刘晓梅
- 作品数：31 被引量：71H指数：4
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省教育厅科研基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- CBL应用于医学微生物理论教学的初步探索被引量：10
- 2014年
- 针对医学微生物学的课程特点,对五年制临床医学的部分学生采用CBL教学,并比较CBL与LBL的教学效果。结果表明,CBL组学生的表达能力、自主学习能力、创新思维能力、团队协作能力明显提高,可为医学微生物学教学改革提供借鉴。
- 尤红娟刘晓梅李小翠孙伟郑葵阳刘莹汤仁仙
- 关键词：CBL医学微生物学教学改革
- p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在缺血性脑损伤中的作用研究被引量：4
- 2014年
- 目的探讨p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在大鼠缺血性脑损伤中的作用。方法①制作大鼠全脑缺血模型,免疫印迹法检测假手术组、脑缺血复灌6 h、12 h、1 d、3 d组p-p38MAPK、p38MAPK蛋白表达。②免疫印迹法检测假手术组、缺血复灌组、溶剂对照组和SB203580组p-p38MAPK、p38MAPK、FasL、Fas和Caspase-3蛋白表达。结果①与假手术组相比,脑缺血再灌注6 h、12 h、1 d、3 d组p-p38MAPK蛋白表达水平逐渐升高,于1 d达高峰(P均<0.05)。②与缺血复灌组和溶剂对照组相比,SB203580组p-p38MAPK、FasL和Caspase-3表达水平显著降低(P均<0.05)。结论 p38MAPK介导的Fas/FasL凋亡通路在缺血性脑损伤中发挥了重要作用。
- 王晓天刘晓梅尤红娟李小翠秦苏萍汤仁仙郑葵阳
- 关键词：P38MAPKFASFASL凋亡
- 流体动力学法表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型的建立
- 2009年
- 目的建立表达乙肝病毒X蛋白的小鼠模型。方法实验动物分成模型组和对照组,模型组利用已构建的含有HBX基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-HBX,对照组以等量生理盐水代替,采用流体动力学法将质粒经尾静脉高压注入小鼠体内,24h后取小鼠肝组织,行免疫荧光、RT-PCR和Western blot法从不同水平检测HBX在小鼠肝组织内的表达情况。结果模型组小鼠RT-PCR显示肝组织内有HBX mRNA的存在,免疫荧光和Western blot检测均有HBX蛋白的表达;对照组小鼠则无HBX表达。结论成功建立了表达乙肝病毒X蛋白小鼠模型,为进一步探讨HBX蛋白在动物体内的生物学作用提供实验基础。
- 胡安康范宝峰朱孝荣汤仁仙郑葵阳刘晓梅
- 关键词：小鼠肝组织
- 炎症与趋化因子IL-6／MIP-2在癫痫小鼠海马的表达变化被引量：2
- 2014年
- 目的观察炎症因子白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-2（mac—rophage inflammatory protein-2，MIP-2）在海人藻酸（kainie acid，KA）致痫模型小鼠海马的表达变化。方法雄性C57／B6小鼠48只，随机分为生理盐水对照组和KA致痫组，KA致痫组再根据KA注射后3、6、12、24、72h各时间点分为5个亚组。观察KA注射后小鼠的痫性发作情况，并采用Real—timePCR检测在KA注射后不同时间点小鼠海马IL-6和MIP-2的mRNA丰度变化，运用免疫组化法观察IL-6和MIP-2在海马的蛋白表达改变。结果与对照组比较，致痫模型组小鼠海马IL-6和MIP-2的mRNA水平在KA刺激3h明显升高（P〈0．05），24h达到高峰（P〈0．01），72h开始降低；与对照组相比，KA刺激24h，海马CA3区IL-6和MIP-2的蛋白表达显著升高。结论癫痫小鼠海马炎症因子和趋化因子表达水平升高，引发中枢炎症反应，可能成为癫痫发病的重要机制之-。
- 李小翠刘晓梅张清秀王晓天尤红娟汤仁仙郑葵阳
- 关键词：巨噬细胞炎性蛋白-2海人藻酸癫痫
- MLK3信号通路在癫痫及脑缺血海马CA3区神经元中的不同作用被引量：1
- 2014年
- 目的:研究混合性谱系激酶3(MLK3)信号通路对癫痫及脑缺血海马CA3区神经元的作用。方法 :采用海人藻酸(KA)或四动脉结扎法分别建立大鼠癫痫及全脑缺血模型,运用免疫印迹技术检测在KA注射后及脑缺血再灌注后不同时间海马CA3区MLK3和c-Jun的N端激酶(JNK)的活化水平;采用焦油紫染色,观察大鼠海马CA3区神经元的损伤。结果:KA刺激6 h,癫痫大鼠海马CA3区MLK3和JNK明显激活,1 d后仍维持在较高水平(P<0.05);MLK3和JNK的总蛋白表达并无显著改变。脑缺血大鼠海马CA3区,缺血再灌注后各时间点,MLK3和JNK并未出现明显的活化。此外,大鼠致痫后7 d,海马CA3区神经元大量死亡;缺血再灌注后7 d,海马CA3区神经元并未受到明显损伤。结论:MLK3/JNK信号通路参与了癫痫脑损伤海马CA3区神经元的损伤;但并未介导缺血性脑损伤海马CA3区神经元的存活。
- 李小翠王晓天张清秀尤红娟周峰汤仁仙郑葵阳刘晓梅
- 关键词：癫痫脑缺血再灌注海马CA3区JNK
- 小鼠脑内星形胶质细胞体外培养方法的优化被引量：1
- 2012年
