陈圣军 作品数:15 被引量:31 H指数:3 供职机构: 集美大学生物工程学院 更多>> 发文基金: 厦门市科技计划项目 福建省自然科学基金 宁波市科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
牛传染性鼻气管炎和赤羽病基因芯片检测方法的建立和应用 被引量:5 2013年 为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和赤羽病病毒(AKAV)的双重快速检测方法,本研究根据IBRV gB基因和AKAV S基因序列设计合成了2对特异引物和探针,建立了同时检测这两种病毒的基因芯片检测方法,即以合成探针的5'端添加poly T10尾并氨基化固定于经处理的玻璃基片表面作为捕捉序列,采用荧光素Cy3标记正向引物的5'端,对样品的PCR扩增产物进行检测,并通过试验确定其适宜杂交温度为38℃。该方法检测IBRV和AKAV重组质粒的灵敏度分别为3.6×103拷贝/25μL和9.26×104拷贝/25μL,同时通过对牛的腺病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛水泡性口炎病毒、口蹄疫病毒及牛白血病病毒等的检测均无交叉反应,表明其特异性强。该检测方法的建立对于加强进出口牛的IBRV和AKAV检验检疫具有十分重要的意义。 陈圣军 孔繁德 徐淑菲 张吉红 唐泰山关键词:牛传染性鼻气管炎病毒 赤羽病病毒 寡核苷酸芯片 牛传染性鼻气管炎检测方法的研究进展 被引量:13 2013年 牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)是引起牛传染性鼻气管炎的病原。文中介绍了牛传染性鼻气管炎的各种检测方法的研究进展,包括病理组织学诊断、病毒的分离鉴定、免疫学检测和核酸分子检测,为牛传染性鼻气管炎的检测提供了有价值的参考。 陈圣军 孔繁德 徐淑菲 彭小莉 王武军 黄标敏关键词:牛传染性鼻气管炎 牛传染性鼻气管炎和赤羽病分子检测方法的建立和应用 牛传染性鼻气管炎(IBR)和赤羽病(AKA)是两种重要的危害养牛业的病毒性传染疾病,曾给养牛业带来巨大的经济损失,我国进出口境牛及其相关产品大多要求对这两种疫病进行检疫。目前检测IBR和AKA的方法主要有免疫荧光抗体试验... 陈圣军关键词:牛传染性鼻气管炎 分子检测技术 赤羽病 灵敏度 文献传递 基因芯片技术在微生物检测中的应用研究进展 基因芯片技术是生物芯片中研究较早的一种技术,本文主要从芯片制备和样品制备两方面介绍了基因芯片在微生物检测中研究进展,分析了基因芯片技术发展中存在的问题并展望其发展前景。 陈圣军 孔繁德 徐淑菲 彭小莉 黄标敏关键词:基因芯片 微生物检测 文献传递 赤羽病SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用 本研究根据赤羽病毒(AKAV)的S基因序列设计合成了引物,RT-PCR扩增得到目的基因片段并克隆到PGM-T载体得到质粒标准品。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测AKAV的... 陈圣军 孔繁德 徐淑菲 张吉红 唐泰山关键词:赤羽病 病毒检测 荧光定量PCR法 文献传递 牛传染性鼻气管炎检测方法的研究进展 牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)是引起牛牛传染性鼻气管炎的病原。本文介绍了牛传染性鼻气管炎的各种检测方法的研究进展,包括病理组织学诊断、病毒的分离鉴定、免疫学检测和核酸分子检测,为牛传染性鼻气管炎的检测提供了有价值的参考... 陈圣军 孔繁德 徐淑菲 彭小莉 王武军 黄标敏关键词:牛传染性鼻气管炎 病理诊断 病毒检测 免疫学 核酸分子 文献传递 多重PCR技术同时检测牛传染性鼻气管炎和赤羽病方法的建立和应用 被引量:2 2013年 为满足同时对IBRV和AKAV进行快速诊断的需要,根据牛疱疹病毒1型(BHV1)gB基因序列和赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了2对针对这2种病毒的特异引物,并建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明:该方法能同时扩增得到2条与试验设计相符的311 bp(IBRV)和392 bp(AKAV)特异性条带;IBRV的灵敏度为0.13 pg/25μL,AKAV的灵敏度为1.04 pg/25μL。本试验方法的建立对于加强进出口牛IBRV和AKAV的检验检疫具有十分重要的意义。 孔繁德 陈圣军 徐淑菲 张吉红 唐泰山关键词:多重PCR 牛传染性鼻气管炎病毒 基因芯片技术在微生物检测中的应用研究进展 基因芯片技术是生物芯片中研究较早的一种技术,本文主要从芯片制备和样品制备两方面介绍了基因芯片在微生物检测中研究进展,分析了基因芯片技术发展中存在的问题并展望其发展前景。 陈圣军 孔繁德 徐淑菲 彭小莉 黄标敏关键词:基因芯片 微生物检测 性能评价 文献传递 多重PCR技术同时检测牛传染性鼻气管炎和赤羽病方法的建立和应用 为满足同时对IBRV和AKAV进行快速诊断的需要,根据牛疱疹病毒1型(BHV-1)gB基因序列和赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了2对针对这2种病毒的特异引物,并建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性... 孔繁德 陈圣军 徐淑菲 张吉红 唐泰山关键词:多重PCR 牛传染性鼻气管炎病毒 文献传递 SYBR Green I实时荧光定量PCR检测牛传染性鼻气管炎病毒 被引量:2 2013年 本研究根据牛传染性鼻气管炎病毒毒(IBRV)gB基因序列设计合成了引物,PCR扩增得到目的基因片段并克隆到PGM-T载体得到质粒标准品。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了SYBR Green I荧光定量PCR检测IBRV的方法。该方法的检测敏感性达到360copies/25μL,并具有较好的重复性和特异性。本试验方法的建立对于加强进出口牛IBRV的检验检疫具有十分重要的意义。 陈圣军 孔繁德 徐淑菲 张吉红 唐泰山关键词:IBRV 实时荧光定量PCR SYBR