张愚
- 作品数：90 被引量：252H指数：8
- 供职机构：首都医科大学宣武医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 帕金森病的细胞治疗研究进展
- 2015年
- 干细胞为治疗帕金森病提供了新的希望.目前用于研究的干细胞主要有神经干细胞、胚胎干细胞、诱导多功能干细胞、间充质干细胞等.本文回顾了上述细胞在移植治疗帕金森病研究中的进展,并介绍了近期出现的将体细胞直接重编程为神经细胞或神经干细胞的新技术.
- 吴剑宇张愚陈志国
- 关键词：干细胞帕金森病
- TGFβ_1和BMP_2在人膝骨关节炎滑膜组织中的表达研究被引量：7
- 2006年
- 目的探讨转化生长因子(TGF-β1)和骨形成蛋白(BMP2)在人膝骨关节炎滑膜组织中的作用。方法采用免疫组织化学及原位杂交方法在光镜下观察TGFβ1和BMP2在人膝骨关节炎滑膜组织中的表达,以类风湿关节炎及健康意外截肢患者分别作为疾病对照组及正常对照组。结果早期骨关节炎(OA)患者滑膜组织各层TGFβ1蛋白表达与类风湿关节炎(RA)组及正常对照组差异有统计学意义(P<0.05);TGFβ1mRNA在血管周围及滑膜衬里层与RA组差异有统计学意义(P<0.05)。早期OA滑膜组织各层BMP2蛋白及BMP2mRNA表达与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05);与RA组差异无统计学意义。早期OA各层TGFβ1、BMP2蛋白的表达与各炎症指标无相关性;早期RA滑膜衬里层TGFβ1蛋白表达与外周血小板计数呈正相关性,早期RA血管周围TGFβ1蛋白表达与炎症指标CRP呈正相关性。结论TGFβ1mRNA以及蛋白在OA的高表达可能成为OA后期骨化过度、骨性强直的原因之一;BMP2在OA滑膜组织各层的高表达推测有可能为OA软骨骨化强直病理变化中重要的“启动子”。
- 赵绵松李小霞张愚
- 关键词：滑膜骨形态发生蛋白类
- 移植肾活检的临床实用性研究
- 针对肾移植受者的术后监测,移植肾活组织检查被认为是鉴别各种移植肾功能减退原因的金标准.然而,有关移植肾活检的益处和依据病理结果进行治疗病例的预后等相关研究报告甚少.在该研究中,我们尝试评价移植肾活组织检查对肾移植受者的临...
- 张愚
- 关键词：肾移植活组织检查病理移植肾排斥反应
- 文献传递
- 小鼠胚胎干细胞分化扩增期连续低密度传代对原始细胞中Oct-4阳性细胞比例及神经分化能力的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨在分化扩增期采用连续低密度传代的方法是否能降低小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的前体细胞中Oct-4阳性细胞的比例,以及对神经分化能力的影响。方法:采用"五步法"将小鼠胚胎干细胞向神经元分化,进入扩增期后采用连续低密度传代的方法连续传10代。然后应用细胞免疫组化鉴定Oct-4阳性细胞、神经元与胶质细胞、流式细胞仪检测Oct-4阳性细胞比例、凋亡试剂盒测定细胞凋亡。结果:流式细胞仪检测出扩增期连续低密度传代得到的前体细胞中Oct-4阳性细胞的比例由16.17±4.8%降至4.33±1.63%,扩增期低密度传代细胞和正常高密度传代细胞的细胞凋亡率鉴定分别为15.16±3.64%和11.88±2.63%,步骤5诱导分化后的细胞GFAP和Tuj-1免疫组化染色呈阴性。结论:低密度传代培养可以减少分化后Oct-4阳性细胞的比例,且该比例下降不是由Oct-4阳性细胞的凋亡引起的。同时可能是因为低密度传代培养和高密度相比引起了细胞的质变、或者改变了前体细胞向神经元分化的某种微环境,导致了前体细胞不能分化为神经细胞。提示高密度培养在前体细胞向神经元分化过程中具有重要作用,高密度和低密度培养的比较,提供了研究ES细胞向神经元分化机制的新平台和研究方向。
- 王芳杜庆安朱宛宛吴迪徐艳玲关云谦张愚
- 关键词：神经分化
- 临床级脐带间充质细胞制备及鉴定方法研究
- 目的：在GLP 实验室中制备并鉴定临床级脐带间充质细胞(Umbilical Cord-Mesenchymal Stromal Cells,UC-MSC)。方法：新鲜获取的脐带去除血管并进行充分清洗,获得的华通胶(Whar...
