马坤
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：安徽大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 炭疽芽胞杆菌BslA_((260-652))蛋白的表达纯化与黏附功能鉴定被引量：1
- 2012年
- 【目的】克隆表达炭疽芽胞杆菌BlsA的功能区片段并对其生物学功能进行鉴定。【方法】以炭疽芽胞杆菌A16R基因组DNA为模板PCR扩增bslA(260-652)基因片段,克隆至pET-28a(+)载体。将成功构建的重组质粒转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,诱导表达后收集菌体经超声破碎后,对可溶表达部分用镍柱进行亲和层析纯化。以纯化后的蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠制备该蛋白的多抗,用ELISA和Western blot检测抗血清;使用间接免疫荧光实验和细菌黏附实验研究目标蛋白及其抗体的生物学功能。【结果】BslA(260-652)获得了可溶性表达,纯化后纯度约为87.4%。以纯化蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠制备的抗血清ELISA效价可达1∶20000。将BslA(260-652)蛋白与Hela细胞共孵育后,能够直接和Hela的细胞膜结合。细菌黏附实验表明BslA(260-652)蛋白及其相应的多抗血清都能够显著地抑制炭疽芽胞杆菌A16R对Hela细胞的黏附。【结论】大肠杆菌表达得到的炭疽芽胞杆菌BslA(260-652)蛋白具有与天然蛋白相似的生物活性,为深入研究BslA蛋白在炭疽芽胞杆菌致病过程中的作用奠定实验基础。
- 马坤王艳春陶好霞董杰曹诚张部昌刘纯杰
- 关键词：炭疽芽胞杆菌多克隆抗体免疫荧光
- 炭疽芽胞杆菌BslA蛋白粘附功能研究
- 炭疽病是由炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)引起的一种人畜共患烈性传染病,主要通过皮肤、呼吸道和消化道感染动物和人,严重危害人类和家畜的生命健康。大量研究表明,单一的PA组分疫苗并不能够提供完全的免疫保...
- 马坤
- 关键词：炭疽芽胞杆菌免疫荧光粘附
- 文献传递
