苑锡铜
- 作品数：13 被引量：125H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院疾病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌的基因分型与耐药性分析被引量：8
- 2012年
- 目的了解尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌的耐药和基因分型遗传特征，指导尿路感染的临床用药与控制医院感染。方法选取中国中医研究院望京医院2006～2010年医院分离的76株尿路感染大肠埃希菌，通过药敏试验分析这些菌株对17种抗生素的耐药性，用rep-PCR对菌株进行分型。结果选取的76株尿路感染大肠埃希菌对哌拉西林、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢唑啉、头孢呋辛、氨苄西林／舒巴坦、头孢噻肟与头孢曲松的耐药率高达40％以上，依次是86％，68％，64％，59％，59％，41％，41％和40％。17种抗菌药物中，亚胺培南与美洛培南的耐药率最低，敏感率为100％，与ES—BLs阴性的大肠埃希菌相比，尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌有14种抗菌药物的耐药率高。76株尿路感染大肠埃希菌分为三个大的组，其中A组敏感性最高，B组次之，C组耐药性最强，舍有ESBLs的尿路感染大肠埃希菌主要分布在C组和B组。rep-PCR可以把76株菌分为68个基因型，四个组，分别为I，Ⅱ，Ⅲ和Ⅳ，分别包含25，14，20和17株细菌。不同基因型的菌株在耐药性上没有显著差异。结论尿路感染大肠埃希菌对常见的抗生素产生不同程度的耐药性，含有ESBLs的尿路感染大肠埃希菌的耐药性更高，这些菌株的耐药性可能是通过水平转移获得的。临床上应严格按照科学的用药方案进行抗生素使用，及时掌控ESBLs的尿路致病性大肠埃希菌对抗生素耐药的变化，以减少耐药性菌株的产生，降低耐药菌的危害。
- 刘世巍徐杰张正芳王立平高光俊王玉飞苑锡铜黄留玉崔明全张宁陈永德陈泽良郭洁
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶基因分型耐药性
- 耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌的耐药谱分析被引量：3
- 2012年
- 目的了解耐碳青霉烯抗生素鲍曼不动杆菌的抗生素耐药情况，指导临床合理用药。方法选取中国中医研究院望京医院2008-2010年期间临床和门诊患者样本的耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌分离株，通过药敏实验分析这些菌株时15种常见抗生素的耐药性。结果从标本类型分布看，最主要的是痰液标本，共110株（88％），其次是分泌物共9株（7．2％）和2株自导管（1．6％）。从科室统计分析发现，ICU分离到的鲍曼不动杆菌数最多，68株；其次是针灸科，分离的菌株是15株；神经外科、CCU、普通外科、心内科、内分泌科、呼吸科、创伤一科，分别分离到14，11，7，4，3，2和1株。选取的125株鲍曼不动杆菌对哌拉西林、美罗培南、替卡西林／克拉维酸、哌拉西林／三唑巴坦、环丙沙星、亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星、妥布霉素、头孢曲松和头孢他啶耐药率高达90％以上，依次为100％。99．2％，99．2％，98．4％，96．8％，96％，96％，94．4％，93．6％，92％和91．2％。其次是氨曲南、左氧氟沙星和头孢哌酮／舒巴克坦，耐药率依次是72．8％，64％和30．4％，对多黏菌素B的耐药率最低，仅为0．8％。结论该院耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌对大多数种类的抗生素均有较高的耐药性，仅对少数几种抗生素表现为敏感，临床上应严格按照科学的用药方案进行抗生素使用，防治耐药性的进一步产生和院内传播。
