雷宇
- 作品数：39 被引量：138H指数：6
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- HBx基因缺失突变对HBV复制和转录的影响
- 2012年
- 目的构建HBx基因缺失突变质粒pUC-HBV1.0.X7,研究HBx缺失对HBV复制和转录的影响。方法以包含HBV全长基因组的野生型质粒pUC-HBV1.0为模板,用定点突变技术构建HBx基因缺失突变质粒pUC-HBV1.0.X7,并酶切和DNA测序鉴定。用SapⅠ单酶切这两种质粒,获得线性的野生型和HBx缺失突变型HBV基因组,经转染试剂PolyJetTMReagent介导分别瞬时转染到HepG2细胞中。在转染后各时间点Western blot检测HBx蛋白的表达,Southern blot和Real-time PCR同时检测细胞质DNA复制和细胞核cccDNA的合成,Real-time PCR分析定量HBV前基因组RNA(pgRNA)的转录。结果在野生组中可检测到HBx蛋白的表达,而在HBx突变组中HBx蛋白的表达低于Western blot的检测范围。两组中各时间点合成的cccDNA水平无统计学差异(P>0.05)。而在转染后96 hHBx突变组中细胞质DNA的复制和pgRNA的转录都分别比野生组减少50%～70%(P<0.05)。结论 HBx缺失虽然不影响细胞核HBV cccDNA的合成,但是它能下调细胞质HBV DNA的复制和pgRNA的转录。
- 罗莉何松郭进军雷宇罗娜龚倩
- 关键词：HBVX蛋白CCCDNA定点突变技术
- 乙型肝炎病毒S基因四环素调控体系的构建及其在真核细胞中的表达
- 目的:构建乙型肝炎病毒S基因的四环素调控表达载体,并研究在真核细胞中四环素对S基因的调控表达, 以期用于基因治疗实验。方法:将乙型肝炎病毒S基因插入启动子内含有两个四环素超纵子(TO)的质粒 pcDNA4,并用脂质体将重...
- 雷宇黎燕王蜀强陈压西周智任红
- 文献传递
- 乙肝病毒家庭内传播情况调查被引量：6
- 2012年
- 乙型肝炎病毒感染是全球性的健康问题,其传播途径各个国家及地区存在差异.通过对543位慢性HBV感染者的调查分析,家庭中女性慢性HBV感染者其子女在无任何免疫预防干预下感染后慢性化的几率76.0%;男性慢性HBV感染者其子女感染HBV后慢性化的几率达22.5%;夫妻之间HBV感染的结局是以形成保护性抗体为主,调查的543对夫妻中,夫妻双方均为HBsAg阳性的有50对,达9.2%;HBV在夫妻之间的传播的特点是丈夫感染HBV后更容易慢性化:妻子为慢性HBV感染者,其丈夫被感染后慢性化的几率为13.8%(27/196);而丈夫为慢性HBV感染者的家庭中,其妻子被感染后慢性化的几率为7.1%(23/322),差异具有统计学意义(χ2=6.146,P=0.013);除母婴传播外,乙肝病毒在夫妻、父亲和子女、孩子之间以及其他家庭接触性传播也很重要.
- 李雪黎雷宇钟珊周智任红
- 关键词：乙肝病毒家庭内免疫预防
- 102例终末期肝病患者并发侵袭性真菌感染的诊断、治疗研究被引量：10
- 2017年
- 目的:了解终末期肝病患者并发侵袭性真菌感染的情况、临床特点及抗真菌治疗的效果,以期取得更好的疗效,改善临床预后。方法:回顾性分析102例终末期肝病并发侵袭性真菌感染的诱因、临床表现、血常规、G试验、影像学特征、真菌学特点、抗真菌治疗时机和疗效,观察氟康唑、伏立康唑和卡泊芬净抗真菌的疗效。结果:102例患者中确诊28例,临床诊断29例,拟诊45例。其中腹部感染50例,肺部37例,血流8例,中枢4例,腹部肺部同时感染3例。均用过1~2个疗程的广谱抗菌药物,部分患者长期使用糖皮质激素。治疗前G试验阳性患者82例。102例患者中58例口腔肉眼可见毛状白斑,涂片发现真菌。外周血白细胞计数大于10×10~9个/L者58例(56.9%),中性粒细胞分类大于80%的79例(77.5%);29例患者CT发现肺部病变。氟康唑治疗17例,治愈10例(58.8%),无效7例;伏立康唑治疗23例,治愈15例(65.2%),无效8例;卡泊芬净治疗58例,治愈46例(79.3%),无效12例,治愈率以卡泊芬净组为高,但无统计学差异。结论:终末期肝病有高危因素存在,易并发侵袭性真菌感染,主要病原菌为念珠菌。但临床症状体征无特异性,易漏诊,治疗时间越早,疗效越好。卡泊芬净治疗终末期肝病伴发的侵袭性真菌感染疗效高、安全性好,适合临床应用。
