关键词：基因转染肺癌细胞生长基因表达
