黎玉梅
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用噬菌体展示技术制备高致病性禽流感病毒（HPAIV）的单链抗体（ScFv）
- H5N1亚型禽流感具有巨大的公共卫生威胁性，目前已有200多人感染该病毒，其中50﹪以上患者死亡。研发针对H5N1亚型禽流感病毒的治疗制剂是禽流感大流行防控计划的重点。本研究旨在构建可与H5亚型高致病性禽流感病毒特异性结...
- 黎玉梅
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型噬菌体展示技术单链抗体高致病性禽流感病毒
- 文献传递
- H5亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆及表达被引量：1
- 2007年
- 研究以RT-PCR方法从H5N1亚型禽流感病毒A/DKZJ/12/00(H5N1)中获得禽流感病毒HA部分基因,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-32a,将测序和酶切验证正确的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达。结果表明该蛋白得到了可溶性的表达,表达蛋白的分子质量为25ku;Western-blot分析结果表明,该蛋白可以与禽流感H5阳性血清反应(禽流感的单克隆抗体所识别),检测HA的抗体时具有良好的免疫原性。
- 黎玉梅邓国华冉多良熊蕊陈化兰
- 关键词：禽流感病毒HA基因原核表达诊断抗原
- H5亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备和鉴定
- 2007年
- 采用高致病性禽流感病毒(HPAIV)H5N1亚型A/Duck/Zhenjiang/11/00(DZJ/1100)毒株作为免疫原,免疫8周龄BALB/C雌性小鼠,三次加强免疫后取脾细胞与SP2/0细胞融合,用表达的重组核蛋白(NP)包被ELISA的方法检测筛选,阳性细胞克隆经有限稀释法克隆培养,最后获得H5亚型特异性的单克隆抗体,抗体亚类检测结果表明该抗体亚类为IgG1型k链抗体。ELISA以及免疫荧光检测表明该抗体有良好的特异性。
- 黎玉梅邓国华冉多良熊蕊陈化兰
- 关键词：H5亚型禽流感单克隆抗体ELISAIFA
- H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的表达及纯化被引量：3
- 2007年
- 用RT-PCR方法从H5N1亚型禽流感病毒(AIV)A/Duck/Zhejiang/12/00中获得NA基因,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-32a中,将序列测定和双酶切验证准确的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导,经SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,重组蛋白得到了可溶性表达,表达的蛋白质分子质量为33 ku;该蛋白可以与禽流感H5N1亚型阳性血清反应,具有良好的免疫原性;ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性。
- 黎玉梅邓国华熊蕊冉多良陈化兰
- 关键词：禽流感病毒NA基因克隆原核表达
- H5亚型禽流感病毒HA基因杆状病毒载体的构建被引量：4
- 2007年
- 经过PCR反应,以特异性引物扩增了禽流感病毒DK/Zhejiang/11/00(H5N1)去除信号肽的HA基因,克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-HTA中,阳性重组质粒转座DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选、PCR鉴定获得阳性克隆,碱裂解法提取阳性质粒,转染sf 9昆虫细胞,获得含H5亚型禽流感病毒HA基因的重组杆状病毒H5HA-Bac HTA。利用SDS-蛋白酶K方法提取重组病毒DNA,PCR反应证实HA基因片段已重组到杆状病毒基因组中。以适宜剂量的重组杆状病毒接种sf 9昆虫细胞,待绝大部分细胞产生细胞病变后收获细胞。细胞裂解产物经间接免疫荧光、SDS-PAGE及Western-Blot试验检测,结果表明:H5亚型禽流感病毒HA基因在重组杆状病毒H5HA-Bac-HTA感染sf 9细胞后获得高效表达,且具有良好的蛋白活性及特异免疫反应原性。
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- 关键词：H5HA基因重组杆状病毒
- 重组核蛋白检测鸭血清禽流感抗体间接ELISA方法的建立
- 本实验利用禽流感重组核蛋白作为包被抗原,建立了检测鸭血清禽流感抗体的间接ELISA方法,通过对各个工作组份反应条件的优化,确定的最佳工作条件为:包被抗原1∶300稀释(蛋白含量为8μg/mL);待检血清1∶200稀释;酶...
- 邓国华曲站红熊蕊黎玉梅田国彬陈化兰
- 关键词：禽流感间接ELISA抗体检测血清
- 文献传递
- H5亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及在原核细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 以RT-PCR方法从H5N1亚型禽流感病毒A/DKZJ/12/00(H5N1)中获得禽流感病毒NS1的部分基因,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-32a,将测序和酶切验证正确的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,蛋白质电泳表明该蛋白得到了可溶性的表达,表达蛋白的分子量27 kD;Western-blot分析表明,该蛋白可以与禽流感H5阳性血清反应,具有良好的免疫原性。
- 冉多良黎玉梅熊蕊
- 关键词：禽流感病毒融合蛋白原核表达