- 黄祎李哲雷宇凌宁付潇周智
- 关键词：终末期肝病侵袭性真菌感染氟康唑伏立康唑卡泊芬净
- 传染病学研究生教学面临的问题及思考被引量：1
- 2018年
- 通过分析当前传染病学研究生教育的课程相对陈旧、培养模式欠规范、师资不足等现状和问题，提出进行传染病学研究生教学改革与创新的必要性．并从优化教学课程、改革研究生培养模式、加强导师队伍建设等方面入手，探索新的教学方法和形式，提高传染病学研究生的临床和科研技能，培养其创新能力和社会适应能力。
- 雷宇康娟周智
- 关键词：传染病学教学
- 聚乙二醇干扰素α-2a治疗慢性乙型肝炎过程中外周血γδT细胞的变化及其临床意义被引量：14
- 2018年
- 目的 观察慢性乙型肝炎（CHB）患者在聚乙二醇干扰素（Peg-IFN） α-2a治疗过程中外周血γδT细胞的变化,并分析其与临床指标及疗效的相关性. 方法 收集HBeAg阳性的CHB患者在Peg-IFNα-2a治疗不同时间点的外周全血,包括0周17例、12周20例、24周20例及48周16例,其中有11例患者在每个时间点均收集血样观察.流式细胞术检测外周血中γ δ T及其亚群细胞Vδ1T、Vδ2T、效应记忆γδT（γ δTem）、中央记忆γ δT （γ δTcm）、初始γδT （γδTnaive）与终末分化效应γ δT （γ δTeff）细胞的频率.同时检测肝功能、HBV血清病毒等标志物及HBV DNA水平.用SPSS 23.0统计软件分析比较各治疗时间点细胞比例的差异,以及细胞比例与丙氨酸氨基转移酶（ALT）、HBsAg、HBeAg或HBV DNA水平的相关性;并且分析持续随访的11例患者中,γδT及其亚群细胞比例与Peg-IFN α-2a治疗应答的相关性.结果 在Peg-IFNα-2a治疗0～ 48周期间,CHB患者外周血γδT及Vδ 2T细胞比例逐渐下降,48周时的γδT细胞和Vδ 2T细胞比例分别为6.89％（5％,8.15％）、4.61％ （2.16％,6.50％）,明显低于0周水平[12.5％（7.73％,19.00％）、6.59％ （3.86％,13.62％）],差异均具有统计学意义（P值均＜0.05）;但V δ 1T、γ δ Tem、γ δTcm、γ δTnaive或γ δTeff亚群细胞的比例在各时间点的差异均无统计学意义（P值均＞ 0.05）.同时ALT、HBsAg、HBeAg或HBV DNA水平与γδT或Vδ2T细胞比例均呈显著性正相关（P值均＜0.05）.11例持续随访患者中,应答者的γ δ Tem细胞的比例在各时间点均显著低于无应答者,差异均有统计学意义（P值均＜ 0.05）,而其他γδT亚群细胞比例在两组间的差异均无统计学意义（P值均＞ 0.05）. 结论 Peg-IFN α-2a治疗CHB过程中γδT细胞比例随着HBV复制降低及肝脏炎症缓解而呈下降趋势,且具有较低效应记忆γδT细胞比例的CHB患者在Peg-IFNα-2a治疗中可能更易获�
- 刘楷沈妍希凌宁雷宇胡鹏任红陈敏
- 关键词：肝炎乙型慢性聚乙二醇干扰素ΑΓΔT细胞
- 四环素调控表达肿瘤坏死因子α抗乙型被引量：2
- 2014年