- 目的:优化小鼠脑内星形胶质细胞的体外培养方法,为星形胶质细胞的功能研究奠定实验基础。方法:取新生0～1 d的C57BL/6乳鼠大脑皮质,胰酶消化结合机械吹打方法,分离皮质细胞,制成细胞悬液并差速贴壁处理,待细胞接种24 h轻柔换液,以后每隔2～3 d换液,且每次换液前手动振荡洗涤2次,传代3次后,行胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫细胞化学染色及免疫荧光染色鉴定。结果:经过原代及传代培养,获得形态典型、纯度在95%以上的星形胶质细胞。结论:优化后的体外培养星形胶质细胞方法,稳定有效,操作简便易行,并可获得高纯度的星形胶质细胞。
- 刘晓梅赵聃庞蓉蓉单锴李妍王迎伟
- 关键词：星形胶质细胞小鼠细胞培养胶质纤维酸性蛋白
- HL7702-HBX与HepG2-HBX细胞株的建立及鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的建立稳定、高效的HBx蛋白体外表达细胞株,以便进一步研究HBX基因和HBx蛋白的致癌作用及机理。方法建立HBX真核表达载体pcDNA3.1-HBX,通过脂质体介导将pcDNA3.1-HBX转染到人正常肝细胞株HL7702及人肝肿瘤细胞株HepG2中。结果 RT-PCR、蛋白质印迹及免疫荧光的实验结果显示,HBX基因在人正常肝细胞株HL7702及人肝肿瘤细胞株HepG2中得到了表达。结论成功构建了表达HBx蛋白的HL7702-HBX与HepG2-HBX细胞株,为进一步研究HBX基因和HBx蛋白的致癌作用及机制奠定了实验基础。
- 尤红娟裴冬生刘晓梅汤仁仙
- 关键词：HBX细胞株基因表达
- 应用RNA干扰抑制乙肝病毒X基因促HepG2细胞凋亡的作用被引量：2
- 2009年
- 目的:构建靶向乙肝病毒X基因(HBX)的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并应用其体外抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用。方法:设计并构建靶向HBX的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,脂质体转染法将HBX表达载体pcDNA3.1-HBX与pSilencer3.1-shHBX共转染人肝癌HepG2细胞,培养72小时后,分别以RT-PCR、Western blot和免疫荧光检测HBX的表达量。Annexin V-FITC/PI双染经流式细胞仪检测细胞的凋亡变化。结果:重组质粒pSilencer3.1-shHBX酶切鉴定和测序结果均与设计的一致。该质粒使HBX基因mRNA表达量降低了47.1%,进而使HBx蛋白表达量降低了58.9%,HBx蛋白荧光强度减弱,并使HBX诱导的HepG2细胞凋亡率降低了52.11%。而阴性对照质粒无此作用。结论:成功构建靶向HBXshRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并可应用其抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用。
- 范宝峰刘晓梅甘宜敏史震汤仁仙郑葵阳
- 关键词：HBXRNA干扰凋亡HEPG2
- 普乐可复防治大鼠抗肾小球基底膜肾炎的实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的 :观察普乐可复 (FK5 0 6 )防治大鼠抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的疗效。方法 :复制大鼠抗GBM肾炎模型。实验分 3组 :肾炎 +FK5 0 6组、肾炎对照组及正常对照组。大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后 6h内皮下注射FK5 0 6注射液 (0 5mg·kg-1·d-1) ,至第 2 1d。对照组则给予等量的生理盐水。定期于第 4d、第 14d和第2 1d ,检测大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平 ,观察肾组织病理学改变 ,以及检测T淋巴细胞转化功能。结果 :肾炎对照组大鼠注射抗血清后于第 4d即出现异常蛋白尿 ,血清肌酐和尿素氮亦持续上升 ;肾小球内可见细胞数增加和新月体形成 ,肾小管内大量蛋白管型 ,GBM呈不规则增厚 ,足突大片融合 ;T淋巴细胞转化功能异常。而肾炎 +FK5 0 6组大鼠上述病变均明显较轻。结论 :FK5 0 6能够明显改善大鼠抗GBM肾炎的肾功能。
- 汤仁仙王迎伟黄瑞高丰光刘晓梅
- 关键词：普乐可复抗肾小球基底膜肾炎
- 抗肺炎衣原体42kDa蛋白种特异性单抗的制备及应用被引量：1
- 2002年
- 目的 制备肺炎衣原体 (Cpn) 4 2kDa蛋白单克隆抗体并了解其在Cpn感染诊断中的应用价值。方法 采用纯化的Cpn 42kDa蛋白带制备出 2株特异性抗Cpn 42kDa蛋白单克隆抗体 ,用其中一株建立了检测Cpn的直接免疫荧光法 (DFA)。结果 2株能稳定分泌抗Cpn单抗的杂交瘤细胞株Ad6、Db1 均为IgG1 ,染色体数目为 90～ 1 0 2条 ,效价分别为 1∶32 768、1∶1 6 384(微量免疫荧光法 ,Micro -IFA)。将腹水 1∶1 0 0稀释 ,该单抗只与Cpn呈现阳性反应 ,与其他衣原体和呼吸道病原菌均无交叉反应。Westernblot证实单抗结合Cpn蛋白的分子量为 42kDa,且不与其他衣原体反应。建立的DFA对 1 2 0名呼吸道感染者的咽拭子、肺泡灌洗液、痰检测 ,其结果和PCR试剂盒检测结果经统计学处理 ,二者相关系数为 0 .9667,符合临床检测要求。结论 DFA灵敏、准确 ,可用于Cpn的检测。
- 王慧刘晓梅宁波张官萍周峰简洁
- 关键词：肺炎衣原体杂交瘤微量免疫荧光法直接免疫荧光法
