姚静
- 作品数：8 被引量：40H指数：5
- 供职机构：华南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目农业部渔业生态环境重点开放实验室开放基金广东省渔业生态环境重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学农业科学更多>>
- 唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2010年
- 目的探索建立唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测方法。方法以卵黄脂磷蛋白(Lv)抗血清为抗体,以纯化的Lv作为抗原建立间接酶联免疫吸附反应(ELISA)方法检测雄性唐鱼(Tanichthys albonubes)整体匀浆液中的卵黄蛋白原(Vtg)。结果利用ELISA方法测定了经17-β雌二醇(E2)和不同浓度DDTs暴露21 d诱导的雄鱼整体匀浆液中的Vtg含量,可以直接在1块或在不同的酶标板上准确地进行比较。经0.055 mg/mL E2诱导的雄鱼整体匀浆液中Vtg含量为4148.33μg/g;当暴露DDTs浓度为0.0275、0.0137和0.0067 mg/mL时,雄鱼整体匀浆液中Vtg含量分别为1109.43、911.16和1322.79μg/g,与丙酮溶剂对照组462.79μg/g比较差异存在显著性(P<0.05)。结论建立了唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测方法 ,本方法的检测灵敏度为8.1 ng/mL,批内误差为8.59%,批间误差为6.28%,工作范围为3.26～209.25 ng/mL。在该范围内,标准曲线具有良好的线性和重复性。
- 姚静方展强
- 关键词：酶联免疫吸附反应唐鱼
- 唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测及其应用
- 以卵黄脂磷蛋白（lipovitellin,Lv）抗血清为抗体,以纯化的Lv作为抗原建立间接酶联免疫吸附反应（ELISA）方法检测雄性唐鱼（Tanichthys albonubes）整体匀浆液中的卵黄蛋白原（vitello...
- 姚静方展强
- 文献传递
- 剑尾鱼卵黄脂磷蛋白的纯化及免疫分析被引量：9
- 2007年
- 采用Sephacryl S-300凝胶过滤层析柱和HiTrap Q阴离子交换柱从卵黄生成期的雌性剑尾鱼（Xiphophorus helleri）卵巢组织提纯了卵黄脂磷蛋白（Lv）。已确定被纯化的剑尾鱼Lv在Native-PAGE（4％～7．5％）电泳中分子量为530kD左右。Native-PAGE（4％～7．5％）电泳后的凝胶分别进行糖蛋白染色、脂蛋白染色及磷蛋白染色。结果表明，剑尾鱼Lv是一种富含糖、脂、磷的蛋白。用纯化的剑尾鱼Lv免疫大白鼠获得鼠源多克隆抗血清。用免疫双扩散的方法测定Lv抗血清的效价为1：32。Western-blotting检测显示抗血清的特异性较好；卵黄蛋白原（Vtg）和Lv抗血清之间存在明显的免疫交叉反应，表明Vtg和Lv两者具有相同的免疫原性。免疫双扩散检测表明，抗Lv血清表现出明显的雌性特异性和种的特异性。
- 温茹淑方展强江世贵马广智徐杰姚静
- 关键词：剑尾鱼纯化免疫分析
- 唐鱼卵黄蛋白原的诱导、纯化与鉴定被引量：5
- 2008年
