陶中华
- 作品数：13 被引量：14H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属中山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项上海市科学技术委员会资助项目更多>>
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- 肺靶向转移性人肝癌细胞株及其建立方法
- 本发明提供了肺靶向转移性人肝癌细胞株及其建立方法。所述的肺靶向转移性人肝癌细胞株，其特征在于，母细胞为红色荧光蛋白表达肝癌细胞HCCLM3-R，所述细胞为分类命名：肺靶向转移人肝癌细胞株HCCLM3-R-LM1，保藏编号...
- 吴伟忠陶中华李薇薇孙惠川汤钊猷樊嘉钦伦秀王鲁
- 文献传递
- 芳香烃受体核易位蛋白2基因表达对HCCLM6细胞侵袭和迁移的影响
- 2010年
- 目的探讨短发夹（sh）RNA芳香烃受体核易位蛋白（ARNT）2i慢病毒表达载体对高转移肝癌细胞HCCLM6侵袭和迁移的影响。方法以ARNT2为目的基因，化学合成4条干扰RNA，与经MluⅠ和ClaⅠ酶切后的pLVTHM载体连接过夜，筛选并鉴定阳性克隆。利用脂质体2000将ShRNA—ARNT2i，pCMV—dR8．74，pMD2G共转染293T细胞，获得shRNA—ARNT2i慢病毒颗粒，进一步感染HCCLM6靶细胞，并分为转染shRNAARNT2i组、未转染的空白对照组和转染阴性对照序列组。用荧光实时定量PCR和Westernblot检测ARNT2基因的干扰效率。应用划痕和Boyden小室法观察ARNT2表达下调对HCCLM6侵袭和迁移能力的影响。用SPSS16．0统计软件对数据进行独立样本t检验和方差分析，其中多组资料两两比较采用LSD法。结果荧光实时定量PCR检测转染shRNAARNT2i组，未转染的空白对照组和转染阴性对照序列组3组ARNT2mRNA相对表达值分别为0．154±0．024、0．860±0．145、1．004±0．009，F=113．14，P〈0．01，差异有统计学意义；Westernblot显示转染stLRNA—ARNT2i组ARNT2蛋白的表达量为16．45±1．6，转染阴性对照序列组ARNT2蛋白的表达量为44．56±2．07，两组比较，t=18．58，P〈0．01，差异有统计学意义；转染shRNA—ARNT2i组细胞在划痕48h后基本愈合，而转染阴性对照序列组和未转染的空白对照组划痕依然可见；转染shRNAARNT2i组穿膜细胞数为（13．25±1．04）个，而未转染的空白对照组和转染阴性对照序列组的穿膜细胞数分别为（6．50±2．56）个、（6．75±2．05）个，F=29．645，P〈0．01，差异有统计学意义。结论shRNA—ARNT2i载体能显著下调HCCLM6细胞ARNT2基因和蛋白的表达，促进HCCLM6细胞的运动和侵袭。
- 李薇薇吴伟忠梁英肖春丽陶中华王鲁孙惠川樊嘉
- 关键词：肝细胞肿瘤迁移细胞
- 人肝癌血管内皮细胞分离培养、鉴定及比较被引量：3
- 2011年
- 目的 建立人肝癌血管内皮细胞（TEC）分离培养方法并鉴定比较.方法 采用CD105、CD31抗体交联免疫磁珠方法优化分选TEC并传代培养;通过形态观察、功能实验、流式检测及实时聚合酶链反应（real-time PCR）等验证比较.结果 CD105＋TEC呈细长＂纤维条索状＂,CD31＋TEC则呈＂梭形＂;流式检测TEC表达CD68和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）低于5%,排除巨噬细胞和成纤维细胞污染,PCR检测CD105＋TEC、CD31＋TEC甲胎蛋白mRNA显著低于肿瘤细胞HepG2（P＜0.01）,表达水平低于HepG2的1/8,排除肿瘤细胞污染;95%以上阳性分选细胞呈乙酰化低密度脂蛋白摄取实验阳性;增殖实验检测CD105＋TEC和CD31＋TEC生长48 h的吸光度值分别为0.45±0.04和0.35±0.02（P＜0.05）,CD105＋TEC增殖能力强于CD31＋TEC;TEC在Matrigel胶中可形成毛细管网状结构,CD31＋TEC强于CD105＋TEC.结论 CD105、CD31抗体交联免疫磁珠分选法均可分离得到高纯度人肝癌TEC.
