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体外D3小鼠胚胎干细胞向内皮细胞分化的研究: 2011年; 目的复制体外胚胎干细胞(ESCs)向内皮细胞分化的模型,明确ESCs向内皮细胞分化的进程,确定细胞移植的最佳时间点。方法在含有血管内皮生长因子165、碱性成纤维细胞生长因子的诱导分化培养基中,体外诱导小鼠ESCs向内皮细胞分化,在分化的第3、6、9、12天检测内皮细胞特异标志物血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)和血管性假血友病因子(vWF),并观察分化过程中细胞形态及生长方式改变。结果细胞分化第6天,部分细胞爬出细胞集落,增大并呈单层生长方式生长;第9天表达VEGFR-2及vWF;第12天细胞内空泡形成、胞体碎裂,细胞衰老。结论在本实验条件下,分化第9天的细胞分化完成、状态良好,适合血管损伤疾病的细胞移植治疗。; 马玲卢晓梅金玉楠魏文娟于艳秋; 关键词：胚胎干细胞内皮细胞血管内皮生长因子受体-2 血管性假血友病因子

组织块贴壁法提取胎盘、脐带和胎膜间充质干细胞效果观察被引量：6: 2011年; 目的为临床移植组织工程等提供足够数量的种子细胞。方法利用组织块种植贴壁培养法提取胎盘、脐带和胎膜原代间充质干细胞,观察细胞形态、最早爬出时间,计算提取成功率及鹅卵石样细胞集落比例;MTT法检测传代前和传代后细胞生长曲线。结果原代培养细胞形态呈长梭形和卵圆形,传代后为均一长梭形;胎膜来源细胞最早爬出,胎盘次之,脐带最晚,且脐带来源原代提取成功率较低、鹅卵石样细胞集落比例大。生长曲线表明传代初细胞处于缓慢增殖期,胎膜来源细胞生长较为迅速,P5代时三种来源细胞进入对数增长期,增殖均旺盛。结论组织块种植贴壁培养法可成功提取间充质干细胞;提取的干细胞传代培养后细胞形态单一,增殖旺盛,可为临床移植组织工程等提供足够数量的种子细胞。; 马海英李丽马玲魏文娟金玉楠卢晓梅杜莉莉于艳秋; 关键词：间充质干细胞胎盘脐带胎膜细胞培养

丹参及其三种单体成分体外诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化的实验研究: 目的:心血管疾病是目前威胁人类健康的主要疾病之一,各种病因导致的心肌细胞因缺血、缺氧而凋亡、坏死、纤维化,进而数量减少,最终心泵功能下降是导致患者死亡的主要原因。随着人类对干细胞认识的不断深入,利用于细胞的增殖分化潜能,...; 魏文娟; 关键词：丹参素丹酚酸胚胎干细胞心肌细胞分化; 文献传递

MT1-MMP基因敲除细胞的诱导多能干细胞系的构建: 2011年; 目的:观察野生型鼠和膜1型基质金属蛋白酶(MT1-MMP)基因敲除鼠的成纤维细胞重新编程为诱导多能干细胞(iPSCs)后,其细胞特性是否具有胚胎干细胞(ESCs)相似的潜能。方法:利用逆转录病毒介导Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4四种基因,转染到野生型鼠和MT1-MMP基因敲除鼠的成纤维细胞中。iPSCs克隆形成后,用免疫细胞化学检测ESCs特异性标志的表达情况。体外将iPSCs通过"悬滴法"向内皮细胞和心肌细胞分化,以检测其分化能力。结果:转染野生型鼠和MT1-MMP基因敲除鼠的成纤维细胞2周后,可见ESCs样克隆开始形成。iPSCs明显表达ESCs特异性标志物碱性磷酸酶(AP)、阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)和八聚体结合转录因子3/4(OCT3/4)。诱导分化的内皮细胞表达早期内皮标志物Flk-1/KDR;诱导分化的心肌细胞出现跳动,表达心肌标志物肌钙蛋白I。结论:野生型鼠和MT1-MMP基因敲除鼠的成纤维细胞可被重新编程为iPSCs,iP-SCs具有ESCs的特征及增殖分化能力,因此可能为再生医学的研究和临床上进行细胞移植治疗提供理想的种子细胞来源。; 王彦霞马玲马海英魏文娟卢晓梅金玉楠于艳秋; 关键词：胚胎干细胞诱导多能干细胞

