汪苏
- 作品数：7 被引量：40H指数：4
- 供职机构：贵阳医学院贵州省医学分子生物学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科学技术基金贵州省国际科技合作计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 幽门螺杆菌CagA蛋白研究进展被引量：11
- 2008年
- 汪苏周建奖单可人
- 关键词：幽门螺杆菌A蛋白胃部疾病酪氨酸磷酸化C-ABL
- 幽门螺杆菌NCTC11637、NCTC11639毒素相关基因A的克隆、序列分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的克隆幽门螺杆菌毒素相关基因A(cytotoxin-associated gene A,CagA)全长序列并进行序列分析,构建表达CagA的真核表达载体,研究CagA调控胃泌素基因的表达。方法PCR扩增出CagA基因全长片段后构建克隆载体pMD18-T/CagA7和pMD18-T/CagA9,测序结果登录GenBank,登录号分别为GQ161098(NCTC11637)和GQ161099(NCTC11639),用测序后筛选的PstI和BamHI内切酶将原核载体上的CagA基因酶切后连接到pcDNA3.1/ZEO(-)真核表达载体上,构建真核表达载体pcDNA3.1ZEO(-)/CagA7和pcDNA3.1ZEO(-)/CagA9,并经双酶切和CagA PCR扩增鉴定,最后转染胃癌细胞,检测胃癌细胞中胃泌素基因的表达。结果序列比对结果显示NCTC11637和NCTC11637 CagA的同源性为88.77%,NCTC11637与已收录的NCTC11637(AB015416)同源性为99.22%,序列分析显示两者均有两个Ca-gA酪氨酸磷酸化位点,转染细胞后CagA上调胃泌素基因的表达。结论成功克隆了CagA全长基因,并构建了含CagA全长基因的真核表达载体,在胃癌细胞内上调了胃泌素基因的表达。
- 汪苏周建奖单可人赵燕谢渊
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA真核载体胃泌素
- 胃癌组织及转移淋巴组织中胃泌素基因的表达被引量：4
- 2011年
- 目的:分析胃癌患者癌组织及转移淋巴结组织中胃泌素基因的表达,进一步阐明胃泌素与胃癌发生、发展的相关机制,为胃癌的防治提供实验依据。方法:收集胃癌手术患者的癌组织、癌旁组织、淋巴结组织,提取及纯化总RNA,采用Taqman实时荧光定量PCR技术测定胃泌素mRNA的表达。结果:胃泌素mRNA表达在胃癌组织较癌旁组织降低,为癌旁组织的0.063倍;淋巴组织较癌旁组织增加,为癌旁组织的35.482倍;胃泌素mRNA在胃窦癌组癌组织及淋巴组织较胃体癌组增加,分别为胃体癌组的3.074倍和9.190倍;胃泌素mR-NA在淋巴转移组的癌组织及淋巴组织较未转移组增加,分别为未转移组的59.912倍和5.895倍;胃泌素mRNA在>T2组的癌组织及淋巴组织较≤T2组增加,分别为≤T2组1.540倍和13.833倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:胃泌素在胃癌的发生、发展中有重要的作用,胃泌素与胃癌发生部位、淋巴结转移及临床分型密切相关。
- 赵艳谢渊王文玲汪苏陈娴周建奖
- 关键词：胃肿瘤胃泌素类
- transgelin基因在幽门螺杆菌感染胃癌细胞及人胃癌组织中的表达被引量：3
- 2014年
- 目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）感染胃癌细胞及人胃癌、淋巴结组织中转凝蛋白基因（transgelin）的表达水平,探讨HP感染、transgelin基因与胃癌发生、发展的相关机制。方法用HP感染胃癌细胞系AGS和SGC-7901,同时收集胃癌患者手术切除的胃癌组织、切缘组织和淋巴结组织,提取及纯化总RNA。实时荧光定量PCR检测transgelin mRNA的表达水平,分析其与临床病理参数的关系。结果 transgelin mRNA在HP感染的AGS、SGC-7901细胞中的表达量增加,分别为对照细胞的11.39倍（t=30.025,P=0.000）、3.41倍（t=5.677,P=0.005）;transgelin mRNA在胃癌组织、淋巴结组织中的表达增加,分别是切缘组织的6.48倍（t=2.290,P=0.026）、2.64倍（t=2.043,P=0.046）;Ⅳ期胃癌组织transgelin mRNA表达量增加,是Ⅰ~Ⅱ期的2.32倍（t=2.111,P=0.049）;淋巴结转移组是无淋巴结转移组的2.93倍（t=2.123,P=0.043）。结论HP可上调transgelin基因的表达,transgelin基因可能参与胃癌的发生、发展,且与p TNM分期及淋巴结转移相关。
- 赵艳谢渊王文玲陈娴汪苏周建奖
- 关键词：胃癌幽门螺杆菌实时荧光定量聚合酶链反应
- JAK2、ERK1干扰对幽门螺杆菌毒素相关蛋白CagA调控胃泌素基因表达的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨JAK/STAT3和MAPK/ERK两条信号转导通路在分析和推断CagA调控胃泌素基因表达机制中的作用.方法:将含cagA基因的表达质粒和幽门螺杆菌(CagA阳性)株分别转染和感染胃癌细胞AGS和SGC-7901,同时用siRNA阻断jak2及erk1基因的表达,48h后通过RT-PCR、Western blot检测细胞中有无CagA蛋白表达,实时荧光定量PCR检测胃泌素的变化.结果:转染组和感染组中均检测到CagA蛋白的表达,与对照相比胃泌素mRNA在转染组分别增加了26.58倍(AGS细胞)和5.59倍(SGC-7901),在感染组分别增加1.88倍(AGS细胞)和8.59倍(SGC-7901),表达量显著增高;siRNA干扰JAK2和ERK1后胃泌素mRNA表达量降低,在转染组JAK2干扰抑制率分别为81.50%(AGS)和99.00%(SGC-7901),ERK1干扰抑制率分别75.55%(AGS)和97.00%(SCG-7901).在感染组JAK2干扰抑制率分别为55.30%(AGS)和90.00%(SGC-7901),ERK1干扰抑制率分别38.30%(AGS)和92.00%(SGC-7901).结果显示ERK/MAPK和JAK/STAT通路阻断,抑制了CagA调控的胃泌素mRNA表达.结论:CagA上调胃泌素基因的表达,siRNA干扰阻断JAK/STAT和ERK/MAPK这两个信号通路,可以抑制CagA对胃泌素mRNA表达的调控.
