弭杰
- 作品数：14 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠胚胎肠神经干细胞体外培养的时间选择及鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨大鼠胚胎肠神经干细胞（ENSCs）体外培养时间的选择.方法 在严格的条件控制下,从盛京医院SPF级动物实验室筛选的VSD大鼠的胎鼠和幼鼠作为研究对象,分别取孕16、18、20 d的胎鼠和生后1d的幼鼠,每组各5只.以其肠管做原代培养,在碱性成纤维生长因子（bFGF）、N2添加剂和B27添加剂联合作用下使其稳定增殖,观察其神经球形成的时间及生长速度,并用10％的胎牛血清诱导其贴壁分化,应用SABC法免疫细胞化学染色检测巢蛋白（Nestin）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、髓磷脂碱蛋白（MBP）和神经微丝200 （NF-200）的表达,对ENSCs及其分化的细胞进行鉴定.结果 孕16d和孕18 d提取的ENSCs于原代培养后第3天形成肠神经球,孕20 d和生后1d提取的ENSCs于原代培养后第5天形成肠神经球.形成的神经球可以进行传代,鉴定为Nestin染色阳性细胞,并可诱导分化为神经元细胞（NF-200染色阳性细胞）、星形胶质细胞（GFAP染色阳性细胞）和少突胶质细胞（MBP染色阳性细胞）,说明所培养的细胞为肠神经干细胞.结论 采用无血清培养基加入特定生长因子的培养技术,可培养出在体外稳定增殖并有多向分化潜能的大鼠胚胎ENSCs;对于ENSCs体外培养取材时机,选择孕18 d大鼠胚胎为宜.
- 陈东弭杰付冬辉高红
- 关键词：干细胞肠神经系统细胞分化
- 中国北方地区先天性巨结肠SIM2基因突变特征研究
- 2013年
- 目的通过对SIM2基因SNPs基因型与先天性巨结肠症（Hirschsprung disease，HsCR）的关联分析，探索可能潜在的致病基因，从遗传学上丰富HsCR临床表型的内容。方法采集107例临床确诊的HSCR患儿（病例组）和107例正常对照（对照组）的外周静脉血，提取白细胞基因组DNA，PCR扩增SIM2基因2个位点（rs2073416和rs2073601），将PCR产物测序进行突变筛选，明确突变位点和类型，并进一步结合病例一对照和生物信息学分析探讨变异的功能意义。结果病例组与对照组SIM2rs2073601AA和AC基因型频率无显著性差异（P〉0．05）；而病例组与对照组SIM2rs2073416AA、AG和GG基因型频率及A和G等位基因频率差异显著（P〈0．05），AA和GG基因型及G等位基因的患病风险分别为0．021，0．080和0．002。SIM2基因rs2073416测序共检出2种单碱基的替换，第437位密码子核苷酸C盯。CAG突变和第437位密码子核苷酸ar]r—AAG突变。结论中国HSCR人群存在着SIM2基因突变，具有一定的遗传性。
- 高红弭杰陈东吕良英肖楠王维林
- 关键词：HIRSCHSPRUNG病基因型突变
- DIXDC1和AXIN2基因在先天性巨结肠症中的表达及意义被引量：1
- 2013年
- 目的分析DIXDC1和AXIN2基因在先天性巨结肠症（hirschsprung disease，HSCR）中的表达，探讨其在HSCR中的意义。方法采用蛋白印迹（Western blot）、免疫组化和荧光实时定量PCR（quantitative rea1-timePCR，qRT-PCR）方法检测60例HSCR患儿正常段（有神经节段肠管）和狭窄段（无神经节段肠管）中DIXDC1和AXIN2的表达，并对其表达进行定量与比较分析。结果DIⅪ）C1和AxIN2在HSCR狭窄段肠管中蛋白相对表达量为27．16±2．04和29．63±4．72，高于正常段肠管中的13．27±3．15和14．99±2．82，差异有统计学意义（DIⅪ）C1P〈O．041；AXIN2P〈0．035）。DIXDC1和AXIN2在HSCR狭窄段肠壁的肌间和黏膜下细胞胞质内呈强阳性反应，而在HSCR正常段肠壁的肌间和黏膜下细胞胞质内呈弱阳性或阴性。DIⅪ）C1和Ax1N2在HSCR狭窄段肠管中mRNA相对含量为22．34±1．23和25．77±2．06，高于正常段肠管中的12．53±1．47和13．98±1．62，差异有统计学意义（DIXDC1P〈O．033；AXIN2P〈O．029）。结论DIXDC1和AXIN2mR—NA与蛋白在HSCR肠管组织中的异常表达，可能与HSCR的发生关系密切，并可能在先天性消化道畸形的肠道发育中起一定作用。
- 高红弭杰伍美贾慧敏张海兰黄英张志波王维林
- 关键词：HIRSCHSPRUNG病
- 小儿尿道外口囊肿52例临床分析被引量：2
- 2014年
- 儿童尿道外口囊肿（parameatal urethral cyst）为小儿泌尿外科少见疾病之一,临床相关文献报道较少.为了探讨尿道外口囊肿的病因、临床特点、诊断要点、治疗方法以及治疗效果,现将我院小儿泌尿外科从2006年2月至2013年1月共收治的52例尿道外口囊肿患儿进行回顾性总结与分析,并将结果报告如下.