HIF-1α在间充质干细胞向内皮细胞分化中的作用: 目的:探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化中的作用。方法:构建pHIF-1α/EGFP-C2质粒,应用RT-PCR法、...; 马玲李丽金玉楠马海英魏文娟卢晓梅杜莉莉于艳秋

pHIF-1α/EGFP-C2质粒的构建与鉴定: 2011年; 目的构建pHIF-1α/EGFP-C2真核细胞表达质粒载体。方法缺氧培养与化学性缺氧两种方法诱导A498人肾癌细胞中HIF-αmRNA水平升高。RT-PCR法扩增HIF-1α的cDNA片段,经T-A克隆扩增后,连接入pEGFP-C2质粒。结果缺氧培养的A498人肾癌细胞组出现HIF-1α的cDNA扩增条带,DNA测序结果Genebank所公布的HIF-1α序列(NM001530)相同,无突变和移码。转染pHIF-1α/EGFP-C2的细胞中检测到HIF-1α蛋白的表达。结论 pHIF-1α/EGFP-C2真核细胞表达质粒构建成功。; 马玲卢晓梅金玉楠魏文娟马海英于艳秋; 关键词：缺氧诱导因子-1 绿色荧光蛋白质粒构建肾癌细胞

干细胞临床扩增的一种最佳添加剂: ＜正＞目的:本研究对比了不同血型脐血清和胎牛血清培养人胎盘来源的间充质干细胞（hPDMSCs）中的应用。方法:用含不同添加剂的培养基（10%FBS,10%A-CBS,10%B-CBS,10%O-CBS和10%AB-CBS...; 马海英李丽马玲魏文娟于艳秋; 文献传递

人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化潜能的研究被引量：2: 2010年; 目的:探讨人胎盘来源的间充质干细胞(placenta derived mesenchymal stem cells,PDMSCs)在体外分化为血管内皮细胞的潜能。方法:利用组织块种植法体外分离培养PDMSCs,流式细胞术鉴定其表面抗原,应用含50μg/LVEGF和10μg/L bFGF的诱导分化液定向诱导PDMSCs向内皮细胞分化。免疫细胞化学检测分化过程中不同时点内皮特异性标志的表达变化。透射电镜和体外血管生成实验分别检测内皮特异性结构和内皮细胞功能。结果:PDMSCs表面抗原CD105和CD166阳性,CD31、CD34和CD45阴性。诱导分化的内皮细胞形态呈鹅卵石样,早期内皮标志Flk-1/KDR在4d表达最强;成熟的内皮标志CD31、vWF、CD144/VE-cadherin在内皮细胞分化过程中呈现时间依赖性表达(0d、4d、8d和12d)。透射电镜下可见内皮特异性结构:Weibel-Palade小体。细胞接种在细胞外基质凝胶中可形成毛细血管样结构。结论:胎盘中可分离出大量PDMSCs,并且PDMSCs在体外可分化为具有功能特性的内皮细胞,因此胎盘组织可能成为血管组织工程和再生医学的理想种子细胞来源。; 李丽马海英马玲杜莉莉卢晓梅金玉楠魏文娟王彦霞于艳秋; 关键词：间充质干细胞血管内皮细胞胎盘细胞分化

丹参在胚胎干细胞向心肌细胞分化中的作用被引量：1: 2010年; 魏文娟马玲马海英金玉楠于艳秋; 关键词：胚胎干细胞肌细胞分化拟胚体丹酚酸流式细胞分析法辅肌动蛋白

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魏文娟