覃艳然
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西大学大学生实验技能和科技创新能力训练基金国家自然科学基金广西大学科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一株Nsp2蛋白部分氨基酸自然缺失的猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离和鉴定被引量：4
- 2014年
- 将RT-PCR检测为猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)阳性的肺组织碾磨、过滤后接种MARC-145细胞,在细胞上连续传代,上清传至第二代后能产生细胞病变。通过RT-PCR方法可以检测到释放在细胞上清中PRRSV RNA。间接免疫荧光试验也能检测细胞内PRRSV N蛋白的表达,表明该PRRSV毒株成功地在MARC-145细胞中分离,命名为PRRSV NN1396株。对NN1396分离株GP5基因进行克隆测序分析,结果表明该毒株与NCBI登录的PRRSV GP5核苷酸同源性为62.9%~98.2%,与PRRSV原型毒株VR-2332的同源性为87.9%,与高致病性毒株PRRSV JXA1同源性为98.0%,通过GP5的遗传进化分析发现所分离的PRRSV为北美型PRRSV,且与高致病性PRRSV分布在同一个小分支上;对部分nsp2基因的测序、比对结果表明,该部分基因与NCBI登录的参考序列VR-2332氨基酸同源性为73.0%,与JXA1的同源性为94.8%。NN1396分离株Nsp2蛋白含有高致病性PRRSV特异的1+29个氨基酸的缺失,此外,在缺失29个氨基酸区域的上游,含有连续19个氨基酸缺失。该PRRSV毒株的分离和Nsp2蛋白部分序列的缺失鉴定,为下一步研究Nsp2部分氨基酸缺失对病毒生物学特性影响奠定基础。
- 洪绍锋韦莹韦苗苗覃陆英覃艳然陈樱黄伟坚韦祖樟
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5
- 一株Nsp2蛋白自然缺失123个氨基酸的PRRSV分离和鉴定被引量：15
- 2015年
- 通过RT-PCR方法检测到一份猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性肺组织病料。将该病料研磨、过滤后感染Marc-145细胞,连续传代都能产生明显的细胞病变。为鉴定细胞病变是否由PRRSV引起,抽提细胞总RNA,通过RT-PCR的方法成功的检测到了PRRSV基因。同时用间接免疫荧光方法证实了感染的细胞内有PRRSV N蛋白的表达。将成功分离的毒株命名为GXYL1403株。对分离株的ORF5基因和Nsp2高变区进行扩增、克隆和遗传进化分析,结果发现该毒株Nsp2高变区与NCBI登录的参考序列VR-2332氨基酸同源性为68.6%,JXA1的同源性为90.8%。通过ORF5遗传进化分析该分毒株为北美型PRRSV,且与高致病性PRRSV分布在同一个小分支上。Nsp2序列对比显示该分离株Nsp2蛋白含有高致病性PRRSV特异的1+29个氨基酸的缺失。特别的是,在缺失29个氨基酸区域的上游,含有连续20个氨基酸缺失,在下游更出现了连续73个氨基酸的缺失。该PRRSV毒株的分离和Nsp2蛋白部分序列的缺失鉴定,为下一步研究Nsp2部分氨基酸缺失对病毒生物学特性影响奠定了基础。
- 韦莹洪绍锋覃艳然黄加滨林思远韦苗苗陈樱黄伟坚韦祖樟
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因
- 猪圆环病毒2型广西株的分型及基因重组分析被引量：9
- 2013年
- 为分析广西猪圆环病毒2型(PCV2)流行毒株的类型和特点,为今后预测PCV2进化、探讨合适的防治对策提供理论指导,对广西不同市(县)送检的猪脾、肺、肾、淋巴结及流产胎儿样本进行了PCV2检测及基因克隆和序列分析,并应用重组软件RDP3.0、SimPlot3.5.1软件和BOOTSCAN分别对所得基因序列进行了基因重组情况、相似性和遗传进化分析。结果显示,成功克隆了22株PCV2全基因序列,其中有4株属于PCV2d型,1株属于PCV2e型,其余的为PCV2b型。检测到2个重组序列(GXNN-5,GXNN-7),都归属于PCV2b型,重组都发生在ORF1基因区,重组片段NJ进化树的拓扑结构也发生了变化。证实,广西目前流行的PCV2以PCV2b和PCV2d为多,其中以PCV2b型为主。存在两毒株重组现象,重组亲本序列很可能来源于PCV2b和PCV2d型。
- 郭旋肖雄黎木兰龙凤刘欢薛辉覃艳然侯韶毅黄伟坚
- 关键词：猪圆环病毒2型全基因ORF2基因型基因重组
- 猪伪狂犬病原、血清抗体流行病学调查与gE基因序列分析
- 本研究目的主要是对广西当前猪伪狂犬病流行、分布及危害现状,对全市11个市不同规模猪场进行流行病学调查,并对2013-2014年实验室收集的177份病料及3082份血清进行伪狂犬病原及血清抗体检测.结果显示,177份病料经...
- 秦树英薛辉刘芳覃艳然洪绍锋於庆雄韦祖樟陈樱黄伟坚
- 关键词：猪伪狂犬病流行病学抗体检测基因测序
- 文献传递
- 一株PCV2病毒的分离鉴定与全基因分析
- 本实验对广西贵港市某一规模化猪场疑似PMWS进行发病情况调查,并采集病猪的淋巴结、肾脏等作为病料进行PCR诊断、病毒的分离培养、间接免疫荧光(IFA)鉴定及PCV2全基因的克隆与序列测定,确诊该猪场发生的是由PCV2引起...
- 覃艳然黄伟坚薛辉李法凯赵卫锋秦树英韦莹刘芳韦祖樟陈樱
- 关键词：猪圆环病毒2型病毒分离基因测序
- 文献传递
