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尹永喜
作品数:
3
被引量:1
H指数:1
供职机构:
复旦大学附属华山医院
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发文基金:
上海市基础研究重大(重点)项目
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李新艳
复旦大学附属华山医院
范丽丽
复旦大学附属华山医院
张继明
复旦大学附属华山医院
刘红艳
复旦大学附属华山医院
毛日成
复旦大学附属华山医院
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乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针及其应用方法
本发明属医学领域,涉及乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针及其应用方法。本发明的乙肝病毒阿德福韦耐药变异株的检测探针,是SEQ ID NO 6、SEQ ID NO 7、SEQ ID NO 8、SEQ ID NO 9、SE...
张继明
刘红艳
李义良
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尹永喜
夏佳慧
范丽丽
李新艳
文献传递
乙肝病毒拉米夫定耐药变异株的检测探针及其应用方法
本发明属医学领域,涉及乙肝病毒拉米夫定耐药变异株的检测探针及其应用方法。本发明的乙肝病毒拉米夫定耐药变异株的检测探针,是SEQ ID NO12、SEQ ID NO 13、SEQ ID NO 14、SEQ ID NO 15...
张继明
刘红艳
李义良
毛日成
尹永喜
夏佳慧
范丽丽
李新艳
文献传递
应用液相芯片技术检测拉米夫定耐药相关性HBV变异
被引量:1
2009年
目的建立一种检测拉米夫定(LAM)耐药相关性HBV变异的检测系统。方法从血清样本中提取病毒DNA,经纯化后,与生物素标记的引物经过PCR扩增后,来自HBV开放阅读框架的、被生物素标记的DNA扩增产物与偶联在微球上的特异性寡核苷酸探针杂交,未能结合微球的DNA被洗脱,加入标记有链亲素修饰的藻红蛋白(SAPE),在Luminex分析仪上,用双色激光分别激发微球的红色荧光(定性)和SAPE的绿色荧光(定量),从而判断靶基因的突变类型和相对含量。采用液相芯片(muhi-analyte suspension array,MASA)技术构建有LAM相关耐药的HBV全基因质粒和25例LAM耐药的慢性乙型肝炎患者(CHB)的HBV逆转录区(RT)第180和204位氨基酸的变异情况;并与普通测序法相比较,以了解该方法的特异性;同时将变异株和野毒株按不同比例混合后检测,以了解该方法的敏感性。结果MASA可同时检测a180和n204氨基酸变异,并能准确判断变异的类型及混合变异;MASA对25例LAM耐药的CHB患者相关耐药,检测发现有15份患者标本中20411探针杂交信号明显升高(测序变异阴性和阳性荧光值中位数分别为5和106),有11份样本与204V探针杂交信号较高(测序变异阴性和阳性荧光值中位数分别为9和114)差异有统计学意义(z=-4.588,P〈0.05;z=-4.520,P〈0.05);有2份发现2种探针杂交信号均很高,即有YIDD和YVDD混合变异株存在;仅有1份标本与20412探针杂交信号明显较高。同样用该方法检测20份未治疗患者的血清标本,均未发现LAM相关性变异。当病毒群中含有大于5%的LAM耐药相关HBV变异株时,即可被本方法检测到。结论MASA可用于LAM相关耐药变异株的早期检测。该方法较普通测序法灵敏,且操作简便、高通量、需要时间短,便于临床大样本检测的应用。
刘红艳
毛日成
李义良
夏佳慧
范丽丽
尹永喜
李新艳
赵旭
郭红英
朱浩翔
张继明
关键词:
拉米夫定
芯片分析技术
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