戴旭芳 作品数:34 被引量:76 H指数:4 供职机构: 重庆师范大学教育科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市高等教育教学改革研究项目 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 哲学宗教 更多>>
丙戊酸钠通过激活miR-148a-3p/Mcl-1通路促进SH-SY5Y细胞凋亡 被引量:1 2020年 目的探讨抗癫痫药丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对神经细胞的凋亡诱导作用及相关机制。方法将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)用不同剂量VPA处理,流式分析细胞凋亡水平变化,Western blot检测Mcl-1蛋白水平变化,定量PCR分析Mcl-1 mRNA与miR-148a-3p水平变化,报告基因实验检测Mcl-1启动子活性变化。用miR-148a-3p抑制剂联合VPA处理细胞,观察miR-184a-3p在VPA下调Mcl-1表达中的作用及对VPA促SH-SY5Y细胞凋亡效果的影响。结果VPA可促进SH-SY5Y细胞凋亡,并抑制SH-SY5Y细胞中Mcl-1的蛋白和mRNA水平(P<0.05)。VPA处理不影响SH-SY5Y细胞中Mcl-1的启动子活性(P>0.05)。VPA可显著增强SH-SY5Y细胞中miR-148a-3p的表达(P<0.05),使用miR-148a-3p抑制剂可减轻VPA对Mcl-1表达的抑制作用,并减弱VPA的促细胞凋亡效果。结论VPA可能通过激活miR-148a-3p/Mcl-1信号通路促进SH-SY5Y细胞凋亡。 戴旭芳 闫小晶 闫小晶 谢鹏关键词:丙戊酸钠 SH-SY5Y细胞 MCL-1 成年孤独症者职业发展现状及培训意愿调查研究 2023年 为调查重庆市成年孤独症者职业发展现状、影响因素及职业教育培训意愿,采用问卷法对重庆市114名成年孤独症者进行调查。结果表明,重庆市成年孤独症者职业发展总体处于中等偏上水平,社交媒体利用水平最高,政策性支持感知程度最低。成年孤独症者职业发展的总体水平及各因子在性别、居住状况等人口学特征方面无显著性差异,但年龄对社交媒体利用水平、婚姻状态对职业发展意识有显著的影响。各因子均与职业发展总体状况及培训意愿呈显著正相关关系,除职业教育与工作匹配度外,其余各因子均对培训意愿有显著正向预测效应。采用增强职业发展意识,提高人际发展需求、社交媒体利用水平、职业教育与工作匹配度、家庭支持、政策支持,加强职业教育培训等措施可提升成年孤独症者的职业发展能力。 李昊隆 李博 戴旭芳 杨逐关键词:职业教育 培训意愿 人层粘连蛋白α4链LG3-4组件的克隆和表达 被引量:2 2005年 目的 利用基因工程技术获得重组人层粘连蛋白α4链LG3 4组件(humanlamininAlpha4LG3 4Module ,hLNα4LG3 4)蛋白并检测其抗原性。方法 采用RT PCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG3 4的cDNA片段,T A克隆法将其插入pMD 18T载体进行测序。亚克隆法构建原核表达载体pET 2 8a LG3 4,在BL2 1(DE3 )中表达hLNα4LG3 4融合蛋白。融合蛋白经SDS PAGE鉴定、Ni NTA亲和层析纯化及Western印迹分析。结果 成功获得hLNα4LG3 4cDNA片段,与Gen Bank中序列同源性为98% ,突变碱基不改变蛋白的氨基酸序列。12 %SDS PAGE电泳检测显示:经IPTG诱导后BL2 1(DE3 ) /pET2 8a LG3 4细菌裂解液总蛋白中出现一条分子量为44×10 3的新蛋白带,纯化后目的蛋白纯度达95 %以上,且Western印迹可特异地检测到目的蛋白所对应转移带。结论 成功表达和纯化了hLNα4LG3 4蛋白,从而为研究LG组件在疾病发生过程中的作用及其功能位点打下了基础。 戴旭芳 连继勤 张玉静 胡仲明关键词:克隆 自闭症的病因研究综述 被引量:23 2006年 从社会心理学和医学生物学角度对自闭症病因的研究进展进行了综述,以加深自闭症病因的认识及推动自闭症的研究。 戴旭芳关键词:自闭症 病因 社会心理学 医学生物学 高等聋教育教师专业自主权的现状及应对策略探析 2018年 高等聋教育教师如何实现自己的专业自主权是教育改革新形势值得探究的课题.本文主要就高等聋教育教师的专业自主权现状及应对策略进行了探索分析. 戴旭芳关键词:专业自主权 人层粘连蛋白α4链LG1组件融合蛋白的表达 2005年 目的表达重组人层粘连蛋白α4链LG1组件(HumanLamininAlpha4LG1Module,hLNα4LG1)蛋白并检测其抗原性。方法采用RTPCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG1的cDNA片段,用TA克隆法将其插入pMD18T载体进行测序。用DNA重组技术构建原核表达载体pET28aLG1,用BL21(DE3)pET系统表达hLNα4LG1融合蛋白,SDSPAGE鉴定表达产物,用NiNTA亲和柱对表达蛋白进行纯化,并进行Westernblot分析。结果已成功获得hLNα4LG1cDNA序列,与GenBank中序列同源性为100%。12%SDSPAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)pET28aLG1总蛋白中出现一条相对分子质量为26000的新蛋白带,纯化后目的蛋白纯度达90%以上,且Westernblot可特异地检测到目的蛋白所对应转移带。