黄文强
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金江苏省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 应用TaqMan荧光定量PCR检测H3N8亚型马流感病毒被引量：5
- 2009年
- 为建立马流感病毒(EIV)的检测方法,本试验针对H3N8亚型EIV血凝素(HA)基因高度保守序列设计并合成了2对引物和1条TaqMan荧光探针,建立了TaqMan荧光定量PCR方法。经用TaqMan荧光定量PCR、RT-PCR和病毒分离方法分别检测新疆等省135份疑似EIV马鼻拭子样品,其结果表明:3种方法的马流感检出率分别为54.07%、37.78%、0.89%;TaqMan荧光定量PCR可检出马流感病毒基因组RNA的灵敏度可达10拷贝/反应,而且与其他马呼吸道病毒均无交叉反应,具有良好的特异性、敏感性和重复性。该方法为H3N8亚型马流感的早期诊断及分子流行病学调查等提供了一种新的快速、准确的定量检测技术。
- 戴伶俐郭巍李雪峰黄文强赵立平阿依吐拉.肉孜相文华
- 关键词：TAQMAN探针荧光定量PCRH3N8亚型马流感病毒
- 湖北株H3N8亚型马流感病毒HA基因的序列测定及其HA蛋白遗传特性分析被引量：3
- 2010年
- 2008年从湖北省分离到1株H3N8亚型马流感病毒A/equine/Hubei/6/08。以2002年美国KENTUKY株为模板设计HA基因测序引物,进行RT-PCR,然后测定该分离株的HA基因核苷酸序列。经NCBI上Blast同源性比较发现,与A/equine/Newmarket/5/2003(H3N8)同源性较高为98.7%。HA蛋白遗传进化分析表明该毒株隶属于H3N8亚型马流感病毒中的美洲系福罗里达亚系。该株与OIE现在推荐的疫苗候选株A/equine/Kentuck-y/5/2002(H3N8)HA1蛋白氨基酸序列比对发现有3处氨基酸替换位点;与OIE以往推荐的疫苗候选株A/e-quine/Kentucky/1/1994(H3N8)比对发现有11处氨基酸替换位点。研究结果表明该分离株可作为中国研制马流感疫苗的候选株。
- 黄文强郭巍赵立平盛名巍王宇李红梅相文华
- 关键词：H3N8亚型马流感病毒HA基因
- 抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途
- 本发明公开了抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途。本发明分泌抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株的微生物保藏号是CGMCC No.3543。通过EL1SA和Western-blot方法鉴定证明：本发明单...
- 郭巍相文华才琳赵立平闫妍黄文强
- 文献传递
- 抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途
- 本发明公开了抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途。本发明分泌抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株的微生物保藏号是CGMCC No.3543。通过EL1SA和Western-blot方法鉴定证明：本发明单...
- 郭巍相文华才琳赵立平闫妍黄文强
- H3N8型马流感血凝素核酸疫苗的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的研发一种具有良好免疫原性的H3N8型马流感血凝素(hemagglutinin,HA)核酸疫苗。方法根据马A型流感病毒A/Equine/Xinjiang/3/08(H3N8)的HA蛋白序列,经密码子优化后化学合成能够表达相应蛋白的基因片段,并将该片段克隆到核酸疫苗载体pJW4303中,构建带有天然信号肽的H3HA核酸疫苗,命名为H3HA/XJ3-08-wt;进一步对HA基因进行修饰,以人组织纤维蛋白酶原激活剂(human tissue plasminogen activator,tPA)取代H3HA天然信号肽,命名为H3HA/XJ3-08-tPA,或切除部分HA的基因片段使之只表达HA蛋白的胞外域,命名为H3HA/XJ3-08-dTM。用这3种重组质粒分别转染293T细胞,蛋白表达经蛋白质印迹检测得到确认。采用电转录法免疫新西兰白兔。ELISA方法检测免疫后兔血清中抗H3HA抗体滴度,血凝抑制实验(hemagglutination inhibition,HI)检测保护性抗体水平。结果 3种H3HA核酸疫苗均可在293T细胞中高效表达,并能够在新西兰白兔体内诱导产生特异性抗H3HA抗体,HI检测到不同水平的保护性抗体。其中以H3HA/XJ3-08-tPA的免疫原性最强。结论新构建的H3N8型马流感血凝素核酸疫苗具有良好的免疫原性,为此类疫苗的进一步研发奠定了基础。
- 许莹郭巍王世霞黄文强张璐卢山周建华相文华黄祖瑚
- 关键词：血凝素类
