张颖颖
- 作品数：4 被引量：21H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 宫颈鳞癌组织与细胞系中血管紧张素Ⅱ-1型受体的表达及其临床意义被引量：9
- 2007年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT1R）在宫颈鳞癌组织及细胞系中的表达及临床意义。方法（1）应用半定量RT-PCR方法,检测石蜡包埋组织中AT1R mRNA的表达,其中宫颈鳞癌组织35例,宫颈上皮内瘤变（CIN）组织15例,正常宫颈组织15例,2株宫颈鳞癌细胞系Siha、C33a;免疫组化技术检测其AT1R蛋白的表达,并分析AT1R基因的表达与宫颈癌临床病理参数的关系。（2）血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）以不同浓度分组共培养鳞癌细胞,应用MTT比色法检测AngⅡ对Siha、C33a细胞的促增殖作用;应用ELISA实验方法检测AngⅡ对Siha、C33a细胞表达血管内皮生长因子（VEGF）的影响,并观察ATIR拮抗剂颉沙坦（valsatan）对AngⅡ的抑制效应。结果（1）AT1R mRNA在2株宫颈鳞癌细胞中高表达,在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率及平均相对表达量（77．1％, 0．3863±0．041）均明显高于CIN组（40．0％,0．0768±0．035）和正常宫颈组（0．0％,0;P〈0．01）; AT1R蛋白在宫颈鳞癌组织中的阴性、弱、中、强表达依次为0、23％、23％和54％,与CIN和正常宫颈组织相比,其表达水平显著上调（P〈0．01）;并且AT1R mRNA和蛋白的高表达与宫颈鳞癌组织分级有关（P〈0．05）,而与临床分期及盆腔淋巴结转移无关（P〉0．05）。（2）AngⅡ在10^-9～10^-8mol／L水平对Siha、C33a细胞有明显的促增殖作用;在10^-8mol／L水平可上调Siha、C33a细胞VEGF的表达,而valsatan可明显下调AngⅡ促细胞分泌VEGF的作用（P〈0．01）。结论AngⅡ及AT1R表达增高可能通过促进肿瘤细胞的无限增殖,并上调肿瘤细胞VEGF的表达以促进肿瘤血管生成;拮抗AT1R有可能为宫颈癌的治疗提供新的选择。
- 廖艳丹徐弘韩庆雷婕张颖颖王泽华
- 关键词：宫颈鳞癌
- 子宫颈癌细胞中RAR-β基因表达缺陷与其DNA甲基化的关系被引量：8
- 2007年
- 目的观察宫颈癌细胞中 RAR-β基因表达的情况,并探讨 RAR-β基因 DNA 甲基化与RAR-β基因表达缺陷的关系。方法采用 RT-PCR 技术检测宫颈癌细胞系 SiHa、HeLa、C33A 和Caski 细胞中 RAR-β mRNA 的表达,免疫荧光化学染色法及蛋白印迹法检测其 RAR-β蛋白的表达,同时应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术检测宫颈癌细胞中 RAR-β基因 DNA 甲基化状态及采用5-脱氧-2′-杂氮胞苷(5-Aza-cdR)处理后 RAR-β基因 DNA 甲基化状态的变化,以及5-Aza-cdR 处理对 RAR-β基因表达缺陷的影响。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定5-Aza-cdR 对细胞增殖的影响。结果 SiHa、HeLa、Caski 和 C33A 细胞中 RAR-β mRNA 的表达水平分别为0.25±0.08、0、0.60±0.19、3.12±0.92,RAR-β蛋白表达水平分别为0.23±0.07、0、0.14±0.05、0.68±0.21。SiHa、HeLa、Caski 细胞中存在 RAR-β基因的表达缺失或低下,而 C33A 细胞中存在 RAR-β基因的表达。MSP 技术检测发现,SiHa、HeLa、Caski 细胞中存在 RAR-β基因 DNA 甲基化,而 C33A 细胞为非甲基化状态。