孙端方
- 作品数：5 被引量：53H指数：2
- 供职机构：贵州大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 一株产紫杉醇罗汉松内生真菌的分离和鉴定被引量：43
- 2008年
- 【目的】紫杉醇是重要的抗癌药物,主要从罗汉松等植物中提取,为了保护罗汉松等种质资源,本文从罗汉松植株中分离产紫杉醇内生真菌,并对内生真菌所产紫杉醇的抗肿瘤活性进行了分析。【方法】采用组织块法自罗汉松的根、茎、叶等组织中分离内生真菌;通过四唑蓝(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)比色法筛选有抗肿瘤活性的内生真菌菌株,通过薄层层析(Thin Layer Chromatography,TLC)和高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对内生真菌所产活性物质进行鉴定;采用抽提法抽提内生真菌所产紫杉醇,应用Vero细胞对抽提的紫杉醇的活性进行了分析。【结果】从罗汉松属(Podocrapus)植物中分离到155株内生真菌,其中28株内生真菌具有较高的抑癌活性。将其中一株菌株A2命名为EPTP-1,经形态学和分子分类学分析鉴定为烟曲霉(Aspergillus fumigatus)。菌株EPTP-1中抽提的紫杉醇5.553μg/L～555.3μg/L作用24h表现出明显的致细胞凋亡作用。菌株EPTP-1发酵5天时紫杉醇的产率为0.5578±0.0294mg/L。【结论】从罗汉松中分离到了一株产紫杉醇内生真菌EPTP-1,可作为紫杉醇类药物工业化生产的候选菌株。
- 孙端方冉雪琴王嘉福
- 关键词：内生真菌紫杉醇
- 产紫杉醇内生真菌的分离、鉴定及生物学活性实验
- 从贵州省喀斯特地区生长的数种罗汉松属(Podocrapus)植物中采用组织块法自罗汉松的根、茎、叶等组织中分离到155株内生真菌。其中地上组织的内生真菌种类与地下组织分别占83.87％，16.13％。
155株...
- 孙端方
- 关键词：紫杉醇植物内生真菌组织分离法抑癌活性
- 文献传递
- 罗汉松和珙桐内生真菌的分离及其多样性研究被引量：2
- 2014年
- 为了深刻认识罗汉松和珙桐内生真菌的多样性,分离了183株罗汉松和珙桐内生真菌,结合形态学和分子分类方法对分离内生真菌进行种属鉴定;采用限制性片段长度多态性(RFLP)方法研究分离菌株的遗传多样性。结果表明96株罗汉松内生真菌鉴定为曲霉属Aspergillus、刺盘孢属Colletotrichum、拟茎点霉属Phomopsis、丝枝霉属Aphanocladium、脉孢菌属Neurospora和无孢菌群,Shannon多样性指数为1.73;87株珙桐内生真菌分属于曲霉属Aspergillus、刺盘孢属Colletotrichum、拟茎点霉属Phomopsis、青霉属Penicillium、炭角菌属Xylaria sp.和无孢菌群,Shannon多样性指数为1.53。采用RFLP方法,对全部内生真菌rRNA基因间隔区(ITS)的核苷酸多样性进行了分析,罗汉松和珙桐内生真菌分别聚为22个分枝,同属的菌株聚在一起,同属菌株的RFLP分类相似性在93%以上。罗汉松和珙桐内生真菌中都有无孢菌群,部分菌株与鉴定菌株同处一个分枝中,其他相距较远的无孢菌可能为新的种属。本研究结果提示,罗汉松和珙桐内生真菌的多样性丰富。
- 冉雪琴叶静王嘉福孙端方何映霞
- 关键词：内生真菌限制性片段长度多态性
- 罗汉松内生真菌的抑菌活性研究被引量：2
- 2014年
- 为了研究药用植物内生真菌的次生代谢产物是否具有抑菌活性,以96株罗汉松内生真菌为研究材料,将菌丝及其培养液经氯仿—甲醇抽提后,采用杯碟法测定了全部菌株的抑菌活性。罗汉松内生真菌中49%的菌株具有抑菌作用,其中菌株LHS18、LHS42、LHS67、LHS92和LHS93抽提物经100倍稀释后对金黄色葡萄球菌仍有强的抑菌作用,菌株LHS30抽提物的100倍稀释溶液对大肠杆菌的生长有强烈的抑制作用。对抑菌活性较强的6株菌根据其ITS序列相似性进行了分子鉴定。菌株LHS18和LHS42鉴定为烟曲霉(Aspergillus fumigatus),LHS92为四孢脉孢菌(Neurospora tetrasperma),LHS30为丝枝霉(Aphanocladiumsp.),LHS67为拟茎点霉(Phomopsis liquidambari),LHS93未能鉴定出种属。研究结果提示,罗汉松内生真菌中49%菌株具有抑菌活性,其中6株菌对动物和人类的病原菌有强列的抑制作用,是挖掘高效抑菌物质的重要资源。
- 冉雪琴何映霞孙端方叶静王嘉福
- 关键词：药用植物内生真菌抑菌活性
- 三尖杉内生真菌的遗传多样性研究被引量：7
- 2009年
- 本研究以三尖杉的根、茎、叶中分离的91株内生真菌为材料,根据其菌落颜色、质地、生长速率和分生孢子外观等形态学特征,确定了其中74株产孢内生真菌为5个属。采用特异性PCR对91株菌株的ITS片段进行扩增,获得单一的分子长为600 bp的条带,以4种限制性内切酶对扩增的ITS片段进行RFLP分析,并对部分ITS碱基序列进行测定,表明三尖杉内生真菌的属和种丰富,其中的优势属为刺盘孢属、曲霉属及小丛壳属,表现为热带真菌类型;小丛壳属是首次从三尖杉科植物中分离。本研究结果提示三尖杉内生真菌有丰富的遗传多样性。
- 叶静冉雪琴孙端方何映霞王嘉福
- 关键词：三尖杉内生真菌ITSRFLP
