慈雅丽
- 作品数：10 被引量：19H指数：2
- 供职机构：河北联合大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省科技厅科研项目国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 贲门癌组织中人乳头瘤病毒感染状况的检测
- 2011年
- 人乳头瘤病毒（HPV）属小DNA病毒,与许多部位鳞状上皮细胞良性及恶性肿瘤性病变有关,其中HPV感染与宫颈癌的相关性已得到公认。近年来研究显示,贲门癌的发生与HPV感染有关,但贲门癌发生与HPV的病原学意义尚未被公认。为探讨人乳头瘤病毒与贲门癌发生的相关性,本研究应用PCR法,并使用HPV L1基因区通用引物、HPV16型和18型别E6基因特异性引物对河北省保定市贲门癌组织进行HPV检测。
- 张科杨寓玲慈雅丽王新燕李淑英
- 关键词：贲门肿瘤聚合酶链反应
- 鱼饲料添加剂实验观察方法的研究
- 2011年
- 饲料添加剂是指添加到饲料中能保护饲料中的营养物质,促进营养物质的消化吸收、调节机体代谢、增进动物健康,从而改善营养物质的利用效率,提高动物生产水平,改进动物产品品质的物质的总称。随着饲料工业的发展,许多新型、有效的添加剂正被发掘或研制出来。
- 慈雅丽马志红李树义张庆波
- 关键词：鱼饲料添加剂营养物质动物产品品质动物健康机体代谢
- 蓝氏贾第鞭毛虫α-7．1、α-11贾第素的原核表达及抗原活性鉴定被引量：8
- 2012年
- 目的原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-7.1和pET-28a(+)-α-11,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约43kD和35kD的位置分别出现目的蛋白条带,与理论值相符;通过相应α-7.1、α-11贾第素抗血清的Westernblot证实两种贾第素重组蛋白的抗原活性良好;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-7.1、α-11贾第素融合蛋白。结论成功地克隆、表达并纯化了具有良好抗原活性的α-7.1、α-11贾第素蛋白。
- 王洋杨志宏王沂曹蕾余源陈阳王卫亮慈雅丽田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫原核表达
- 蓝氏贾第鞭毛虫α-4贾第素的原核表达及纯化被引量：10
- 2011年
- 目的原核表达并纯化蓝氏贾第鞭毛虫的α-4贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-4贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-4,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化融合蛋白。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-4,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白以包涵体形式存在;SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约34 kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-4贾第素融合蛋白。结论成功克隆、表达并纯化了α-4贾第素蛋白,为α-4贾第素的细胞定位及功能研究提供了必要条件。
- 王洋余源王卫亮陈阳慈雅丽田喜凤郑佳杨志宏
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫原核表达
- BARF1基因真核表达载体PIRES2-EGFP/BARF1的构建及鉴定
- 2011年
- 提取B95-8细胞RNA,进行逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增BARF1基因,将其克隆到pUM-T载体,转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切,电泳回收BARF1片段.同时用EcoRI和BamHI双酶切真核载体PIRES2-EGFP,电泳后回收载体PIRES2-EGFP并与BARF1片段连接;转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆.提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切鉴定插入方向,并进行测序分析.转染胃上皮细胞GES-1后,观察细胞形态与行为变化.得到666 bp的BARF1基因片段.经双酶切鉴定,BARF1基因已正确连接到PIRES2-EGFP真核表达载体;测序结果与B95-8细胞株序列完全一致.BARF1基因转染GES-1细胞后,细胞由梭形圆化,黏着力减弱,重叠生长.结果表明成功地构建了携带EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)编码BARF1基因的真核表达载体.
- 李淑英张科杜海军王湛李旭坤慈雅丽王新燕张秀军周玲
- 关键词：EB病毒BARF1基因真核表达载体
- 人TRAF3IP3基因的克隆及真核表达被引量：1
- 2013年
- 目的构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法转染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot法鉴定TRAF3IP3基因的表达情况。结果经限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,成功构建了TRAF3IP3真核表达质粒,荧光显微镜观察可见转染了重组质粒的HEK293细胞有绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot结果证实TRAF3IP3蛋白高水平表达。结论成功构建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表达质粒,为TRAF3IP3基因功能的研究奠定了基础。
- 王沂张秀军刘青余源慈雅丽王洋
- 关键词：真核表达转染HEK293细胞
- 携带BARF1基因的人胃上皮细胞株的建立
- 2011年
- 目的建立携带BARF1基因的人胃上皮细胞株,为探讨EB病毒编码BARF1基因对胃上皮细胞的影响而建立体外模型。方法构建携带BARF1基因的真核载体pcDNA3.1(+)-his/BARF1,转染人胃上皮细胞系GES-1,G418筛选单克隆。用CCK-8检测未转染的GES-1、转染空载体GES-1及转染BARF1基因的GES-1增殖状况。结果双酶切鉴定,666bp的BARF1基因片段已连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)-his。转染细胞通过G418筛选,获得了稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株,转染BARF1基因的GES-1细胞增殖速度显著高于未转染的GES-1和转染空载体GES-1细胞(P<0.01)。结论建立了稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株。
- 李淑英张科杜海军王湛慈雅丽王新燕周玲曾毅
- 关键词：人胃上皮细胞转染BARF1基因
- 胃癌患者人乳头瘤病毒感染状况的检测被引量：2
- 2011年
- 张科慈雅丽王新燕李旭坤杨寓玲李淑英李玉兰赵晓瑜
- 关键词：胃肿瘤聚合酶链反应
- 浅论双语教学
- 2010年
- 慈雅丽张庆波
- 关键词：双语教学专业教育母语教育