- 陈东牛之彬弭杰高红杨屹
- 关键词：小儿泌尿外科尿道外口囊肿少见疾病
- MicroRNA生物技术与miR-125在疾病中的研究进展
- 2012年
- MicroRNA是近年来发现的一类长度为18～24个核苷酸的可调控基因表达的非编码小分子RNA，它主要通过与靶标基因3’UTR的完全或不完全配对，降解mRNA或抑制靶基因翻译，从而参与调节细胞生长、发育、分化、凋亡并影响疾病的发生。MicroRNA生物学技术的应用有望对多种疾病的研究提供新的方法，可以进一步阐明其发生、发展的机制。本文主要对MicroRNA生物学相关技术研究进行介绍，并概述miR-125在多种疾病中的研究进展。
- 弭杰高红
- 关键词：MICRORNA生物技术
- 谷胱苷肽-S-转移酶P1基因在人结肠癌细胞株中的表达及启动子区甲基化的研究
- 2013年
- 谷胱甘肽转硫酶（GSTs）是与毒物或致癌物的解毒代谢有关的酶类，其中谷胱甘肽转硫酶M1（GSTMl）、谷胱苷肽-S-转移酶T1（GSTT1）缺失基因型和谷胱甘肽转硫酶PI（GSTPl）变异型可导致酶活性，
- 高红陈东弭杰伍美肖楠王维林
- 关键词：谷胱苷肽-S-转移酶启动子区甲基化人结肠癌细胞株P1基因谷胱甘肽转硫酶致癌物
- LRP5／6基因多态性与先天性巨结肠症的相关性研究被引量：1
- 2014年
- 目的通过对低密度脂蛋白受体相关蛋白5／6（low dens.ity lipoprotein receptor-related protein 5/6, LRP5/6）基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）基因型与先天性巨结肠症（Hirschsprungdisease’s，HD）的相关性研究，探索可能潜在的致病基因。方法采集200例临床确诊的HD患儿（病例组），200名健康儿童（对照组）的外周静脉血，提取白细胞基因组DNA，PCR扩增LRP5／6基因4个位点（rs121908674，rs121908671／rsl21918313，rs117554756），将PCR产物测序进行突变筛选，明确突变位点和类型，并进一步结合病例-对照和生物信息学分析探讨基因变异的意义。结果病例组与对照组LRP5rs121908671、LRP6 rs117554756AA和AG、AA和AC基因型频率无显著性差异（P〉0．05）；而病例组与对照组LRP5rs121908674CC、CG和GG基因型频率及C和G等位基因频率差异显著（P〈0．05），CC和CG基因型及G等位基因的患病风险分别为0．005、0．195和0．001；LRP6rs121918313CC、CT和1vr基因型频率及C和T等位基因频率差异显著（P〈0．05），CC和CT基因型及T等位基因的患病风险分别为0．012、0．504和0．003。LRP6基因rs121918313测序检出有杂合性缺失和单碱基的替换，第131位密码子核苷酸AAA→CAA。结论LRP5／6基因多态性位点可能对HD有影响，并且可能有一定的遗传性。
- 高红张娟陈东弭杰王维林
- 关键词：先天性巨结肠症多态性基因型
- DVL-1和DVL-3基因在先天性巨结肠症肠管中的表达
- 2014年
- 目的通过dishevelled-1（DVL-1）和dishevelled-3（DVL-3）基因及其相关蛋白在先天性巨结肠症（Hirschsprung＇s disease，HD）中表达水平的研究，探索DVDl和DVD3与HD的发病关系。方法利用荧光实时定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR）、蛋白质印迹（Westernblot）和免疫组织化学方法检测50例HD患儿狭窄段（无神经节细胞）和正常段（有神经节细胞）肠管组织DVL-1和DVL-3的表达情况，并对其表达进行定量分析与比较。结果DV卜1在HD狭窄段肠管中mRNA表达量是正常段肠管中的2．06倍；DVD3在HD狭窄段肠管中mRNA表达量是正常段肠管中的3．12倍，差异有统计学意义（P〈0．03）。Westernblot结果显示，DVDl在HD狭窄段肠管中蛋白相对表达量为39．