张彦青
- 作品数：7 被引量：1H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 粘膜免疫ClpX蛋白对小鼠肺炎链球菌感染的保护效果及机制的实验研究
- 钟文董杰张雪梅尹一兵胥文春王虹黄远帅曹炬龚艺徐绣宇闵迅张彦青
- 通过替代失活的方法分析核酸片段在细菌毒力中作用
- 张彦青黄健张群钟文胥文春王虹张雪梅
- SPD1672蛋白的关键功能域鉴定及其对不同血清型肺炎链球菌合成磷壁酸和毒力的影响研究
- 目的： 磷壁酸(Teichoic Acids)是革兰阳性细菌细胞壁上一种的多糖聚合物，是细菌表面重要的抗原。spd1672基因是本课题组前期筛选出的一个体内诱导基因，生物信息学分析显示该基因在各种血清型肺炎链球菌中的高...
- 张彦青
- 关键词：肺炎链球菌
- 文献传递
- SPD1672蛋白对肺炎链球菌磷壁酸合成和细菌增殖的影响被引量：1
- 2015年
- 目的鉴定SPD1672基因在肺炎链球菌细胞壁多糖合成及增殖中的作用。方法通过生物信息学分析SPD1672蛋白可能的生物学功能,用替代失活法在肺炎链球菌D39菌株和R6菌株中敲除该基因,用电子显微镜观察基因缺失菌株与野生菌株荚膜厚度,Western blot检测磷壁酸合成量,最后以吸光度法测定肺炎链球菌体外增殖能力。结果成功构建SPD1672基因缺失菌;SPD1672基因缺失菌株与野生菌株相比,荚膜厚度无差异;而缺陷菌株的C反应蛋白结合量较野生菌显著减少(P<0.01),其磷壁酸含量也较野生菌显著下降。此外,SPD1672基因缺失菌体外增殖较野生菌缓慢(P<0.05)。结论 SPD1672蛋白影响肺炎链球菌磷壁酸合成和体外增殖能力,是肺炎链球菌的一种新毒力因子。
- 黄健张彦青黄美容吴凯峰胥文春王虹
- 关键词：肺炎链球菌
- 通过替代失活的方法分析核酸片段在细菌毒力中作用
- 目的为鉴定基因spd-ABC、spd-1672、spd-1673和长间隔序列spd-J在细菌毒力中的作用。方法采用长臂同源聚合酶链反应(LFH-PCR)的方法分别构建这四个序列的红霉素抗性基因(erm)替代缺失突变体,通...
- 张彦青黄健张群钟文胥文春王虹张雪梅
- 文献传递
- 肺炎链球菌热休克蛋白ClpL的原核表达、纯化及抗原特性分析
- 2012年
- 目的原核表达并纯化肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,S.pn)热休克蛋白ClpL,并评价其作为S.pn疫苗候选蛋白的可行性。方法PCR扩增S.pn D39全长ClpL基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达的重组ClpL蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,免疫BALB/c小鼠,ELISA检测抗ClpL多克隆抗体的效价及亚型;Western blot分析ClpL蛋白在5种常见S.pn中的保守性;流式细胞术及Western blot分析ClpL蛋白在S.pn中的亚细胞定位。结果重组表达质粒pET-28a(+)-ClpL经双酶切及测序证实构建正确;ClpL蛋白在E.coli BL21(DE3)中获得了可溶性表达,纯化后纯度达90%,浓度为4.97 mg/ml;免疫小鼠可产生高滴度、高特异性的IgG抗体,以IgG1和IgG2b亚型为主;ClpL蛋白在5株常见S.pn中均有表达;ClpL蛋白为分泌型蛋白,不表达于S.pn表面。结论原核表达并纯化了S.pn ClpL蛋白,其作为一种在S.pn中保守存在的分泌型蛋白,可能是一种较好的疫苗候选蛋白。
- 钟文张群龚艺张彦青陈倩陈特董杰王虹张雪梅
- 关键词：链球菌肺炎原核细胞纯化
- 通过替代失活的方法分析核酸片段在肺炎链球菌毒力中的作用
- 2011年
- 目的鉴定基因spd—ABC、spd-1672、sp-1673和长间隔序列spd—J在肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae，S．pn）毒力中的作用。方法采用长臂同源聚合酶链反应（LFH—PCR）的方法分别构建这4个序列的红霉素抗性基因（erm）替代缺失突变体，通过PCR和测序鉴定是否构建成功；通过绘制生长曲线观察基因对细菌生长繁殖的影响，通过小鼠毒力实验观察基因对细菌致病性的影响。结果所构建缺陷菌目的基因由eFm基因完全替代；spd—ABC、spd-1673和长间隔序列spd—J3个片段缺陷菌的生长趋势与野生菌没有明显差异，生长大约5hA值均可达到峰值，而spd-1672缺陷菌出现明显的延迟现象，生长8h后其4值才达到最高值；野生菌与缺失spd—ABC、spd-1673和长间隔序列spd—J的缺陷菌感染小鼠各组半数死亡时间分别为19、22、24和24h，差异无统计学意义，而spd-1672缺陷菌感染小鼠的半数死亡时间在75h左右，显著长于野生菌感染小鼠组（P〈0．05）。结论在构建的4个单个基因缺失突变体中，spd-1672缺陷后．S．pn生长明显延迟，毒力显著下降，提示spd-1672是s-Pn的一个新的毒力因子。
- 张彦青黄健张群钟文胥文春王虹张雪梅
- 关键词：肺炎链球菌毒力