结论成功表达和纯化hLNα4LG1蛋白,且具有良好的抗原性,为研究LG组件在疾病发生过程中的作用及其功能位点打下了基础。 连继勤 张玉静 戴旭芳 张艳宇 何凤田关键词:DNA重组技术 GENBANK CDNA片段 BLOT分析 序列同源性 功能位点 人层粘连蛋白α4链LG4-5组件的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:1 2005年 目的利用基因工程技术克隆、表达人层粘连蛋白α4链LG4-5组件(hum an lam in in alpha4 LG4-5 modu le,hLNα4LG4-5)蛋白并制备其特异性多克隆抗体。方法采用RT-PCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG4-5的cDNA片段,T/A克隆法将其插入pMD-18T载体进行测序。采用DNA重组技术构建原核表达载体pET-28 a-LG4-5,用BL21(DE3)/pET系统表达hLNα4LG4-5融合蛋白,以SDS-PAGE鉴定所表达的融合蛋白。用含融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶颗粒免疫家兔,制备抗hLNα4LG4-5多克隆抗体,W estern印迹法检测抗体的特异性。结果成功克隆了hLNα4LG4-5的cDNA片段,12%SDS-PAGE电泳检测显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET28 a-LG4-5总蛋白中出现一条分子质量为42×103的新蛋白带,制备了效价为1∶10 240的hLNα4LG4-5多克隆抗体,W estern印迹分析证实可检测到特异性目的蛋白带。结论克隆并原核表达了hLNα4LG4-5蛋白,制备了特异性抗hLNα4LG4-5的多克隆抗体,为进一步研究LG组件在疾病发生中所起的作用打下了基础。 连继勤 戴旭芳 张玉静 江渝 何凤田关键词:克隆 多克隆抗体 抑制MEK/ERK通路对孤独症模型大鼠病症行为的影响 被引量:2 2015年 目的探讨抑制MEK/ERK通路对孤独症模型大鼠病症行为的影响。方法大鼠怀孕12.5d后采用一次性腹腔注射丙戊酸钠(VPA)制备孤独症幼大鼠模型。U0126处理组于VPA注射后每天给大鼠口服400μg/kg MEK/ERK通路抑制剂U0126直至断奶。将出生幼鼠分为4组:对照组、VPA处理组、U0126处理组、VPA联合U0126处理组。在幼鼠出生后35d进行社会交往行为检测、神经行为学检测,并分离提取脑组织蛋白通过Western blot分析MEK/ERK通路关键蛋白MEK与ERK表达情况。结果与对照组比较,VPA处理组社会交往能力下降、在中央区活动时间增加、站立次数减少,符合孤独症行为特征;U0126处理组无明显行为学变化;但VPA联合U0126处理组能明显改善VPA处理导致的孤独症行为症状。Western blot结果显示,与对照组比较,VPA处理可增强大鼠前额叶、海马及小脑组织中MEK与ERK磷酸化水平;而VPA联合U0126处理组则能抑制上述脑组织中MEK与ERK磷酸化水平。结论 U0126可改善孤独症模型大鼠的病症行为,机制可能与抑制脑组织中MEK/ERK通路相关。 戴旭芳 秦利燕关键词:U0126 孤独症 舒林酸对孤独症模型大鼠病症行为的改善作用 被引量:1 2015年 目的探讨舒林酸对孤独症模型大鼠病症行为的改善作用。方法在大鼠怀孕12.5 d后采用一次性腹腔注射丙戊酸钠(VPA)制备孤独症大鼠模型。针对舒林酸处理组,于VPA注射后每天给大鼠口服20 mg/kg舒林酸直至断奶。将出生幼鼠分为4组:对照组,VPA处理组,舒林酸处理组及VPA联合舒林酸处理组。出生后35 d对幼鼠进行社会交往行为检测、敞箱焦虑样行为检测,并分离提取脑组织蛋白利用Western blot分析Wnt信号通路关键蛋白β-catenin与Gsk3β表达情况。结果成功制备孤独症大鼠模型。与对照组相比,VPA处理组社会交往能力下降、在中央区活动时间增加、站立次数减少,符合孤独症行为特征;舒林酸单独处理组无明显行为学变化;但舒林酸联合处理能明显改善VPA处理导致的孤独症行为症状。Western blot结果显示,与对照组相比,VPA处理可增强大鼠前额叶、海马及小脑组织中β-catenin表达水平并降低Gsk3β第9位丝氨酸磷酸化水平;而舒林酸联合处理则能抑制上述脑组织中β-catenin表达水平并增加Gsk3β第9位丝氨酸磷酸化水平。结论舒林酸可改善孤独症模型大鼠的病症行为,机制可能与抑制脑组织中Wnt信号通路相关。 秦利燕 戴旭芳关键词:舒林酸 孤独症 WNT信号通路 人LNα4链LG3-4组件的优化表达及活性检测 被引量:2 2006年 目的优化人层粘连蛋白α4链LG3-4组件基因在大肠杆菌中的表达条件。方法分别从诱导温度、诱导时间、IPTG浓度等方面进行优化。表达产物经Ni-NTA介质纯化,MTT法检测目的蛋白对人肺癌A549细胞粘附及增殖功能的影响。结果在20℃下,1mmol/L的IPTG诱导6h,目的蛋白呈最佳可溶性表达;在37℃下,2mmol/L的IPTG诱导4h,呈最佳包涵体形式表达。纯化后目的蛋白纯度达96%,且具有良好的增强人肺癌A549细胞伸展和粘附的功能。结论已确立了hLNα4LG3-4重组蛋白在大肠杆菌中的最佳表达条件。 戴旭芳 连继勤 张玉静 胡仲明关键词:基因表达 活性