- 郭洁徐杰王丽丽王玉飞苑锡铜袁静宋宏彬黄留玉张宁陈泽良陈永德刘世巍
- 关键词：鲍曼不动杆菌耐药谱临床用药
- 利用自杀载体构建布鲁氏菌hfq表位标记菌株被引量：1
- 2012年
- 目的:建立一种利用自杀载体构建布鲁氏菌hfq表位标记菌株的方法。方法:在hfq的反向引物带上FLAG或HIS标签序列,以布鲁氏菌Brucella melitensis 16M为模板扩增出3'端带有标签的hfq标记盒。将其直接与布鲁氏菌的自杀载体pMD18-T vector连接,获得带有标签的标记载体,将载体转入布鲁氏菌感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得表位标签与目的基因C末端融合的重组子。利用RT-PCR和Western blot分析C末端融合了表位标签的目的蛋白的转录和表达的情况。结果:获得了布鲁氏菌的表位标记菌株16M-T-HfqFLAG和16M-T-HfqHIS。RT-PCR实验结果表明带有标签的hfq基因可以转录,Western blot实验结果证实利用针对FLAG或HIS标签的抗体能够检测到Hfq蛋白的表达。结论:利用自杀载体可以快速构建布鲁氏菌的表位标记菌株,这不仅为Hfq的功能研究奠定了基础,也为布鲁氏菌的基因功能研究提供了一个有价值的研究手段。
- 崔明全徐杰张婷婷王同坤尚伟陈泽良袁静杜昕颖汪舟佳柯跃华钟志军苑锡铜黄留玉彭广能王玉飞
- 关键词：布鲁氏菌HFQ
- 布鲁氏菌自杀载体的改建及其在突变株构建中的应用被引量：3
- 2007年
- 目的:改建布鲁氏菌自杀载体.方法:用NdeⅠ将pKOBEG-SacB质粒中的反向筛选基因SacB切下来,与同样酶切处理的pUC19质粒连接,得到pUC19-SacB,经测序和蔗糖筛选实验证实.结果:成功将SacB从pKOBEG-SacB中切下来并插入到pUC19质粒中,构建得到了pUC19- SacB.测序和蔗糖筛选实验证实.插入的sacB基因具有较好的反筛功能.我们利用该质粒,成功的构建了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统的突变株,改建的载体能高效的应用于布鲁氏菌染色体的精确修饰.结论:构建了一个新的自杀质粒pUC19-SacB,该质粒能用于布鲁氏菌无痕缺失突变株的构建.
- 王玉飞陈泽良乔凤汪舟佳杜昕颖苑锡铜黄留玉
- 关键词：布鲁氏菌
- PCR产物直接测序快速识别病原菌被引量：3
- 2008年
- [目的]结合PCR和DNA测序技术,建立一种适用于传染性疾病预防控制的快速准确地识别病原细菌的分子检测方法。[方法]以布鲁氏菌为例,利用PCR分别从纯培养物、模拟标本中扩增布鲁氏菌16S和31kd基因,并对扩增产物测序,与数据库进行比对,根据比对结果确定扩增产物是否来源于布氏菌。[结果]从纯培养物和模拟标本成功扩增特异产物,测定序列与数据库比对,能很快准确确定病原的种类,优于单纯的PCR扩增。[结论]结合PCR扩增和产物测序的分子检测方法切实可行,为疾病预防控制体系中病原菌的快速识别提供了一个快速、高效和准确的方法。
- 陈泽良王玉飞赵瑾赵红庆苑锡铜贾雷立杜昕颖刘京梅宋宏彬张伶黄留玉
- 关键词：布鲁氏菌PCRDNA测序病原细菌
- 125株耐碳青霉烯类抗菌药物鲍氏不动杆菌多位点序列分型被引量：5
- 2012年
- 目的了解医院耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的遗传特征。方法选取耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌分离株,进行多位点序列分型(MLST)。结果选取的125株耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌,7个看家基因中6个等位基因数为1,gpi的等位基因数为3,可变位点数为3;125株菌MLST分析,3个ST型,其中ST 75型有82株,ST92型有20株,ST138型有23株,ST75、ST92与ST138属于同一克隆群。结论医院耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌相对进化较慢,对多种抗菌药物耐药,应严格消毒措施及无菌操作,减少由耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌引起的医院感染;减少抗菌药物的使用,减缓泛耐药菌的产生。
