徐慧
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 猪血清白蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达被引量：3
- 2010年
- 目的克隆猪血清白蛋白(PSA)基因,并在毕赤酵母中分泌表达。方法Trizol法提取新鲜猪肝组织总RNA,经RT-PCR扩增PSA全长cDNA,克隆至酵母分泌型表达载体pPICZaC,构建重组表达质粒pPICZaC-PSA,电转化至毕赤酵母X33,甲醇诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果重组表达质粒pPICZaC-PSA经双酶切及测序鉴定正确,表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约69500处可见特异条带,表达量为菌体总蛋白的29.5%,紫外吸收法测定蛋白含量为0.06mg/ml,并可与PSA多抗发生特异性反应。结论已成功克隆了PSA基因,并在毕赤酵母中获得表达。
- 朱艳平王玉徐慧郭霄峰
- 关键词：克隆毕赤酵母分泌表达
