赵燕
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
- 供职机构：贵阳医学院贵州省医学分子生物学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 幽门螺杆菌NCTC11637、NCTC11639毒素相关基因A的克隆、序列分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的克隆幽门螺杆菌毒素相关基因A(cytotoxin-associated gene A,CagA)全长序列并进行序列分析,构建表达CagA的真核表达载体,研究CagA调控胃泌素基因的表达。方法PCR扩增出CagA基因全长片段后构建克隆载体pMD18-T/CagA7和pMD18-T/CagA9,测序结果登录GenBank,登录号分别为GQ161098(NCTC11637)和GQ161099(NCTC11639),用测序后筛选的PstI和BamHI内切酶将原核载体上的CagA基因酶切后连接到pcDNA3.1/ZEO(-)真核表达载体上,构建真核表达载体pcDNA3.1ZEO(-)/CagA7和pcDNA3.1ZEO(-)/CagA9,并经双酶切和CagA PCR扩增鉴定,最后转染胃癌细胞,检测胃癌细胞中胃泌素基因的表达。结果序列比对结果显示NCTC11637和NCTC11637 CagA的同源性为88.77%,NCTC11637与已收录的NCTC11637(AB015416)同源性为99.22%,序列分析显示两者均有两个Ca-gA酪氨酸磷酸化位点,转染细胞后CagA上调胃泌素基因的表达。结论成功克隆了CagA全长基因,并构建了含CagA全长基因的真核表达载体,在胃癌细胞内上调了胃泌素基因的表达。
- 汪苏周建奖单可人赵燕谢渊
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA真核载体胃泌素
- 幽门螺杆菌毒素相关蛋白CagA上调胃泌素基因表达被引量：12
- 2009年
- 目的对幽门螺杆菌分泌的CagA蛋白能否调控胃泌素基因表达及作用机制进行研究。方法用含有cagA基因的真核表达载体——pcDNA3．1ZEO（-）／cagA7转染AGS和SGC-7901细胞；同时培养幽门螺杆菌NCTC11637后感染AGS和SGC-7901细胞；加入JAK2信号通路抑制剂AG490和ERK信号通路抑制剂U0126，实时荧光定量PCR检测转染和感染细胞中胃泌素mRNA的表达。结果用pcDNA3．1ZEO（-）／cagA7转染和NCTC11637感染胃癌细胞AGS和SGC-7901后胃泌素mRNA表达量显著增加（P〈0．05），但加入AG490和U0126后胃泌素mRNA的表达量显著降低（P〈0．05）。结论CagA上调胃泌素基因的表达，ERK／MAPK和JAK／STAT信号通路参与了cagA对胃泌素表达的调控。
- 汪苏周建奖单可人赵燕谢渊
- 关键词：幽门螺杆菌胃泌素CAGAERK/MAPKJAK/STAT