- 谢渊周建奖赵艳汪苏陈娴
- 关键词：信号通路RNA干扰胃泌素
- 幽门螺杆菌毒素相关蛋白CagA上调胃泌素基因表达被引量：12
- 2009年
- 目的对幽门螺杆菌分泌的CagA蛋白能否调控胃泌素基因表达及作用机制进行研究。方法用含有cagA基因的真核表达载体——pcDNA3．1ZEO（-）／cagA7转染AGS和SGC-7901细胞；同时培养幽门螺杆菌NCTC11637后感染AGS和SGC-7901细胞；加入JAK2信号通路抑制剂AG490和ERK信号通路抑制剂U0126，实时荧光定量PCR检测转染和感染细胞中胃泌素mRNA的表达。结果用pcDNA3．1ZEO（-）／cagA7转染和NCTC11637感染胃癌细胞AGS和SGC-7901后胃泌素mRNA表达量显著增加（P〈0．05），但加入AG490和U0126后胃泌素mRNA的表达量显著降低（P〈0．05）。结论CagA上调胃泌素基因的表达，ERK／MAPK和JAK／STAT信号通路参与了cagA对胃泌素表达的调控。
- 汪苏周建奖单可人赵燕谢渊
- 关键词：幽门螺杆菌胃泌素CAGAERK/MAPKJAK/STAT
- 幽门螺杆菌毒素相关蛋白A对胃泌素基因启动子的调控作用被引量：11
- 2010年
- 目的 研究幽门螺杆菌（HP）毒素相关蛋白A（CagA）对胃泌素基因启动子（GP）的调控作用及其信号传导机制,进一步阐明胃癌发生、发展的相关机制.方法 采用双酶切、聚合酶链反应（PCR）和测序技术,鉴定CagA表达载体pcDNA3.1ZEO（-）/CagA和胃泌素报告基因载体PGL/GP.采用pcDNA3.1ZEO（-）/CagA＋PGL/GP瞬时共转染AGS和SGC-7901细胞,同时用PGL/GP转染AGS和SGC-7901细胞,36 h后用HP感染细胞.在感染与转染细胞的同时,加入JAK2信号通路抑制剂AG490和ERK信号通路抑制剂U0126.以未经处理的胃癌细胞和转染空载体的细胞为对照,通过检测荧光素酶活性,测定转染和感染细胞中GP转录活性的改变.TaqMan（R）实时荧光定量PCR测定胃泌素mRNA的表达.结果 与对照组、pcDNA 3.1 ZEO（-）/CagA＋PGL3/Basic共转染组和pcDNA3.1ZEO（-）＋PGL/GP共转染组相比,pcDNA3.1ZEO（-）/CagA＋PGL/GP共转染组的萤光素酶活性在AGS细胞分别升高到251.3倍、106.1倍和2.4倍,在SGC-7901细胞分别升高到35.8倍、22.7倍和13.4倍（P〈0.05）.与对照组、PGL3/Basic＋HP感染组和PGL/GP转染组相比,PGL/GP转染＋HP感染组的萤光素酶活性在AGS细胞分别升高到1673.2倍、33.5倍和1.4倍,在SGC-7901细胞分别升高到1180.2倍、72.2倍和1.5倍（P〈0.05）.pcDNA3.1ZEO（-）/Cag,A＋PGL/GP共转染组加入信号通路抑制剂AG490或U0126后,萤光素酶活性明显降低,在AGS细胞分别下降了33.0%和95.7%,在SGC-7901细胞分别下降了86.2%和94.8%（P〈0.05）.而在PGL/GP转染＋HP感染组加入AG490或U0126后,萤光素酶活性明显降低,在AGS细胞分别降低了25.8%和24.6%,在SGC-7901细胞分别降低了14.1%和57.3%（P〈0.05）.在AGS和SGC-7901细胞中,HP感染组的胃泌素mRNA表达量分别是对照组的3.0倍和4.5倍,pcDNA3.1ZEO（-）/CagA转染组分别是对照组的10.8倍和10.9倍,是pcDNA3.1ZEO（-）组的2.3倍和16.2倍,差异均有统计学意义（P〈0.05）.结论 CagA能够增强G
- 赵艳谢渊汪苏陈娴周建奖
- 关键词：胃肿瘤胃泌素类CAGA