- 孔令群朱小东徐华祥陶中华王文权孙惠川
- 关键词：内皮细胞血管生成
- 磺化异麦芽寡聚糖对人肝癌细胞株HCCLM3移植瘤生长的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨磺化异麦芽寡聚糖(isomalto oligosaccharide sulfate,IMOS)对人肝癌细胞株HCCLM3移植瘤生长的影响。方法:用剂量递增腹腔给药的方法,监测IMOS对裸鼠体质量、肝肾功能及重要脏器组织病理学的影响。用活体荧光显微镜,每周动态评价0、30、60、90 mg/(kg.d)IMOS治疗组裸鼠中HCCLM3肝癌移植瘤的生长情况。结果:在≤90 mg/(kg.d)剂量下,IMOS对裸鼠无明显毒性,且能显著抑制肝癌生长。结论:IMOS是一种潜在的抗肝癌药物,值得进一步研究。
- 肖春丽陶中华万金良吴伟忠
- 关键词：肝癌
- 人肝癌肺和淋巴结靶向转移细胞及裸鼠移植模型的建立被引量：6
- 2011年
- 目的克隆具有肺和淋巴结转移亲嗜性的人肝癌细胞并建立相应的裸鼠移植模型。方法将荧光人肝癌细胞HCCLM3－R接种于4周龄的裸鼠肝脏，6周后在荧光解剖下观察并获取肺及腹腔淋巴结转移灶组织，经体外克隆培养，所获细胞分别标记为HCCLM3R—LM1和HCCLM3R—LnMl。接种上述两种细胞于4周龄裸鼠肝脏，观察各自肺和腹腔淋巴结转移灶荧光数量，并与肺组织连续切片中的转移灶数目进行比较。计量资料采用Wilcoxon秩和检验和Kmskal—Wallis秩和检验进行统计学分析。结果HCCLM3-R—LM1、HCCLM3-R和HCCLM3-R—LnMl细胞接种于裸鼠肝脏后第6周，在肺和腹腔淋巴结中均能发现肿瘤转移。3株细胞接种后，裸鼠肺和腹腔淋巴结转移灶荧光面积分别为8687．00±1844．63和2570．00±318．20（P〈0．001），6457．67±832．62和10994．33±2212．31（P〈0．001），2968．67±2571．00和24416．00±7186．13（P〈0．001），每只裸鼠光镜下肺转移灶中位数分别为755、430、310个（P〈0．001），与荧光定量结果相吻合。结论成功建成人肝癌肺和淋巴结亲嗜性转移细胞和裸鼠移植模型，其中HCCLM3R—LM1细胞具有明显的肺转移特性，而HCCLM3－R—LnM1细胞具有明显的淋巴结转移特性，为肝癌器官靶向转移研究提供了理想的体内外模型。
- 陶中华吴伟忠王曦龙万金良孙惠川王鲁夏景林樊嘉
- 关键词：肝细胞荧光蛋白
- 磺化异麦芽寡聚糖对肝癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响
- 2011年
- 目的:探讨磺化异麦芽寡聚糖(isomalto oligosaccharide sulfate,IMOS)对肝癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:分别采用细胞计数、荧光面积和流式细胞仪评价IMOS对肝癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:在体外,IMOS能显著抑制HCCLM3、HepG2、Be-l7402和HCCLM3-RFP细胞的增殖并诱导细胞凋亡。结论:IMOS是一种潜在的抗肝癌药物,可在人肝癌裸鼠移植模型中进一步开展抗肝癌疗效的评价。
- 肖春丽陶中华万金良吴伟忠
- 关键词：肝癌增殖细胞周期凋亡
- 肺靶向转移性人肝癌细胞株及其建立方法
- 本发明提供了肺靶向转移性人肝癌细胞株及其建立方法。所述的肺靶向转移性人肝癌细胞株，其特征在于，母细胞为红色荧光蛋白表达肝癌细胞HCCLM3-R，所述细胞为分类命名：肺靶向转移人肝癌细胞株HCCLM3-R-LM1，保藏编号...
