崔宇杰
- 作品数：14 被引量：26H指数：3
- 供职机构：天津医科大学医学检验学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省基础研究计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 噬菌体抗体库中筛选血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa特异的人源性Fab抗体
- 2008年
- 本研究利用特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）患者产生抗血小板自身抗体的特点，从ITP患者脾脏细胞中提取RNA，扩增抗体轻链和重链Fd基因，插入噬粒载体pComb3H，构建人源性抗GPⅡb／ⅢaFab噬菌体抗体库。以表达GPⅡb／Ⅲa的CH0123细胞筛选抗体库，制备人源性GPⅡb／ⅢaFab噬菌体抗体。
- 崔宇杰董宁征庞爱明白霞阮长耿
- 关键词：噬菌体抗体库细胞筛选特发性血小板减少性紫癜抗血小板自身抗体特异
- 人源性Fab噬菌体抗体库的构建和血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa抗体的筛选、表达及鉴定
- 目的:构建人源性噬菌体Fab抗体库,筛选人源性抗GPⅡb/Ⅲa Fab抗体,为新型抗血栓药物的研制奠定基础。方法:利用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和噬菌体表面展示技术,直接从血清抗GPⅡb/Ⅲa阳性的ITP患者脾...
- 崔宇杰董宁征庞爱明白霞阮长耿
- 文献传递
- 人源性抗血小板膜糖蛋白IIb/IIIa Fab噬菌体抗体库的构建被引量：2
- 2006年
- 目的:构建人源性Fab噬菌体抗体库,为进一步从抗体库中筛选人源性抗GPIIb/IIIaFab抗体奠定基础。方法:利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术,直接从血小板膜糖蛋白抗体(抗-GPIIb/IIIa)阳性的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者脾细胞中提取总RNA,逆转录合成cDNA,扩增抗体轻链和重链Fd基因。经SacI/XbaI和XhoI/SpeI双酶切,依次将PCR产物插入噬粒载体pComb3H相应位点,电转化大肠杆菌XL1-blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染,构建成人源性Fab噬菌体抗体库。结果:成功地构建库容量达6.2×106的抗血小板膜糖蛋白GPIIb/IIIaFab噬菌体抗体库。结论:构建了人源性Fab抗体库,并达到建库标准,可进一步从中筛选人源性Fab抗体。
- 崔宇杰董宁征庞爱明白霞阮长耿
- 关键词：FAB抗体噬菌体表面展示技术血小板膜糖蛋白IIB/IIIA
- 抗血小板膜糖蛋白自身抗体检测在原发性干燥综合征发病中的意义
- 目的:原发性干燥综合征(primary Sjogren syndrome,pSS)是一种慢性炎症性的自身免疫性结缔组织疾病,在我国发病率为0.29%～0.77%,为结缔组织病的首位。pSS主要影响外分泌腺,也影响非外分泌...
- 崔宇杰阮长耿郭雨凡陈志伟
- 文献传递
- Syk、JNK在1型糖尿病大鼠心肌中的作用机制研究被引量：4
- 2017年
- 目的分析糖尿病心肌病SD大鼠心肌组织中脾酪氨酸激酶(Syk)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的表达水平,并探讨三者的作用关系。方法清洁级雄性SD大鼠随机分为对照(Ctrl)组和模型(DCM)组,DCM组采用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射方法造模,Ctrl组注射同等剂量的柠檬酸缓冲液。每周监测2组随机血糖和体质量,直至STZ注射后20周,处死取其心脏。大鼠H9c2心肌细胞随机分为正常糖处理(NG)组、高糖处理(HG)组、Syk抑制剂对照(BAY)组,Syk抑制剂高糖(HG+BAY)组。Western blot方法在蛋白水平检测大鼠心肌组织和H9c2心肌细胞中Syk、JNK的磷酸化及NLRP3的表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法在mRNA水平检测NLRP3、半胱氨酸天门冬氨酸特异性蛋白酶1(caspase-1)及白细胞介素(IL)-1β的表达。结果与Ctrl组相比,DCM组大鼠的随机血糖水平显著升高,体质量显著降低(P<0.05),DCM组大鼠心肌组织中p-Syk、p-JNK及NLRP3的蛋白表达明显增加(P<0.05),且NLRP3、caspase-1和IL-1βmRNA的表达也显著增加(P<0.05)。BAY处理后显著抑制了高糖诱导的H9c2心肌细胞中NLRP3、caspase-1、IL-1βmRNA的表达和p-JNK、NLRP3蛋白的表达(P<0.05)。结论 Syk诱导的JNK磷酸化及NLRP3炎症小体的活化在糖尿病心肌病的发病机制中发挥关键作用。
- 陈玉凤龙广凤田熙熙乔迎春李胜玉薛美婷刘运德崔宇杰申艳娜
- 关键词：糖尿病心肌病SYKC-JUN氨基末端激酶
- c-Met抑制剂被引量：5
- 2008年
