范宜强
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金北京市属高等学校人才强教计划资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 杀菌/渗透增强蛋白在小鼠组织器官和细胞中的分布被引量：2
- 2009年
- 目的探讨生理状态和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,杀菌渗透增强蛋白(murine bactericidal/permeability-increasing protein,muBPI)在小鼠组织器官和细胞中的表达情况。方法①实验小鼠分为3组,即LPS未刺激组、LPS刺激组和阴性对照组;②制备小鼠心、肝、脾、肺、肾、胸腺、睾丸、小肠组织切片和骨髓细胞、腹腔灌洗细胞、骨髓源树突状细胞涂片;③采用免疫组化方法检测muBPI在上述组织器官和细胞中的表达。结果①LPS未刺激组小鼠睾丸、小肠、肾脏组织切片和骨髓细胞、腹腔灌洗细胞、骨髓源树突状细胞涂片均呈黄色着染;LPS刺激后上述组织切片和细胞涂片呈棕黄或深棕色着染;阴性对照组呈现非特异微弱黄色背景着染;②LPS未刺激组小鼠肺、肝组织切片呈微弱黄色背景着染;LPS刺激后上述组织切片呈棕黄色着染;阴性对照呈微弱黄色背景着染;③其余器官组织切片在LPS刺激或未刺激组均呈现与阴性对照组相同的非特异微弱黄色背景着染。结论①生理状态下,小鼠睾丸、小肠、肾脏、骨髓细胞、腹腔灌洗细胞和骨髓源树突状细胞可组成性表达BPI蛋白,LPS刺激后BPI蛋白表达量显著增高;②生理状态下,小鼠肺、肝组织不表达BPI蛋白,LPS可诱导上述组织表达BPI蛋白;③其余组织器官在生理状态下和LPS刺激后均不表达BPI蛋白。
- 郭玲许晴吕喆刘振龙范宜强王炜孔庆利安云庆
- 关键词：脂多糖免疫组化
- IL-17BR在人血管内皮细胞和哮喘患者气道黏膜组织中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的检测人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和哮喘患者支气管黏膜组织白细胞介素-17BR(IL-17BR)(IL-25受体)的表达情况,为深入探讨IL-25是否参与哮喘发生发展和气道重塑提供实验依据。方法采用免疫细胞化学方法检测HUVEC能否表达IL-17BR;采用RT-PCR和Real-time PCR检测HUVEC接受IL-25(1μg/L)刺激前后IL-17BR基因表达水平的变化;采用亲和素-生物素复合系统检测哮喘患者支气管活检组织中IL-17BR的表达情况。结果HUVEC可组成性表达IL-17BR,接受IL-25(1μg/L)刺激后,IL-17BR(IL-25R)基因表达水平显著升高;哮喘患者支气管活检组织中有大量IL-17BR阳性细胞,而正常对照人群相应活检组织中仅有极少数IL-17BR阳性细胞。结论HUVEC和支气管黏膜组织可组成性表达IL-17BR,提示人血管内皮细胞和黏膜组织中IL-17BR阳性细胞有可能通过表面IL-17BR与IL-25结合相互作用参与哮喘的发生发展过程。
- 范宜强王炜吕喆许晴孟秋孙英安云庆
- 关键词：人脐静脉内皮细胞白细胞介素-25
- 小鼠BPI N端功能片段(muBPI_(25)蛋白)体外杀菌和中和内毒素作用研究被引量：2
- 2010年
- 目的:建立胞内杀菌和体外中和内毒素实验模型,检测muBPI25目的蛋白对胞内寄生菌的抑杀作用和对内毒素的中和作用。方法:将pcDNA3.1(+)-muBPI36-259质粒导入RAW264.7细胞,用胞内寄生G+/G-菌感染上述细胞建立muBPI25目的蛋白胞内杀菌实验模型;将pSecTag2B-muBPI36-259与双荧光素酶报告基因质粒共转染RAW264.7细胞,建立体外检测muBPI25蛋白中和内毒素实验模型。结果:胞内杀菌实验模型证实muBPI25目的蛋白对G-伤寒杆菌具有抑杀作用;中和内毒素实验模型证实muBPI25目的蛋白对内毒素具有中和作用。结论:首次证实小鼠BPI N端功能片段,即muBPI25目的蛋白对G-菌具有抑杀作用,对其裂解产物内毒素具有中和作用。
- 吕喆王炜范宜强刘振龙孔庆利温铭杰龙军李晨许晴安云庆
- 关键词：RAW264.7细胞内毒素
- 小鼠BPI_(36-259)抗菌蛋白在原核细胞中的表达及其抗血清的制备被引量：8
- 2008年
- 目的采用原核表达系统获得小鼠BPI36-259目的抗菌蛋白,免疫家兔制备目的蛋白特异性抗血清。方法利用生物信息学方法预测小鼠BPI功能片段,构建pUC57-muBPI1-281质粒;PCR扩增获得mu BPI36-259基因片段,构建pET28a-mu BPI36-259重组质粒;用IPTG诱导重组质粒转化的E.coli BL21(DE3)感受态细胞,获得以包涵体形式表达为主的mu BPI36-259目的蛋白;用变性目的蛋白免疫家兔获得兔抗鼠BPI36-259蛋白特异性抗血清;用间接ELISA法检测血清抗体特异性及其效价。结果成功构建了pET28a-mu BPI36-259重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)获得以包涵体表达形式为主的目的蛋白;用变性目的蛋白免疫家兔获得小鼠BPI36-259蛋白特异性抗血清(效价1∶10000)。结论在原核细胞中成功获得了以包涵体表达形式为主的抗菌蛋白,免疫家兔获得的特异性抗血清可用于小鼠BPI36-259目的抗菌蛋白的检测。
- 冯颖李丽龙军范宜强刘振龙孔庆利吕喆王炜安云庆
- 关键词：E.COLIBL21(DE3)
- IL-25在支气管哮喘中的作用被引量：4
- 2008年
- 白介素25(Interleukin-25,IL-25)是细胞因子IL-17家族的成员之一,主要由活化的Th细胞和肥大细胞所分泌。IL-25能够诱导释放Th2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-13,炎性细胞因子IL-6,Th1型趋化因子CXCL10、CXCL9、CCL5的产生,导致嗜酸性粒细胞的浸润,在支气管哮喘的发病中起重要作用,本文就此作一综述。
- 范宜强王炜蔡怜民
- 关键词：IL-25嗜酸性粒细胞支气管哮喘
