赖龙生
- 作品数：4 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 重组L-天冬酰胺酶的鉴定被引量：3
- 2000年
- 目的 :对重组L 天冬酰胺酶进行鉴定。方法 :用基因测序、氨基酸组成分析、N 末端氨基酸测序、胰肽图谱、IEF、分子量、紫外扫描等各种实验手段对重组L 天冬酰胺酶及其天然品进行了全面比较。结果 :重组产品与天然品具有同质性。结论 :重组L 天冬酰胺酶具有较好的应用前景。
- 吴敬吴梧桐赖龙生刘景晶
- 关键词：L-天冬酰胺酶基因测序氨基酸
- 重组L-门冬酰胺酶Ⅱ的提取纯化工艺被引量：14
- 2000年
- 采用渗透振扰破壁法、硫酸铵分级沉淀、乙醇分级沉淀、DEAE-纤维素层析等步骤提取和纯化重组L-门冬酰胺酶,并优化了提纯过程的条件,提取总回收率高于50%,产品纯度经高效毛细管电泳检测为单一峰,具有工业生产前景。
- 吴敬赖龙生刘景晶吴梧桐
- 关键词：纯化
- L-天冬酰胺酶Ⅱ基因工程菌的培养被引量：8
- 1999年
- 为提高L 天冬酰胺酶Ⅱ基因工程菌EscherichiacolipKA/CPU2 10 0 0 9的产酶量 ,采用正交试验法确定了较佳培养条件 ,并优化了发酵工艺。工程菌摇瓶产酶稳定在 190U/ml。 2 5L发酵罐产酶亦高达 180U/ml,发酵周期大大缩短 ,仅 9～ 10h。产酶量比原工艺提高 1倍以上 ,具有较好的工业生产前景。
- 赖龙生吴敬翟源吴梧桐刘景晶
- 关键词：基因工程菌发酵
- 重组L-天冬酰胺酶Ⅱ的中试工艺及其性质的研究被引量：10
- 2000年
- 目的 :通过重组L 天冬酰胺酶Ⅱ中试工艺及其性质的研究 ,旨在获得大量的高纯度产品。方法 :采用 5 0 0L发酵罐发酵 ,对所获得菌体进一步提取纯化 ,产品用还原SDS PAGE(十二烷基硫酸钠 聚丙酰胺凝胶电泳法 ) ,HPLC测定纯度 ,质谱和等电聚焦电泳分别测相对分子质量、等电点 ,并进行了紫外扫描。结果 :发酵液产酶活力达到 2 0 0U·mg-1,提取回收率为80 % ,纯化总回收率为 5 7% ,产品比活为 2 2 0U·ml-1,电泳 30 μg上样量显示一条带 ,HPLC测纯度大于 95 %。该酶Mr为13835 6 ,pI为 4.85 ,紫外最大吸收值在 2 78nm处。 结论 :本研究对实现重组L 天冬酰胺酶Ⅱ的工业化生产有重要意义。
- 吴敬吴梧桐赖龙生刘景晶
- 关键词：SDS-PAGE中试工艺