71±4．53，高于正常段肠管蛋白表达量为15．01±2．66，差异有统计学意义（P〈0．05）；DVD3在HD狭窄段肠管中蛋白相对表达量为53．90土6．79，高于正常段肠管蛋白的表达量20．13±3．63，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组化结果显示，DVDl和DVD3在HD狭窄段肠管的黏膜层细胞胞质内呈强阳性反应，呈深棕黄色，而在HD正常段肠壁的黏膜层细胞胞质内呈阴性或弱阳性反应，无色或淡黄色；此外，研究还发现，与正常段的神经丛相比，狭窄段肠管中异常增生的神经纤维组织内DVL-3的表达信号更强。结论DVD1和DVD3mRNA与蛋白在HD狭窄段肠管中高表达，提示DVD1和DVL-3与HD的发生有密切关系，可能在先天性消化道畸形的肠道发育中具有重要作用；DVD3可能成为今后临床诊断HD一项参考指标。
- 陈东弭杰伍美高红
- 关键词：先天性巨结肠聚合酶链反应
- Wnt1和Wnt8a基因在先天性巨结肠中的表达
- 2012年
- 目的观察Wnt1和Wnt8A基因在先天性巨结肠症（HD）中的表达，探讨其在HD发生、发展中的作用。方法对60例HD正常肠段（神经节细胞）和狭窄肠段（无神经节细胞）组织肠管中Wnt1和Wnt8a mRNA和蛋白表达进行定量与比较。结果Wnt1和Wnt8a在HD狭窄段肠管中mRNA表达水平分别为17．66±1．28和29．61±3．23，正常段肠管中mRNA表达水平分别为31．77±2．21和15．01±1．29，差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot检测结果显示，Wnt1和WntSa在HD狭窄段肠管中蛋白含量为19．51±1．57和33．17±2．09，正常段肠管中蛋白含量分别为37．05±1．23和17．35±0．87，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学结果显示，Wnt1在正常段肠管中高表达（呈棕黄色），Wnt8a在狭窄段肠管中高表达（呈棕黄色）；Wnt1在狭窄段肠管中低表达（无色或淡黄色），WntSa在正常段肠管低表达（无色或淡黄色）。结论Wnt1和Wnt8amRNA与蛋白在HD的异常表达，提示Wnt1和Wnt8a与HD的发生密切相关，可能在先天性消化道畸形的肠道发育中具有重要作用。
- 高红伍美弭杰张娟贾慧敏王维林
- 关键词：先天性巨结肠症WNT1基因表达
- Ghrelin基因多态性与先天性肛门直肠畸形和先天性巨结肠的关系被引量：3
- 2015年
- 目的探讨Ghrelin基因单核苷酸多态性（SNP）与先天性肛门直肠畸形（ARM）和先天性巨结肠（HSCR）发生的关系。方法分别采用PCR和DNA直接测序方法，检测100例ARM、100例HSCR患儿以及100名健康儿童外周血中Ghrelin基因3个SNP位点（rs139684563、rs149447194和rs186599567）的基因型；并通过与正常小儿进行对比，分析ARM和HSCR患儿的基因变异与突变情况。结果3个SNP位点均符合HaZy—Weinberg遗传平衡（P〉0．05）。ARM和HSCR患儿rs149447194和rs186599567位点基因型分布及等位基因频率与正常小儿比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05），而rs139684563位点基因型分布及等位基因频率与正常小儿的差异则无统计学意义（P〉0．05）。DNA测序结果显示，ARM和HSCR患儿rs149447194和rs186599567位点均可检出有野生型纯合子缺失（分别为第176和191位碱基A缺失）；ARM患儿还可在rs149447194位点检出有单碱基替换（第194位密码子核苷酸CCT→CTC）。结论Ghrelin基因rs149447194和rs186599567两个位点的多态性改变可能与ARMs和HSCR的发生有关。
- 高红王大佳赵相轩弭杰白玉作王维林
- 关键词：先天性肛门直肠畸形先天性巨结肠GHRELIN基因单核苷酸多态性
