目的:探讨严重烧伤急性应激期干扰素诱导含TPR基序的蛋白1(interferon-induced protein with tetratricopetide repeats 1,IFIT1)表达与肝细胞凋亡的关系。方法:健康C57/129小鼠25只,随机分成5组,每组5只:正常对照(0 h)组、烧伤后1,6,12和24 h组。制作烧伤组大鼠20%总体表面积(total body surface area,TBSA)III度烧伤模型。取肝组织,Western印迹观察IFIT1表达;免疫组织化学检测caspase-3和caspase-8表达;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测肝细胞凋亡。结果:IFIT1烧伤后1 h开始增高,6 h最高,12 h开始降低,24 h降至最低,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);caspase-3和caspase-8烧伤后随时间逐渐增高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);TUNEL法显示烧伤后肝细胞凋亡1 h与0 h比较差异无统计学意义(P>0.05),6 h至24 h呈逐渐增高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:严重烧伤后IFIT1表达增高可促使肝细胞凋亡的增强。
目的探讨颈交感神经阻滞(SB)对烧伤大鼠蓝斑神经元电生理变化的影响。方法成年健康雄性Wistar大鼠20只,随机分为4组,对照组、对照SB组、烧伤组和烧伤SB组,每组5只。总体表面积(total body surface area,TBSA)20%Ⅲ度大鼠烧伤模型,4h后观察蓝斑神经元放电,HE染色组织学定位,免疫组织化学方法验证。结果在放电频率、放电脉冲间隔(ISI)、众数和不对称指数(AI),对照组和对照SB组比较差异无统计学意义(P>0.05);烧伤组和烧伤SB组放电频率显著高于对照组和对照SB组(P<0.01),而烧伤组又显著高于烧伤SB组(P<0.01);烧伤组和烧伤SB组ISI和众数显著高于对照组和对照SB组(P<0.01),而烧伤SB组又显著高于烧伤组(P<0.01);烧伤组和烧伤SB组AI显著高于对照组和对照SB组(P<0.01),而烧伤SB组和烧伤组间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学方法显示蓝斑神经元主要为多巴胺β羟化酶(DβH)神经元。结论 SB对烧伤的治疗作用中枢机制之一可能是通过抑制蓝斑神经元放电活动来实现。
目的获取小鼠IFIT1(Interferon-induced protein with tetratricopetide repeats 1)特异性多克隆抗体。方法扩增培养高效表达IFIT1的重组子pMAL-C2X-IFIT1,超声破碎后的细胞上清过Amylose Pre-packed column亲和层析柱,将所得纯化的融合蛋白MBP-IFIT1作为抗原,添加福氏佐机剂后免疫兔,收集抗血清,用Western blot和ELISA方法测定抗血清特异性反应和效价。结果纯化的MBP-IFIT1可诱导兔产生特异性免疫应答,所得抗体能够特异性识别融合蛋白中的IFIT1,ELISA结果显示其效价为1∶12800。结论MBP-IFIT1具有良好的抗原性,以该融合蛋白为抗原免疫兔成功制备出IFIT1特异性多克隆抗体。
目的：观察小鼠应激相关蛋白IFIT1（Interferon-induced protein with tetratricopetide repeats1）和JAB1（c-Jun平activation共处五项原则domain-binding protein 1）在肝脏的表达的细胞定位及氯胺酮对烧伤后早期肝脏IFIT1和JAB1表达的影响，初步探讨氯胺酮调节炎症反应的分子机制。方法：将15只健康C57／129小鼠随机分为3组（n=5），正常对照组、烧伤组、烧伤＋氯胺酮组。采用TBSA 15～20％Ⅲ度小鼠烧伤模型；氯胺酮10mg／kg，肌肉注射，烧伤15min给予。分别于烧伤后4h脱臼处死，取肝。采用免疫印迹法（Western blot）察各组肝IFIT1和JAB1的表达情况。取正常对照组肝组织作病理切片，行免疫组织化学方法对IFIT1和JAB1的表达做细胞定位。结果：烧伤组IFIT1表达较正常对照组显著增高（P〈0．01）．烧伤组JAB1表达较正常对照组显著降低（P〈0．01）：氯胺酮治疗组IFIT1表达较正常对照组、烧伤对照组显著降低（P〈0．01）．氯胺酮治疗组JAB1表达较正常对照组显著降低（P〈0．05）、较烧伤组显著升高（P〈0．05）。免疫组织化学方法显示．IFIT1在肝细胞胞浆表达为阳性．JAB1在肝细胞胞浆和胞核均表达为阳性。结论：烧伤早期小鼠肝组织IFIT1表达增高而JJAB1表达降低，氯胺酮可降低烧伤早期小鼠肝组织IFIT1的高表达，增高JAB1表达；氯胺酮可通过调控严重烧伤应激中IFIT1和JAB1的表达而在全身炎性反应综合症（Systemic inflammatory response syndrome SIRS）中发挥作用。
