周玉玲 作品数:31 被引量:81 H指数:6 供职机构: 湖北大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 文化科学 农业科学 环境科学与工程 更多>>
造纸用木聚糖酶的基因工程研究进展 被引量:3 2014年 木聚糖酶用于造纸行业可以显著改善纸浆的性能,减少纸张处理过程中有害化学试剂的使用,从而减轻环境污染,提高纸张品质,因此在造纸工业中具有广阔的应用前景。本文从造纸用碱性木聚糖酶基因的克隆、分子改造、高效表达及在造纸行业的应用研究等方面出发,对造纸用碱性木聚糖酶的研究现状进行综述,为开发造纸用木聚糖酶提供了思路。 卢毅弘 彭彦峰 周玉玲 张桂敏关键词:木聚糖酶 造纸 基因克隆 分子改造 普通小球藻对养殖污水脱氮除磷的效果研究 被引量:10 2017年 随着我国养殖业的不断发展,养殖污水排放量的日益增加,养殖污水的高氮、磷含量导致水体富营养化问题日趋严重。小球藻是光能自养生物,能有效同化氮、磷,使污水中的氮、磷减少。本研究通过在实验室模拟不同氮、磷含量的养殖污水环境,分析小球藻对氮、磷的去除效果;在此基础上,用小球藻处理某养殖场污水;并联合膨润土与小球藻,探究两者脱氮除磷的协同作用能力及膨润土对小球藻细胞沉降的效果。结果表明,小球藻对模拟污水的氨氮去除率可达80%,对磷酸根的最高去除率接近100%;对养殖污水中的氮、磷也有一定的去除效果;但养殖污水成分复杂,小球藻的生长被抑制。膨润土与小球藻的结合,能够提高污水中的氮磷去除率并帮助藻细胞快速沉降,为污水处理后藻细胞的收集处理提供了有效方法。 姜红鹰 周玉玲 张桂敏 蒋思婧关键词:普通小球藻 养殖污水 脱氮除磷 感受态还是芽胞?细胞命运决定的遗传调控网络 被引量:6 2015年 枯草芽胞杆菌作为一般认为安全(GRAS,Generally recognized as safe)菌株,被广泛应用于饲料、食品、生物防治等领域,同时,枯草芽胞杆菌作为表达宿主在工业酶的应用中扮演重要角色。然而,低效的芽胞形成率与感受态效率极大限制了枯草芽胞杆菌的应用潜力。尽管已有大量关于芽胞形成与感受态形成的分子遗传机制的研究报道,但是通过遗传改造提高枯草芽胞杆菌芽胞形成率与感受态效率的研究报道并不多。可能的原因是芽胞形成与感受态形成作为枯草芽胞杆菌生长后期两个主要的发育事件,受胞内复杂的遗传调控机制操纵,且两个遗传通路之间存在相互调控关系,对遗传改造工作形成挑战。随着基因工程与代谢工程研究的不断发展,积累了大量关于细胞生长、代谢与发育等方面的遗传信息,通过综合这些遗传信息构建细胞遗传调控网络,用于指导生产实践,已经成为当前研究的热点之一。基于此,本文简要概述了枯草芽胞杆菌芽胞形成和感受态形成的遗传通路,初步探讨了芽胞形成与感受态形成之间的遗传调控网络,及细胞在生长后期的遗传决定机制,并讨论了该遗传调控网络对枯草芽孢杆菌及其近缘种应用研究的指导作用。 卢争辉 周玉玲 张晓舟 张桂敏C端结构域截短提高苏云金芽孢杆菌来源几丁质酶的活力 被引量:1 2022年 【目的】尝试利用蛋白质结构域工程的手段优化苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis BMB 171)来源的几丁质酶BtChiA的酶活力,并对水解胶体几丁质的产物进行定性和定量分析。【方法】根据BtChiA的序列分析其结构域的组成,构建BtChiA及部分结构域缺失的突变体蛋白在大肠杆菌中的表达菌株并进行蛋白的表达纯化;利用HPLC分析几丁质酶水解产物的类型及含量。【结果】异源表达纯化获得了纯度90%以上,大小正确的BtChiA (全长蛋白)和BtChiA△50 (截短几丁质结合结构域CBD和纤连蛋白结构域FnⅢ)。BtChiA△50水解胶体几丁质的活力是BtChiA的1.64倍。两者水解胶体几丁质的产物均为几丁单糖GlcNAc和几丁二糖(GlcNAc)2,全长蛋白BtChiA的水解产物中(GlcNAc)2的含量是GlcNAc的0.97倍,BtChiA△50水解产物中(GlcNAc)2的含量是GlcNAc的1.79倍。【结论】利用蛋白质结构域工程构建了水解活性提高的BtChiA△50突变体、优化了水解产物的组成。 黎欣宇 邓旭 蒋思婧 周玉玲 欧阳玉茹 贺妮莎 张桂敏关键词:苏云金芽胞杆菌 几丁质酶 酶活力 大肠杆菌K12植酸酶热稳定性突变体在毕赤酵母中的高效表达和性质研究(英文) 2013年 植酸酶广泛用作工业饲料添加剂。