- 徐杰郭洁王丽丽王玉飞苑锡铜袁静宋宏彬黄留玉张宁陈永德陈泽良刘世巍
- 关键词：鲍氏不动杆菌多位点序列分型
- 福氏志贺菌Ⅲ型分泌系统效应子IpaH4．5功能的初步研究被引量：3
- 2009年
- 目的:IpaH家族是福氏志贺菌Ⅲ型分泌系统(T3SS)效应子的成员,但功能不清,特别是对IpaH4.5的研究未见报道。本研究拟探讨IpaH4.5的功能。方法:克隆了福氏志贺菌2a 301株的IpaH4.5基因,构建了带Flag和GFP标签的IpaH4.5真核表达载体。通过Western印迹和共聚焦确定IpaH4.5在真核细胞293T中的表达和定位,通过报道基因的方法观察IpaH4.5对宿主细胞NF-κB途径的影响。结果:Western印迹证实IpaH4.5在真核细胞中有表达,激光共聚焦确定IpaH4.5在真核细胞中定位于细胞膜和细胞核,通过报道基因观察到它可以抑制宿主细胞的NF-κB途径。结论:发现IpaH4.5可以抑制NF-κB途径,为进一步研究IpaH4.5的功能奠定了基础。
- 王芳王芳马红芳何湘苑锡铜姜铮刘大伟赵江丽赵红庆袁静钟辉
- 关键词：福氏志贺菌宿主细胞NF-ΚB途径
- 多重PCR技术在病原检测中的应用被引量：54
- 2007年
- 多重PCR能够同时扩增不同片段,具有普通PCR方法不可比拟的优势。简要论述了多重PCR在细菌病原体的检测、病毒病原体的检测、支原体和衣原体及寄生虫的检测、微生物耐药性检测等方面的应用,分析了多重PCR的影响因素及条件优化,并进一步综述了多重PCR的应用前景。
- 赵红庆苑锡铜黄留玉
- 关键词：多重PCR病原影响因素
- 尿路致病性大肠杆菌分离株的耐药性与REP-PCR基因分型
- 2013年
- 目的:研究尿路致病性大肠杆菌(UPEC)分离株的耐药性和基因分型,为UPEC感染的防治及分子流行病学研究提供实验依据。方法:采用K-B法测定2006—2008年从望京医院病人尿液标本分离的97株UPEC对17种抗生素的敏感性;用基因外重复回文序列PCR(REP-PCR)方法对分离株基因分型。将不同基因型的菌株与它们对17种抗生素的耐药性进行比较,了解分离株的基因型和耐药性的关系。结果:分离株对PIP、LVX和GEN的耐药率高(占65%以上),对IMP和MEM敏感。93.81%的细菌表现为多重耐药。菌株分为了4个耐药组,其中A组和B组耐药性强,D组耐药性弱;REP-PCR方法将97株UPEC分离株被分为4个群,被命名为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。各群在A组的耐药率最高,而I群又在A组中所占比例最高。结论:UPEC分离株广泛耐药,各基因型的菌株在耐药性上有一定规律性变化,提示耐药性在菌株之间的传递。亲缘关系近的菌株,表现出相似的耐药谱。应合理使用抗生素,以防止耐药性的产生和快速传递。
- 张正芳刘世巍徐杰高光俊王璐璐李卓林王立平苑锡铜王玉飞柯跃华李竞陈泽良
- 关键词：UPECREP-PCR耐药性
- 以克隆载体为自杀载体快速构建布鲁氏菌的无痕缺失突变株被引量：11
- 2007年
- 构建突变株是病原微生物致病机理研究的重要手段。以往研究中布鲁氏菌的无痕缺失突变株都采用传统的自杀载体来构建,效率低下。首先对布鲁氏菌的电击转化条件进行了优化,然后选择含有反向筛选基因sacB的pEX18Gm质粒作为自杀载体,构建了缺失Ⅳ型启动子区的布鲁氏菌无痕缺失突变株。这不仅为构建布鲁氏菌的突变株提供了一个快速有效的技术平台,也为深入研究Ⅳ型分泌系统的功能奠定了基础。
- 王玉飞陈泽良赵红庆苑锡铜黄留玉张伶刘京梅宋宏彬
- 关键词：布鲁氏菌