- 为探讨利用雄性唐鱼(Tanichthys albonubes)卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vtg)作为生物标志物检测环境雌激素的可行性,采用浸浴法用50μg·L-117β-雌二醇(E2)对雄性唐鱼进行染毒,30d后将鱼体整体匀浆进行常规聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)以分析Vtg的产生;并采用Mg2+-EDTA选择性沉淀和Q Sepharose阴离子交换层析对Vtg进行分离纯化.结果表明,E2诱导下,雄性唐鱼产生了雌性特异蛋白Vtg,并且可在体内积累;利用Mg2+-EDTA选择性沉淀和Q Sepharose阴离子交换层析的两步纯化方法可分离纯化唐鱼整体匀浆Vtg;经Native-PAGE鉴定,确定唐鱼Vtg的分子量为440kDa.以上结果提示,雄性唐鱼Vtg可以作为环境雌激素监测的有效生物学标记物。
- 姚静方展强徐杰
- 关键词：唐鱼卵黄蛋白原纯化酶联免疫吸附法
- DDTs对唐鱼仔鱼的急性毒性及安全浓度评价被引量：12
- 2007年
- 目的研究有机氯农药滴滴涕(dichlorodiphenyltrichloroethanes,DDTs)对唐鱼的急性毒性,评价水环境中DDTs对鱼类的影响,为渔业部门制定水质标准提供参考。方法使用浸浴法以0.0125、0.025、0.045、0.08和0.14mg/L五个DDTs浓度为唐鱼染毒,计算其对仔鱼的急性毒性及安全浓度。结果DDTs对唐鱼仔鱼为剧毒物质,24、48h的LC50分别为0.243、0.049mg/L,其安全质量浓度为0.040mg/L。结论唐鱼对DDTs敏感,可以作为一种较理想的环境污染指示生物。
- 杨志聪姚静方展强
- 关键词：唐鱼急性毒性
- 利用唐鱼卵黄蛋白原作为生物标志物检测环境内分泌干扰物的研究
- 环境内分泌干扰物(EDCs)对人类和野生动物的有害效应已经引起了人们的广泛关注。近年来，包括实验室内及野外实验的结果都表明，检测水生动物体内卵黄蛋白原的诱导产生是筛选EDCs以及评价水生动物暴露于其中的潜在风险的有用工具...
- 姚静
- 关键词：唐鱼卵黄蛋白原酶联免疫吸附
- 文献传递
- 唐鱼卵黄脂磷蛋白的纯化鉴定与免疫原性分析被引量：9
- 2008年
- 采用Native-PAGE和SDS-PAGE方法从性成熟雌性唐鱼（Tanichthys albonubes）卵巢组织提纯了卵黄脂磷蛋白（Lv）．已确定被纯化的唐鱼Lv在Native-PAGE（4％～7．5％）电泳中分子量（Mr）为314×10^3．用纯化的唐鱼Lv免疫大白鼠获得鼠源多克隆抗血清．以Native-PAGE和SDS-PAGE制备的唐鱼Lv及裂解后的组分作为抗原所制备的抗血清，与经17β-雌二醇（E2）诱导的雄性唐鱼、去除卵巢的雌性唐鱼以及唐鱼卵巢的匀浆液能发生免疫反应，并且印迹位置与雌性特异蛋白卵黄蛋白原（Vtg）的位置相当．但是两种血清和未经E2诱导的雄鱼整体匀浆液并无反应，显示Lv及其大分子亚基的抗血清与Vtg和Lv两种蛋白足特异的．结果表明，唐鱼Lv裂解组分的抗血清可用于检测唐鱼的Vtg．
- 姚静方展强徐杰杨丽丽张灶桂唐家宁
- 关键词：唐鱼纯化免疫分析
- 多氯联苯对孔雀鱼卵黄蛋白原的诱导及检测被引量：16
- 2007年
- 为探讨利用孔雀鱼(Poecilia reticulata)卵黄蛋白原(Vitellogenin,Vtg)作为生物标志物检测环境雌激素的可行性,采用浸浴法分别使用17β-雌二醇(E2)和多氯联苯(PCBs)对雄性孔雀鱼成鱼进行染毒,30d后测定其性腺系数(GSI)和肝指数(LSI),并将鱼体整体匀浆进行常规聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)及磷、脂和糖蛋白特异染色分析.结果表明,PCBs对雄性孔雀鱼具有雌激素效应,和E2均可以诱导雄性孔雀鱼体内产生Vtg,但诱导组雄鱼GSI及LSI与对照组比较均无显著性差异(p>0.05).Native-PAGE及磷、脂、糖蛋白特异性分析表明,孔雀鱼Vtg是一种富含磷、脂、糖的蛋白,具有VtgⅠ、VtgⅡ和VtgⅢ等3种形式,其分子量分别为642kDa、541kDa和441kDa.雄性孔雀鱼Vtg可作为环境雌激素监测的有效生物标记物.
- 詹翠琼黄絮洁方展强马广智姚静
- 关键词：17Β-雌二醇多氯联苯卵黄蛋白原孔雀鱼