- 目的研究四环素调控表达的肿瘤坏死因子α（TNFα）抑制HBV复制的作用。方法以pcDNA4TM／四环素操纵子序列（TO）载体为模板，用PeR法扩增含四环素调控表达序列片段TO，插入pUC118载体中测序，选择测序正确的序列取代pVITR03载体中相应的片段，构建成pVITR03-TO。用相同的方法以pcDNA6／四环素阻遏蛋白（TR）。载体为模板扩增TR基因，经测序证实后插入pVITR03-TO载体的一个多克隆位点，构建成pVITR03-TO-TR。在另一个多克隆位点插入TNFα基因，构建pVITR03-TO-T10TNFα。将重组质粒瞬时转染HepG2细胞，研究四环素调控表达TNF0t的有效性。以HepG2．2．15细胞为HBV复制模型，转染pVITR03-TO-TR-TNFα后，经潮霉素抗性筛选及有限稀释，选择高效表达TNFα的细胞建立细胞系，观察经四环素调控表达后，TNFα抑制HBV复制的作用。多组间数据比较使用方差分析。结果经过改建的双表达载体能够有效表达TNFα，并可以用不同剂量的四环素进行调控，四环素的最佳工作浓度为1．0μg／ml。诱导l、3、5d后，转染pVITR03-TOTR-TNFα组上清液中的HBsAg抑制率分别为14．8％、11．5％、28．44％，转染pVITR03-TOTR组分别为1．2％、1．1％、0，诱导5d后的HBsAg抑制率差异有统计学意义（F=13．65，P〈0．05）I转染pVITR03-TOTR-TNFa组的HBeAg的抑制率分别为50％、26．67％、47．85％，转染pVITR03-TOTR组分别为0．3％、1．3％、0，诱导1、3、5d时的HBeAg抑制率差异均有统计学意义（F值分别为27．31、14．06和43．76，P值均〈O．05）。荧光定量PCR结果显示，诱导5d后，TNFα对细胞内和培养上清液的HBVDNA有明显的抑制作用，抑制率分别为70．26％和79．86％，与对照组相比，差异均有统计学意义∽值分别为96．7和62．72，P〈0．05）。进一步的研究结果表明，TNFα对HBVS基因的mRNA转录有明显抑制作用。结论成功构建了四环素调控表
- 倪艳蒋凤徐华徐华雷宇雷宇周智陈压西
- 关键词：肝炎病毒乙型细胞因子
- 滤泡辅助性T细胞与肝脏疾病的研究进展
- 2013年
- 滤泡辅助性T细胞(Tfh)是近年来发现的调节体液免疫应答的新型CD4+T细胞亚群,Tfh被认为是辅助B细胞产生抗体的最主要的辅助细胞。CD4+CXCR5+是Tfh的标志,Tfh与其他CD4+T亚群存在明显差别,包括转录因子(Bcl-6)、趋化因子受体(CXCR5)的高表达,迁移至淋巴滤泡并辅助B细胞产生抗体等。IL-21是Tfh分泌的辅助性细胞因子,通过与B细胞的IL-21R结合,使之分化为产生抗体的细胞。该类细胞的异常可能与肝脏疾病的发病机制有关。
- 胡婷婷雷宇胡鹏
- 关键词：滤泡辅助性T细胞肝炎IL-21
- 乙型肝炎病毒S基因四环素调控体系的构建及其在真核细胞中的表达被引量：2
- 2007年
- 目的:构建乙型肝炎病毒S基因的四环素调控表达载体,并研究在真核细胞中四环素对S基因的调控表达,以期用于基因治疗实验。方法:将乙型肝炎病毒S基因插入启动子内含有2个四环素超纵子(TO)的质粒pcDNA4,并用脂质体将重组质粒pcDNA4-S和含有四环素抑制基因的质粒pcDNA6共转染入真核细胞HepG2中,用Zeocin(400μg/ml)及Blasticidin(10μg/ml)进行抗性筛选,约20天形成抗性克隆,建立在四环素诱导下能稳定表达S基因的细胞系。以不同浓度的四环素(0.5μg/ml,1.0μg/ml,2.0μg/ml,3.0μg/ml)进行诱导,用微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测S抗原的表达,以确定四环素的最佳浓度。结果:转染了重组质粒的HepG2细胞,在无四环素环境下HBsAg表达量很低,当加入不同浓度的四环素诱导后,HBsAg表达量明显增加,但所测HBsAg的S/N值无明显差异。结论:成功构建了乙型肝炎病毒S基因四环素调控表达载体,并在真核细胞中进行了四环素的调控表达。
- 雷宇黎燕王蜀强陈压西周智任红
- 关键词：乙肝病毒四环素
- HBV-S基因四环素调控双表达载体的构建及其调控表达研究
- 目的:构建在同一载体中含乙型肝炎病毒S基因(HBV-S)和四环素阻抑蛋白基因的双表达载体,研究在真核细胞中四环素对S基因表达的调控。方法:在双表达载体pVITRO3一个启动子后的多克隆位点插入四环素阻抑蛋白基因,用含四环...
- 雷宇倪艳王蜀强周智陈压西任红
- 文献传递