- 编码肝细胞生长因子酪氨酸激酶受体的c-met原癌基因具有控制细胞生长、侵袭和抗凋亡的作用。Met活化失调在肿瘤发生及其获得侵袭性表型中都有重要的作用。c-Met抑制剂可有效抑制肿瘤细胞生长及转移,从而为抗肿瘤治疗提供了新方法。我们综述了针对c-Met信号途径的抗肿瘤药物开发的4种途径:受体/配体拮抗剂;针对TK催化活性的小分子抑制剂;阻断受体与其下游效应因子的相互作用;降低细胞表面c-Met受体数量。
- 李雪崔宇杰
- 关键词：肿瘤抑制剂
- 人源性抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa Fab抗体的研制及其对血小板聚集功能的影响被引量：9
- 2009年
- 目的:构建人源性抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPI-Ib/IIIa)Fab噬菌体抗体库,筛选抗GPⅡb/Ⅲa特异性的噬菌体抗体,并对其功能进行研究。方法:取血小板膜糖蛋白抗体(抗GPIIb/IIIa)阳性的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者脾细胞,采用噬菌体抗体库技术构建人源性抗GPⅡb/Ⅲa Fab噬菌体抗体库,以表达GPⅡb/Ⅲa的CHO123细胞筛选抗体库,并以ELISA法检测噬菌体抗体;用Western blot对抗体进行鉴定,并测定其与血小板抗原的结合;观察筛选到Fab抗体对血小板聚集的影响。结果:筛选出2株能够与血小板膜GPⅡb/Ⅲa特异性结合的Fab抗体,其序列与人免疫球蛋白轻、重链可变区序列具有高度同源性,表达纯化的Fab抗体能抑制血小板聚集。结论:成功地从人源性抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa Fab抗体库筛选出特异性识别GPⅡb/Ⅲa,具有抑制血小板聚集作用的人源性抗体。
- 董宁征崔宇杰阮长耿
- 关键词：血小板膜糖蛋白IIB/IIIAFAB血小板聚集
- 应用彩色多普勒超声诊断小腿肌间静脉扩张及血栓形成被引量：2
- 2014年
- 目的探讨彩色多普勒超声应用于小腿肌间静脉检查,在发现腓肠肌及比目鱼肌肌间静脉扩张及血栓形成中的价值。方法对腓肠肌及比目鱼肌肌间静脉均扩张的82名患者128支下肢静脉进行彩色多普勒超声检查,观测最宽内径及有无血栓形成或形成倾向。结果发现肌间静脉血栓8例(9.8%),其中4例(4.9%)并发肺栓塞;发生肌间静脉血栓的静脉内径(0.65±0.30)cm;其中并发肺栓塞的肌间静脉内径(0.62±0.29)cm;扩张的肌间静脉内具有血栓形成倾向管腔内见"泥沙流"9例(11.0%)。结论彩色多普勒超声可早期发现小腿肌间静脉扩张及血栓形成或血栓形成倾向,以辅助诊断肺栓塞的发生。
- 孙柏馨崔宇杰谭光群高晓军曲虹贾莉娜仁图戈
- 关键词：肺栓塞静脉曲张
- ADAMTS-13活性水平检测在SLE中的临床意义
- 2005年
- 目的 探讨vWF裂解蛋白酶(ADAMTS 13,vWF cp)活性水平的检测在系统性红斑狼疮(SLE)中的临床意义。方法 采用残余胶原结合实验(residual collagenbindingassay)对38例SLE患者血浆ADAMTS 13活性水平进行检测,同时以6例血栓性血小板减少性紫癜(TTP)患者为阳性对照,以32例健康人为正常对照。结果 SLE及TTP患者血浆ADAMTS 13活性水平[(71.34±12 .85 ) %、(12 .5 4±11.6 9) % ]显著低于正常人[(78.6 0±10 .0 3) % ](P <0 .0 1) ,SLE血浆ADAMTS 13活性水平明显高于TTP患者(P <0 .0 1) ,SLE血浆ADAMTS 13活性水平阳性率[18.4 2 % (7/ 38) ]明显低于TTP患者[10 0 % (6 / 6 ) ](P <0 .0 1)。结论 ADAMTS 13活性水平检测对研究SLE血栓形成过程具有重要意义,也可能有助于SLE与TTP的鉴别诊断。
- 崔宇杰刘芳白霞阮长耿
- 关键词：系统性红斑狼疮
- 人源性抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa Fab噬菌体抗体库的筛选与鉴定被引量：3
- 2008年
- 目的从已构建的人源性抗血小板膜糖蛋白(glycoprotein,GP)Ⅱb/ⅢaFab噬菌体抗体库中筛选人源性抗血小板膜GPⅡb/ⅢaFab抗体,并对特异性阳性克隆进行鉴定。方法以表达GPⅡb/Ⅲa的CHO123细胞包板,对人源性抗血小板膜GPⅡb/ⅢaFab噬菌体抗体库进行富集筛选,采用细胞ELISA法筛选特异性阳性克隆,用Western blot法鉴定表达蛋白与GPⅡb/Ⅲa结合的特异性,将阳性克隆进行扩增、测序。结果以CHO123细胞富集淘筛3轮,并用ELISA法检测到2个高亲合力的特异性识别血小板膜GPⅡb/Ⅲa的克隆,Westernblot鉴定结果显示在阳性克隆的培养上清和细菌冻融上清均有特异性条带出现。对核苷酸序列进行同源性分析,证实这两个克隆轻链基因与人免疫球蛋白κ轻链的同源性分别高达97%和98%,重链基因与人免疫球蛋白Fd段的同源性分别高达94%和93%。结论利用噬菌体抗体库技术,成功地从人源性抗血小板膜GPⅡb/ⅢaFab抗体库中筛选出抗血小板膜GPⅡb/Ⅲa的特异性阳性克隆,该克隆具有较高的特异性,其克隆基因符合抗体可变区结构特点。
- 崔宇杰董宁征庞爱明白霞阮长耿
- 关键词：血小板膜糖蛋白噬菌体抗体库