5-Aza-cdR 处理后,SiHa、HeLa、Caski 和 C33A 细胞中 RAR-β mRNA 的表达水平分别为1.82±0.59、2.13±0.62、1.67±0.43、2.95±0.89,RAR-β蛋白表达水平分别为0.69±0.21、0.83±0.29、0.56±0.16、0.64±0.20。5-Aza-cdR 处理前后 SiHa、HeLa、Caski 细胞中 RAR-β mRNA 和蛋白的表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);C33A 细胞中 RAR-β mRNA 和蛋白的表达比较,差异则无统计学意义(P>0.05)。5-Aza-cdR 处理后能抑制宫颈癌细胞的增殖。结论 RAR-β基因的表达缺陷在宫颈癌的发生中起重要作用,RAR-β基因 DNA 异常甲基化是导致该基因表达缺陷的重要原因。
- 高艳萍李敏张颖颖王翰贺小红王泽华
- 关键词：DNA甲基化维甲酸阿扎胞苷基因表达
- 宫颈癌组织中DNA修复基因06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶启动子区过甲基化研究被引量：2
- 2007年
- 目的：研究宫颈癌中06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（06-Methylguanine-DNA Methyltransferase，MGMT）基因甲基化状态及其mRNA的表达，探讨MGMT基因甲基化与其基因表达缺陷的关系。方法：用甲基化特异性PCR（MSP）、半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测4株宫颈癌细胞、15例正常宫颈组织、20例宫颈上皮内瘤变及38例宫颈浸润癌组织中MGMT基因启动子区过甲基化状态及其mRNA的表达，同时分析MGMT基因甲基化与宫颈癌病理分级、临床分期及淋巴转移之间的关系。结果：4株宫颈癌细胞、正常宫颈组织及CINⅠ组织中无MGMT基因甲基化，MGMT甲基化在CINⅡ～CINⅢ组织中占27％，浸润性宫颈癌中占31％。MGMT基因甲基化在不同的病理分级（P=0．263）和临床分期（P=0．342）中差异无显著性，在有无盆腔淋巴结转移上，差异有显著性（Х^2=7．785，P=0．005）。所有MGMT甲基化的癌组织及CIN组织均无MGMT mRNA表达，而所有非MGMT甲基化癌组织、CIN组织和正常宫颈组织均有MGMT mRNA表达。结论：宫颈癌中MGMT基因启动子区异常甲基化是导致此基因表达缺陷的主要原因。
- 高艳萍王泽华李敏张颖颖王翰贺小红
- 关键词：甲基化宫颈肿瘤
- 子宫颈癌发生发展中维甲酸受体-β基因启动子甲基化状态的研究被引量：2
- 2008年
- 目的 研究维甲酸受体-β(RAR-β)基因在子宫颈癌发生、发展中的表达变化,分析其差异表达与甲基化的关系及临床意义.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测四种子宫颈癌细胞株、38例子宫颈浸润癌、30例子宫颈上皮内瘤变组织、10例正常子宫颈组织中RAR-β基因的表达,Western blotting对RAR-β蛋白进行定量检测,分析蛋白水平上的RAR-β表达的变化,并与正常子宫颈组织的RAR-β表达情况进行对照.应用甲基化特异性PCR(MSP)对细胞系和组织的RAR-βDNA进行甲基化分析,同时分析RAR-β基因的表达与子宫颈癌临床病理参数的关系.结果 子宫颈癌细胞系、子宫颈上皮内瘤变组织和子宫颈癌组织中RAR-β基因的表达缺失或下降,并与正常子宫颈组织中的RAR-β表达情况进行对照,差异具有统计学意义(P＜0.05).蛋白的表达检测也得到相同的结果.MSP检测发现3种子宫颈癌细胞株、11例癌组织、1例CIN Ⅰ级、5例CIN Ⅱ～Ⅲ级RAR-β第1外显子甲基化表现,甲基化者RAR-β表达均下降.RAR-β基因甲基化状态在不同的病理分级中差异有统计学意义(P=0.037),在不同的I临床分期(P≈1.000)及有无淋巴转移中差异无统计学意义(P≈1.000).结论 RAR-β基因的表达缺陷在子宫颈癌的发生中起重要作用,而启动子区异常甲基化是导致基因表达缺陷的主要原因.
- 高艳萍李敏张颖颖王翰贺小红王泽华
- 关键词：子宫颈肿瘤维甲酸甲基化
