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体外头孢曲松对人肾小管上皮细胞凋亡基因的影响: 2015年; 目的探讨头孢曲松对人肾小管上皮细胞凋亡基因的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞,以不同浓度头孢曲松刺激后,倒置显微镜观察人肾小管上皮细胞形态,荧光定量PCR法检测不同浓度头孢曲松作用下人肾小管上皮细胞中凋亡相关基因p53、bcl-2及c-Myc的相对表达量。结果以不同浓度的头孢曲松(0、20、40、80 mg/L)体外刺激人肾小管上皮细胞,光镜下细胞形态未见明显改变。p53、c-Myc和bcl-2三个基因相对表达量在不同浓度头孢曲松的组间差异有统计学意义(P均<0.01)。与另外三组相比,80 mg/L组p53及c-Myc基因相对表达量升高,bcl-2基因相对表达量降低,差异有统计学意义(P均<0.01);而0、20、40 mg/L三组间3个基因相对表达量的差异无统计学意义(P均>0.05)。结论头孢曲松在较高血药浓度下导致人肾小管上皮细胞促凋亡基因的表达增加,抑制凋亡基因的表达降低,这可能是临床头孢曲松引起肾损伤的机制之一。; 何燕芳刘新荣张爱青施会敏甘卫华; 关键词：头孢曲松肾小管上皮细胞凋亡

精子的表观遗传学与胚胎发育关系的研究进展被引量：2: 2014年; 表观遗传学是研究DNA序列未发生变化但表型发生可遗传改变的一门学科。精子在其发生和受精过程中表观遗传信息都发生了较大变化,而这些改变将直接影响受精后的胚胎发育,因此研究精子的表观遗传学与胚胎发育有重要的意义。本文从精子的DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA调控和基因印记4个方面对精子的表观遗传学改变及其对胚胎发育的影响作简要探讨。; 何燕芳马洁桦潘连军黄宇烽; 关键词：精子表观遗传学胚胎发育

转化生长因子β诱导肾小球系膜细胞增生中的长链非编码RNA差异表达研究被引量：8: 2015年; 目的检测长链非编码RNA（lncRNA）在转化生长因子β（TGF—β）诱导的肾小球系膜细胞增生中的改变，探讨lncRNA在系膜增生性肾小球肾炎发病中的作用。方法用TGF—β刺激建立系膜细胞增生模型。采用细胞增殖实验筛选TGF-β诱导肾小球系膜细胞增生的最佳浓度；用芯片技术筛选TGF-β刺激组与对照组有差异表达的lncRNAs；采用生物信息学分析法分析lncRNAs芯片结果，用RT-PCR法验证差异表达的lncRNAs，再根据生物信息学分析结果推测靶基因，用RT-PCR法验证。结果细胞增殖实验结果显示，10ng／mlTGF-β为刺激细胞增殖最佳浓度。芯片筛选结果显示，TGF—β刺激组和对照组约30000多个lncRNAs表达，TGF—β刺激组有5550个lncRNAs差异表达于对照组，其中119个和147个lncRNAs上调或下调超过2倍。根据lncRNA筛选原则选取部分lncRNAs用RT—PCR法验证。结果提示：与对照组相比，TGF—β刺激组细胞uc．60、MRAK079149、MRAK029456、XR_005507、XR_007641、UC_14和uc．412的表达明显上调；BC088254、DQ402472、BC098733、BC158832、BC098746表达明显下调，与芯片检测结果一致。生物信息学分析结果显示uc．412和MRAK079149的下游靶基因分别为抗凋亡转录因子（AATF）和NimA相关激酶8（NeK8），RT—PCR验证结果提示：与对照组比较，TGF—β刺激组AATF和NEK的表达显著上调（P〈0．05）。结论体外TGF—β诱导的系膜细胞增生模型中存在lncRNAs的差异表达。; 张爱青何燕芳王彬施会敏甘卫华; 关键词：肾小球系膜细胞增生转化生长因子Β 长链非编码RNA

体外醛固酮对大鼠肾小管上皮细胞凋亡基因的影响: 2014年; 目的探讨体外醛固酮(ALD)对大鼠肾小管上皮细胞凋亡基因的影响。方法体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E。台盼兰染色法检测ALD浓度为10-7、10-6、10-5、10-4和10-3mol/L对NRK-52E细胞的毒性。采用流式细胞术检测ALD浓度为10-6 mol/L(ALD组)和正常对照组细胞凋亡率;RT-PCR检测两组凋亡相关基因p53、Bcl-2和C-myc mRNA表达。结果 ALD浓度为10-7、10-6和10-5 mol/L对NRK-52E细胞均无明显毒性作用。ALD组细胞凋亡率高于正常对照组[(63.72±2.50)%vs.(51.52±4.30)%](P<0.05);与正常对照组比较,ALD组(10-6 mol/L)p53mRNA和C-myc mRNA水平升高,而Bcl-2mRNA水平下降(P<0.05)。结论 ALD可能通过上调p53、C-myc基因表达和下调Bcl-2基因表达诱导肾小管上皮细胞凋亡。; 何燕芳施会敏张俊张爱青甘卫华; 关键词：醛固酮肾小管上皮细胞细胞凋亡

体外醛固酮对大鼠系膜细胞凋亡基因的影响被引量：4: 2015年; 目的醛固酮是慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)中引起肾损伤的重要因素,但其具体机制尚不明确。文中通过体外研究醛固酮对大鼠系膜细胞凋亡及相关基因P53、Bcl-2、C-myc表达的影响,探讨醛固酮参与肾损伤的可能机制。方法体外培养大鼠系膜细胞,应用锥虫蓝拒染法检测不同浓度醛固酮(10-7、10-6、10-5、10-4、10-3mol/L)对系膜细胞的毒性作用,实验分为对照组、醛固酮组(培养液+10-6mol/L醛固酮);倒置显微镜观察醛固酮对系膜细胞形态的影响;应用Annexin V/PI双染流式细胞术检测醛固酮对大鼠系膜细胞凋亡的作用;应用荧光定量PCR方法检测醛固酮对系膜细胞凋亡相关基因P53、Bcl-2、C-myc表达的影响。结果倒置显微镜下:醛固酮组刺激系膜细胞形态未见明显变化;流式细胞仪检测凋亡结果显示:醛固酮组细胞凋亡率[(68.62±1.77)%]较对照组[(32.87±4.98)%]明显升高(P<0.05);荧光定量PCR结果显示:与对照组相比,醛固酮组P53基因相对表达量明显上升(1.00±0.09 vs 2.82±0.35,P<0.05),C-myc基因相对表达量也明显上升(1.00±0.12 vs 1.85±0.35,P<0.05),而Bcl-2基因相对表达量则显著下降(1.00±0.24 vs 0.11±0.01,P<0.05)。结论醛固酮可能通过上调P53基因及C-myc基因的表达,并下调Bcl-2基因的表达诱导系膜细胞凋亡,提示系膜细胞凋亡增加可能是醛固酮引起的肾损伤的机制之一。; 施会敏张俊何燕芳张爱青甘卫华; 关键词：醛固酮系膜细胞凋亡

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何燕芳

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