通过基因优化和两步法基因合成了E.coli K12植酸酶的耐热突变体AppA NR,将其克隆到毕赤酵母表达载体pHBM905A上,然后将构建好的质粒转入毕赤酵母GS115中表达。经过筛选得到了一株高表达毕赤酵母工程菌GS115/AppA NR,产量达到10mg·mL-1,活力为980U·mL-1。该重组酶在95℃加热10min,仍保留90%的活力,相比野生型植酸酶,更能抵抗高温。同时,该酶具有较宽的pH值范围和抗胃酶水解的能力。所有这些性质的改善表明该重组酶比较适合用作工业饲料添加剂。 周玉玲 邹由 付玲 江维 战飞翔 康立新 马向东 马立新关键词:基因合成 酶特性 低温淀粉酶菌株分离及其酶学性质研究 被引量:2 2018年 通过淀粉底物平板从南极土壤中分离筛选出一株产淀粉酶的菌株,通过16S rDNA鉴定为氧化节杆菌(Arthrobacter oxydans)菌株.酶学性质表征发现该酶的最适温度为20℃,最适pH为9.0.摇瓶发酵2 d,酶的比酶活为15.7 U/mg.Ca^(2+)和Mg^(2+)对其有激活作用,而Hg^(2+)和Ni^(2+)是该酶的强力抑制剂.同时,该酶不但可以水解直链淀粉,还可以水解支链淀粉,表现出较宽泛的底物选择性.以上结果表明Arthrobacter oxydans产生的淀粉酶符合低温淀粉酶的特性,在食品上有一定的应用前景. 王翔 沈盼盼 周玉玲 张桂敏关键词:低温淀粉酶 酶学性质 λ噬菌体切除酶基因Xis在大肠杆菌中的可溶性融合表达 2016年 λ噬菌体切除酶Xis(excisionase)是调控λ噬菌体溶源裂解转换过程中的一种重要蛋白质.通过密码子优化及两步法将来自λ噬菌体切除酶基因Xis在体外合成,然后克隆到带有类泛素蛋白SUMO标签的定向原核表达载体SUMO-p ETG上,测序正确后,然后转化至E.coli BL21(DE3)细胞可溶性表达.经SDS-PAGE及质谱检测证实表达蛋白确实为目的蛋白.该研究通过融合表达λ噬菌体切除酶Xis不仅解除了Xis对E.coli宿主细胞的毒害作用,而且实现在E.coli中的高水平可溶性表达.因此,Xis的大量制备,将会促进Gateway克隆技术的广泛应用. 陈晚苹 周玉玲 马立新关键词:大肠杆菌 微生物学实验教学中设计性实验的教学探索 被引量:2 2017年 在现代高等教育中,兴起了创新教育发展模式和观念的教学改革浪潮。微生物学实验教学也进行了广泛、深入的探索,取得了一定的成绩,但也面临一些问题。本文就微生物学实验教学中设计性实验的教学探索展开论述,结合现代微生物学实验教学改革成果及本校开展的融入设计性实验的实践所获得的经验,进行一定程度的总结。望对微生物实验教学的改革探索和有效开展具有借鉴意义。 王亚平 蒋思婧 周玉玲关键词:微生物学 微生物学实验 设计性实验 去泛素化酶7与髓样分化因子88蛋白相互作用的研究 被引量:1 2013年 Toll-like受体(TLRs)介导的信号途径不仅参与机体识别病原微生物入侵、诱导免疫应答,而且还可诱导机体产生破坏性炎症反应.通过免疫共沉淀、免疫荧光共定位、间接免疫荧光等实验方法鉴定去泛素化酶7(USP7)和TLR信号途径中重要接头蛋白——髓样分化因子88(MyD88)的相互作用,结果表明USP7和MyD88可在细胞质中共定位并可发生相互作用.该研究对阐释TLR信号通路的机制奠定了重要的基础. 战飞翔 常静 马立新 周玉玲关键词:MYD88 蛋白相互作用 消毒型洗衣液对淀粉酶、纤维素酶酶活影响的研究 被引量:1 2017年 衣物上常见的淀粉类污垢有巧克力、土豆泥、面条、粥等,加入淀粉酶的洗衣液对去除这类污垢效果良好;另外织物表面因多次洗涤而在主纤维上出现微毛和小绒球,纤维素酶可将主纤维上的微毛和绒球除去,从而使主纤维变得光滑柔软,并具有增白效果.本实验选取革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的两种代表菌(藤黄八叠球菌和大肠杆菌),通过牛津杯法测定消毒型洗衣液对上述两种菌的抑菌效果.结果显示,该消毒型洗衣液对藤黄八叠球菌(革兰氏阳性菌)有抑菌效果,而对大肠杆菌(革兰氏阴性菌)无抑菌作用.同时,以中温淀粉酶和中温纤维素酶样品作为研究对象,通过DNS法测定加入洗衣液前后相应酶的活力,结果显示加入1%洗衣液后淀粉酶的活力降低32.8%,纤维素酶的活力降低5.4%,这说明消毒型洗衣液中的成分对上述两种酶的活力有一定的影响,从而影响酶在洗涤方面的应用. 汪声晨 周玉玲 张桂敏关键词:淀粉酶 纤维素酶 洗衣液 抑菌效果 酶活