陈耀勇
- 作品数：16 被引量：30H指数：4
- 供职机构：广州医学院实验医学研究中心更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 儿童系统性红斑狼疮51例临床分析
- 目的:总结儿童系统性红斑狼疮(SLE)的临床及实验室检查特点。方法:对51例住院患儿SLE的临床资料进行回顾性分析。结果:临床表现以肾损害(84．3％)、发热(70．6％)、皮疹(68．8％)、淋巴结肿大(41．2％)较...
- 熊小燕曾华松陈耀勇王蓓韦茹姚翠婵
- 文献传递
- 女孩性早熟患者中检出一种新的雌激素受体基因突变(英文)被引量：5
- 2005年
- 对收集的16例未见血液雌激素水平升高的临床女孩性早熟患者的外周血样本,利用PCR-SSCP方法筛查了雌激素受体基因编码区的可能突变。结果在1例患者发现:其雌激素受体基因8号外显子编码精氨酸的548位密码子,1个C→T转换导致精氨酸残基被半胱氨酸所替代;这一突变使DNA序列中产生1个BtsⅠ酶切位点,通过PCR-RFLP实验证明此患者为Arg548/Cys548杂合体。为证明该突变在性早熟发生中的作用,构建了一个雌激素受体反应元件报道质粒pGL3-promoter-ERE;成功将野生型ESR1基因定点突变,并克隆于PCR3.1真核表达质粒。报道质粒和表达质粒共转染CMF-7细胞,Cys548突变能够增加萤火虫荧光素酶的产生。结果证明该突变雌激素受体在体外具有高活性特征,因而推测在体内也可能具有相应的过高活性,从而导致女孩的性早熟。
- 李冰刘丽付欣周问渠邹东霆赵小媛蔡艳娜涂洪彬刘启才陈耀勇
- 关键词：雌激素受体基因突变女孩性早熟
- 女孩雌激素受体基因6号内含子区域两个新SNPs位点报道
- 2003年
- 目的:在女性性早熟患儿中检测雌激素受体基因6号外显子及内含子基因序列可能存在的突变。方法:PCR扩增雌激素受体基因6号外显子及内含子,对扩增产物进行DNA序列分析。结果:在6号内含子一侧,发现两个100％连锁的单核苷酸多态性(SNPs),分别为53G-67A和53T-67C。结论:这一对单核苷酸多态性并不引起氨基酸的替代,与女孩性早熟的发生也无关,但是否和其他疾病有连锁关系尚待进一步探讨。
- 陈耀勇李冰付欣刘启才周问渠陈祯
- 关键词：雌激素受体内含子
- pTet-On鼻咽癌SUNE1细胞系的建立
- 2003年
- 目的:建立受四环素衍生物诱导表达外源基因的SUNE1细胞系,为研究特定基因定量表达在鼻咽癌的发生、转移及药物干预中的作用提供理想的细胞模型。方法:脂质体介导转染pTet-On质粒于鼻咽癌细胞系SUNE1,G418筛选得到稳定克隆,再瞬间转染pTRE-Luc,DOX诱导后检测光素酶(Luciferase)活性得到高水平诱导,低背景表达的SUNE1细胞系。结果:筛选得到的SUNE1细胞系受四环素衍生物诱导后能够低背景、高水平的表达。
- 刘启才李晓艳陈祯陈耀勇
- 关键词：四环素鼻咽癌基因调控
- 5个不同肺癌细胞株的基因差异表达谱被引量：4
- 2002年
- 目的 :希望获得细胞间基因表达的异同 ,对癌细胞的形成和发展中基因参与提供分析线索。方法 :选用 5个不同转移潜能及来源的体外培养肺癌细胞株H12 99,HLAMP ,PAa ,PGCL3和NiS作为研究对象 ,以永生化的支气管上皮细胞 16HBE为对照 ,采用含有 80 0个基因探针的肺癌相关基因芯片LUs,研究了基因表达的差异。结果 :5个肺癌细胞株差异表达的基因共有 35 5个 ,但共同上调或下调的基因仅有 4个 ,基因表达的变化在不同细胞株之间明显表现出多态性。比较三个高转移细胞株和两个低转移细胞株 ,有 12个基因表达改变出现在高转移细胞株而在低转移株未见明显变化 ,其中有 3个已报道的转移相关基因和 9个未报道和转移相关的基因 ,这些基因大多是膜蛋白、细胞骨架蛋白或 /和细胞信号转导有关 ,基因功能复习提示和肿瘤转移有可能的关联性。结论 :cDNA芯片对于肺癌相关基因的筛选是一个非常有效的研究手段 ;对于临床诊断应用 ,需要在大规模数据收集的基础上建立必要的模式 ,通过多基因系统分析 ,才能获得有效的应用。
