郑恩霞
- 作品数:6 被引量:22H指数:2
- 供职机构:安徽师范大学更多>>
- 发文基金:安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金安徽省优秀青年科技基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 大肠杆菌arpA基因的表达及功能鉴定被引量:1
- 2010年
- E.coli的arpA基因位于异柠檬酸脱氢酶激酶(aceK)基因和异柠檬酸裂解酶调节因子基因(iclR)之间。根据E.coli基因组序列设计引物,利用PCR技术扩增了arpA基因,并将其克隆入pET-28b(+)。经IPTG诱导,ArpA蛋白可以获得高效表达。通过细菌染色体同源重组技术,构建arpA基因敲除菌株ΔarpA-MG1655。ΔarpA-MG1655在葡萄糖-MOPS培养基中的生长速率和野生型E.coli MG1655的生长速率很接近,前者约是后者的95%。ΔarpA-MG1655在乙酸-MOPS培养基中的生长速率几乎与野生型E.coliMG1655一样,说明ArpA对细菌在乙酸-MOPS培养基中的生长没有明显的影响,对乙酰辅酶A合成酶(Acs)没有明显的调控作用。ArpA包含锚蛋白重复序列,与很多真核生物包含锚蛋白重复序列的蛋白质高度同源,分子系统学分析认为一些在病毒和细菌中发现的锚蛋白重复类似蛋白,可能是进化过程中基因水平迁移的结果。
- 陶张欢赵旵军郑恩霞朱国萍
- 关键词:ARPA基因敲除
- 一种重组质粒及其构建方法
- 本发明公开了一种重组质粒,包括载体及基因片断,所述的基因片断包括含有启动子的吡啶核苷酸转氢酶基因,及含有启动子的异柠檬酸脱氢酶基因。本发明与现有技术相比,表达及纯化工艺简便,双启动子表达载体不仅将为更多难表达的蛋白质提供...
- 朱国萍徐琴郑恩霞王宝娟葛亚东王鹏赵旵军朱友明许希晨
- 文献传递
- 可溶性转氢酶促进链球菌异柠檬酸脱氢酶基因表达的研究
- 2009年
- 目的构建携带E.coli可溶性吡啶核苷酸转氢酶(UdhA)基因的双启动子双基因表达载体,鉴定此载体系统对表达效率不高的链球菌异柠檬酸脱氢酶(SmIDH)的促进表达。方法PCR法扩增SmIDH基因,插入pBluescript ⅡSK(+)得表达载体pSX。从E.coli基因组扩增UdhA基因,插入pBluescriptⅡSK(+),构建表达载体pUX。再用以pUX为模板PCR扩增lac启动子和udM基因片段,插入pSX中,获得双启动子双基因表达载体pUS。IPTG诱导表达,SDS—PAGE鉴定SmIDH的表达。结果酶切证实UdhA和SmIDH双基因正确克隆到pBluescriptⅡSK(+)中,序列测定显示双基因与GenBank报道一致及两个lac启动子方向相同,并且初步的表达实验证明UdhA促进了SmIDH的表达。结论UdhA的表达促进了SmIDH基因的表达,为该表达策略的通用性研究奠定了基础。
- 徐琴郑恩霞汪新颖朱友明朱国萍
- 关键词:异柠檬酸脱氢酶双启动子
- 铜陵狮子山铜尾矿场植被调查与土壤酶活性研究被引量:12
- 2007年
- 对安徽铜陵狮子山铜尾矿废弃地进行植被调查,发现当地现今自然定居植物共42种,隶属于13科36属,主要包括禾本科10种,豆科6种,菊科6种,十字花科5种。全部植物中,1~2年生草本植物21种,多年生草本植物20种,形成6种相对稳定的演替群落和单种斑块。尾矿场土壤的5种土壤酶(蔗糖酶、过氧化氢酶、脲酶、磷酸酶、多。酚氧化酶)活性的高低与植被丰富度和群落分布有一定的对应关系。结合本实验室前期工作,证实某些植物如白茅、狗牙根、白车轴草等已在尾矿场上成功定居且综合优势比较高,可作为铜尾矿治理中优先选用的物种。
- 晋松吴学峰郑恩霞储玲刘登义
- 关键词:植被调查土壤酶活性
- 苹果酸酶的分子生物学研究进展被引量:9
- 2009年
- 苹果酸酶(malic enzyme,ME)是调控苹果酸代谢的关键酶,可以催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应。根据辅酶特异性,苹果酸酶可分为NAD+或NADP+依赖性苹果酸酶,并广泛存在于自然界中。苹果酸酶广泛地参与不同的代谢途径,包括C4植物中的固碳作用、真菌和动物中脂质合成的NADPH源泉、以及组织快速繁殖时线粒体能量的供给等。对苹果酸酶的生化特性、空间结构特点、催化机理的研究,将为代谢工程奠定基础。
- 郑恩霞程文娟王宗达王敖
- 关键词:苹果酸酶
- 一种重组质粒及其构建方法
- 本发明公开了一种重组质粒,包括载体及基因片断,所述的基因片断包括含有启动子的吡啶核苷酸转氢酶基因,及含有启动子的异柠檬酸脱氢酶基因。本发明与现有技术相比,表达及纯化工艺简便,双启动子表达载体不仅将为更多难表达的蛋白质提供...
- 朱国萍徐琴郑恩霞王宝娟葛亚东王鹏赵旵军朱友明许希晨
- 文献传递