- 吴伟忠陶中华李薇薇孙惠川汤钊猷樊嘉钦伦秀王鲁
- 淋巴结靶向转移性人肝癌细胞株及其建立方法
- 本发明提供了淋巴结靶向转移性人肝癌细胞株，母细胞为红色荧光蛋白表达肝癌细胞HCCLM3-R，其特征在于，所述细胞为分类命名：淋巴结靶向转移人肝癌细胞株HCCLM3-R-LnM1，保藏编号：3645，具有以下生物学特性：细...
- 吴伟忠陶中华李薇薇孙惠川汤钊猷樊嘉钦伦秀王鲁
- 文献传递
- 淋巴结靶向转移性人肝癌细胞株及其建立方法
- 本发明提供了淋巴结靶向转移性人肝癌细胞株，母细胞为红色荧光蛋白表达肝癌细胞HCCLM3-R，其特征在于，所述细胞为分类命名：淋巴结靶向转移人肝癌细胞株HCCLM3-R-LnM1，保藏编号：3645，具有以下生物学特性：细...
- 吴伟忠陶中华李薇薇孙惠川汤钊猷樊嘉钦伦秀王鲁
- 外科手术后全身性炎性反应综合征和严重脓毒症患者血浆血管加压素浓度及其相关因素分析被引量：1
- 2010年
- 目的:研究外科手术后全身性炎性反应综合征(SIRS)、严重脓毒症患者血浆血管加压素(AVP)浓度的变化,及其与动脉血气、血电解质、血流动力学参数的关系。方法:将2009年3月—2010年3月间收入外科监护病房(SICU)的患者,依据收入SICU24h内临床过程分为对照组、SIRS组、严重脓毒症组3组,每组10例。分别记录各组人口统计学资料、临床信息,测定动脉血气,入SICU24h内血浆AVP浓度及相应的血流动力学指标、中心静脉压、血生物化学检查数据。结果:严重脓毒症组患者的血浆AVP浓度显著高于对照组和SIRS组(1 300.59±87.49pg.mL-1比266.33±12.03pg.mL-1,397.59±18.32pg.mL-1)(P<0.001)。血浆AVP浓度与对照组患者血Na+值、Ca2+值呈正相关(r=0.742,P=0.014;r=0.821,P=0.004),仅与SIRS组患者血Na+值呈正相关(r=0.727,P=0.017),而与严重脓毒症组患者血Na+值、Ca2+值无相关(r=0.409,P=0.241)。血浆AVP浓度与严重脓毒症组患者平均动脉压(MAP)呈正相关(r=0.544,P=0.015),与心率(HR)呈负相关(r=-0.706,P=0.023),而与对照组及SIRS组患者的MAP及HR均无相关性(r=0.363,P=0.302;r=0.454,P=0.188)。结论:对照组与SIRS组患者血浆AVP浓度变化与血Na+变化相关,而在严重脓毒症患者中AVP浓度仅与MAP相关,提示血流动力学的不稳定刺激了血浆AVP的分泌而发挥升压作用。
- 赵贤元皋源杭燕南周嘉敏陶中华王鲁
- 关键词：血管加压素严重脓毒症全身性炎性反应综合征