- 陈耀勇李冰宋春林付欣邹东霆
- 关键词：肺癌细胞株CDNA芯片基因表达
- 干细胞来源的胰岛素分泌细胞的研究进展被引量：1
- 2004年
- 黄洁陈耀勇
- 关键词：干细胞胰岛素分泌细胞Β细胞细胞诱导分化
- 4种不同生境的蟹类金属硫蛋白cDNA的克隆与比较被引量：7
- 2002年
- 利用Carcinusmaenas金属硫蛋白氨基酸序列资料 ,用全简并引物从鳃组织总RNA中扩增并克隆了首个甲壳类金属硫蛋白cDNA片段序列 ,3’ RACE获得了其编码区全长cDNA .之后 ,用部分简并的引物扩增并克隆了其它 3种国内常见蟹类的金属硫蛋白cDNA编码区全长序列 .序列分析结果表明 ,几种蟹的金属硫蛋白cDNA序列存在差异 ,推知的氨基酸序列也不完全相同 ,比较不同蟹的cDNA和氨基酸序列数据不能证明不同生态环境对金属硫蛋白的分子进化起重要作用 .图 4表 1参
- 李冰付欣刘启才陈耀勇
- 关键词：生境蟹类金属硫蛋白CDNA克隆
- 雌激素及类雌激素测评系统的建立被引量：3
- 2006年
- 目的采用重组报道基因的方法开发一套可筛选环境雌激素和检测青春期前儿童体内雌激素水平的雌激素受体介导的转录激活测评系统。方法构建含有雌激素受体反应元件的报道载体pGL3-ERE-LUC和pGL3-overERE-LUC以及人类雌激素受体表达载体pSG5-ER。将两种报道载体分别转染入MCF-7细胞中,加入不同浓度雌激素受体配体,观察其对该系统的影响。将两种报道载体分别与雌激素受体表达载体共转染,加入不同浓度雌激素受体配体,观察其对该系统的影响。结果酶切结果证实pSG5-ER表达载体及报告载体构建成功。转染了pGL3-ERE-LUC或pGL3-overERE-LUC的MCF-7细胞,当加入一定浓度雌二醇(E2)及异黄酮(isoflavone)时,荧光素酶活性均增加;加雌激素受体拮抗剂他莫惜芬(TAM)后,荧光素酶活性下降。结论将pGL3-ERE-LUC或pGL3-overERE-LUC分别与pSG5-ER共转染入MCF-7细胞,可建立较敏感的环境雌激素测评系统。
- 冯帼周问渠邹冬霆付欣陈耀勇
- 关键词：雌激素性早熟雌激素受体
- Citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症研究进展
- 2009年
- Citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症（NICCD）是近年来新发现的一种遗传代谢缺陷病，是由于SLC25A13基因突变引起citrin蛋白合成障碍所致。其临床表现复杂多样，确诊需要依赖基因诊断，目前尚缺少特异性的治疗方法。该文介绍了NICCD的国内外研究进展及发展趋势，以促进国内对NICCD的认识和进一步研究。
- 樊春刘丽陈耀勇
- 关键词：SLC25A13基因肝内胆汁淤积症瓜氨酸血症
- 雌激素受体Arg548/Cys548基因突变导致受体的高敏感性被引量：1
- 2011年
- 目的:研究雌激素受体新突变Arg548/Cys548对受体介导的下游基因表达调控的影响,并探讨其机理和在女孩性早熟中的作用。方法:利用已构建的雌激素受体反应元件报道质粒pGL3-promoter-ERE,分别与野生型ESR1表达质粒PSG5-wtER和定点突变受体表达质粒PSG5-mutER共转染CMF-7和MDA-MB-231细胞,转染后加入雌激素、类似物和拮抗物处理,检测转染细胞的荧光素酶活性值。结果:转染突变型受体的CMF-7和MDA-MB-231细胞的荧光素酶活性值明显升高,在生理浓度雌激素及类似物植物类雌激素异黄酮刺激下,Cys548突变型受体基因转染比野生型受体转染的CMF-7和MDA 231细胞均表现出显著强烈的增加萤火虫荧光素酶的活性,表现高敏感的特性;单独加入TAM后荧光素酶活性值没有变化,而同时加入E2和TAM后荧光素酶活性值比加入E2的荧光素酶活性值则明显下降。结论:Cys548突变受体在体外具有较高的敏感性,对药物雌二醇及类似物反应敏感,拮抗剂TAM对受体的活性没有抑制作用,却能竞争性降低雌激素及类似物的作用。
- 邹东霆周问渠付欣陈耀勇李冰
- 关键词：基因突变转染荧光素酶