- 袁艳鹏王淑艳唐玺和刘仲凤张愚陈志国
- 关键词：胶原酶无血清培养基
- 利用巢式聚合酶链反应检测单个胚胎小体细胞中时钟基因的表达被引量：2
- 2006年
- 目的建立一组灵敏的检测时钟基因(c lock gene)的巢式聚合酶链反应(nested PCR)方法,并检测小鼠胚胎小体(EB)来源的单细胞中重要时钟基因的表达情况。方法培养小鼠胚胎干细胞(mESC),体外诱导分化为EB,提取总RNA并进行反转录,用BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2基因特异引物进行巢式聚合酶链反应,电泳检测扩增产物,从而建立相应的巢式PCR反应体系。利用膜片钳获取胚胎小体来源的单个细胞,通过巢式PCR反应检测相应时钟基因的表达情况。结果确定了BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2基因的扩增参数。证明在此条件下无非特异扩增,并且能够检测到至少两个拷贝的目的分子。利用此检测体系发现,部分胚胎小体细胞中BMAL1、CLOCK、CRY1和CRY2时钟基因环路不完整。结论巢式PCR方法能够灵敏地、而且特异地从单细胞中检测出一组时钟基因的表达,时钟基因的转录在胚胎小体细胞中并不一致,即时钟基因的环路不完整。时钟基因可能在细胞分化过程中发挥着某种作用。
- 关云谦蔡彦宁谢淑朱宛宛徐艳玲张愚陈彪
- 关键词：巢式聚合酶链反应时钟基因单细胞
- 氧化应激诱导多巴胺能MES23.5细胞α-突触核蛋白C-末端片段核转位被引量：2
- 2005年
- 目的研究α-突触核蛋白(α-Syn)和氧化应激的相互作用关系。方法用200μmol/LH2O2处理多巴胺能MES23·5神经细胞作为氧化应激的细胞模型。采用免疫荧光、硫磺素S组织化学染色和免疫印迹技术检测细胞氧化应激反应中α-突触核蛋白的表达状态和亚细胞定位。结果200μmol/LH2O2处理可诱导α-突触核蛋白从细胞浆转位到细胞核内,而且转位到细胞核内的是约10kD的α-突触核蛋白C-末端片段,而存在于细胞浆内的是完整的α-突触核蛋白。硫磺素S染色显示,转位到细胞核内的α-突触核蛋白C-末端片段呈非聚集状态。结论氧化应激可诱导多巴胺能MES23·5神经细胞α-突触核蛋白C末端约10kD的片段核转位。
- 徐胜利周明张丽燕徐艳玲张愚陈彪
- 关键词：Α-突触核蛋白氧化应激多巴胺能神经元
- 食蟹猴胚胎干细胞向间充质前体细胞诱导分化及鉴定被引量：1
- 2011年
- 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可以诱导分化成脂肪、软骨、骨骼和骨骼肌细胞,并可作为骨骼、软骨或肌肉移植中的再生干细胞,广泛应用于细胞治疗和组织工程。胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)具有体外培养无限增殖和多向分化的特性,能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。该研究通过无血清条件下诱导食蟹猴ESCs形成类胚体(embryoid bodies,EBs),然后在血清条件下贴壁分化EBs成间充质前体细胞(mesenchymal precursor cells,MPCs),再经过长期体外培养,纯化和扩增MPCs。结果显示,纯化后的MPCs具有MSCs生物学特征,并能在体外诱导分化成脂肪细胞和骨细胞。将这些细胞皮下注射给SCID小鼠,并未发现形成肿瘤,提示食蟹猴ESCs来源的MPCs具有一定的安全性。
- 任振华王佳茵朱宛宛邹春林张愚
- 关键词：分化
- 一种新的将神经球分散为单细胞悬液的方法被引量：3
- 2006年
- 目的比较3种将神经球打散成单细胞悬液的方法对神经干细胞活性的影响。方法将16～20周人胚胎神经干细胞体外培养扩增形成神经球，分别用胰蛋白酶消化法、巴斯德管吹打法和消化振荡法，将神经球打散成单细胞悬液，通过台盼蓝染色测定细胞活性及接种后增生情况，观察3种方法对神经干细胞活性的影响。结果消化振荡法打散神经球，细胞存活率（96．20％）和再次成球率（19．24％）都较其他2种方法高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论消化振荡法对人胚胎神经干细胞的活性影响较小，是一种有效、安全的将神经球打散成单细胞悬液的实验方法。
- 董恺张愚
- 关键词：胚胎神经干细胞神经球
- 慢病毒转染胶质细胞源性神经营养因子基因的胎儿骨髓间充质干细胞的研究
- 2010年
- 目的探讨胎儿骨髓间充质干细胞(fBMMSCs)经慢病毒转染胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因后GDNF的表达情况。方法利用贴壁培养法,从流产胎儿的股骨骨髓中分离培养fBMMSCs,并进行扩增。取第5代fBMMSCs,用慢病毒载体转染GDNF基因。应用免疫组化法及ELISA法检测被转染的fBMMSCs GDNF的表达情况。结果被转染GDNF基因的fBMMSCs GDNF表达阳性,且培养液中GDNF含量随培养时间延长而增高。结论被慢病毒转染GDNF基因的fBMMSCs能表达GDNF。
- 李晓波关云谦顾建娟任萍吴迪丁新生张愚
- 关键词：慢病毒胶质细胞源性神经营养因子胎儿骨髓间充质干细胞
