陈泽良
- 作品数：68 被引量：379H指数：12
- 供职机构：军事医学科学院疾病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌的基因分型与耐药性分析被引量：8
- 2012年
- 目的了解尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌的耐药和基因分型遗传特征，指导尿路感染的临床用药与控制医院感染。方法选取中国中医研究院望京医院2006～2010年医院分离的76株尿路感染大肠埃希菌，通过药敏试验分析这些菌株对17种抗生素的耐药性，用rep-PCR对菌株进行分型。结果选取的76株尿路感染大肠埃希菌对哌拉西林、庆大霉素、左氧氟沙星、头孢唑啉、头孢呋辛、氨苄西林／舒巴坦、头孢噻肟与头孢曲松的耐药率高达40％以上，依次是86％，68％，64％，59％，59％，41％，41％和40％。17种抗菌药物中，亚胺培南与美洛培南的耐药率最低，敏感率为100％，与ES—BLs阴性的大肠埃希菌相比，尿路感染ESBLs阳性大肠埃希菌有14种抗菌药物的耐药率高。76株尿路感染大肠埃希菌分为三个大的组，其中A组敏感性最高，B组次之，C组耐药性最强，舍有ESBLs的尿路感染大肠埃希菌主要分布在C组和B组。rep-PCR可以把76株菌分为68个基因型，四个组，分别为I，Ⅱ，Ⅲ和Ⅳ，分别包含25，14，20和17株细菌。不同基因型的菌株在耐药性上没有显著差异。结论尿路感染大肠埃希菌对常见的抗生素产生不同程度的耐药性，含有ESBLs的尿路感染大肠埃希菌的耐药性更高，这些菌株的耐药性可能是通过水平转移获得的。临床上应严格按照科学的用药方案进行抗生素使用，及时掌控ESBLs的尿路致病性大肠埃希菌对抗生素耐药的变化，以减少耐药性菌株的产生，降低耐药菌的危害。
- 刘世巍徐杰张正芳王立平高光俊王玉飞苑锡铜黄留玉崔明全张宁陈永德陈泽良郭洁
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶基因分型耐药性
- 北京某医院洗手方式调查及消毒效果评价被引量：14
- 2010年
- 目的了解医院医务人员洗手方式和频率以及手消毒效果。方法采用问卷调查的方法对该医院医务人员手卫生方法及其消毒效果进行了调查。结果该医院门诊医务人员工作之前洗手执行率为47%,病房医务人员洗手执行率为46%,门诊和病房医务人员工作后洗手执行率均达到98%。有90%医务人员采用肥皂洗手和洗手液洗手,只有10%医务人员仅用流水洗手。用肥皂和洗手液洗手除菌率可达到90%以上,仅用流水洗手除菌率只有65%。结论该医院医务人员工作之前洗手执行率较低,仅用流水洗手除菌效果较差,该医院需要规范洗手方法和手卫生质量监测。
- 刘世巍张宁罗燕楠陈泽良李同侠王甸红李伟王世埩邢荣
- 关键词：洗手液医务人员手卫生洗手方法消毒效果
- 布氏杆菌病致病因子及防治研究进展被引量：14
- 2008年
- 布氏杆菌是引起动物布氏杆菌病的病原。这类胞内病原菌表达一系列的因子,包括脂多糖类、毒力调节蛋白和磷酸卵磷酯等来保证其毒力。有些毒力因子是侵袭宿主所必须的,而其他的毒力因子对逃脱宿主的清除是必须的。它们允许布氏杆菌在复制泡内生存和增殖,逃脱宿主免疫系统的检测。了解其毒力可为疫苗研制提供依据,也可促使新的抗生素研制。在动物布病防治中生产兽用疫苗来预防该病,但还没有合适的疫苗防治人布病,可能是人布病复杂的病理生理学不同于动物模型。本文就布氏杆菌毒力因子以及如何操纵在宿主细胞中运输进行综述。
- 钟志军陈泽良黄克和乔凤王玉飞赵瑾汪舟佳徐杰曲勍黄留玉
- 关键词：布氏杆菌病致病因子
- 单克隆抗体修饰玻璃表面制备蛋白质芯片的初步研究
- 2005年
- 目的 探讨应用单克隆抗体修饰玻璃表面制备蛋白质芯片的方法。方法 用不同浓度的抗6XHis单克隆抗体修饰玻璃表面,从蛋白质固定效率和固定蛋白质的反应活性两个方面,对修饰效果进行评价。结果 初步观察到单克隆抗体修饰玻片对蛋白质的固定量较醛基化修饰的玻片没有明显增加,但其固定蛋白质中有反应活性的蛋白质的比例较高。结论 单克隆抗体修饰的玻片也适合于制备蛋白质芯片。
- 江凌晓郭兆彪陈泽良王津王红霞俞守义杨瑞馥
- 关键词：蛋白质芯片单克隆抗体表面修饰
- 利用自杀载体构建布鲁氏菌hfq表位标记菌株被引量：1
- 2012年
- 目的:建立一种利用自杀载体构建布鲁氏菌hfq表位标记菌株的方法。方法:在hfq的反向引物带上FLAG或HIS标签序列,以布鲁氏菌Brucella melitensis 16M为模板扩增出3'端带有标签的hfq标记盒。将其直接与布鲁氏菌的自杀载体pMD18-T vector连接,获得带有标签的标记载体,将载体转入布鲁氏菌感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得表位标签与目的基因C末端融合的重组子。利用RT-PCR和Western blot分析C末端融合了表位标签的目的蛋白的转录和表达的情况。结果:获得了布鲁氏菌的表位标记菌株16M-T-HfqFLAG和16M-T-HfqHIS。RT-PCR实验结果表明带有标签的hfq基因可以转录,Western blot实验结果证实利用针对FLAG或HIS标签的抗体能够检测到Hfq蛋白的表达。结论:利用自杀载体可以快速构建布鲁氏菌的表位标记菌株,这不仅为Hfq的功能研究奠定了基础,也为布鲁氏菌的基因功能研究提供了一个有价值的研究手段。
- 崔明全徐杰张婷婷王同坤尚伟陈泽良袁静杜昕颖汪舟佳柯跃华钟志军苑锡铜黄留玉彭广能王玉飞
- 关键词：布鲁氏菌HFQ
- 布鲁菌进化和分类学研究进展被引量：21
- 2011年
- 布鲁菌属革兰氏阴性兼性胞内寄生菌,能感染多种宿主动物和人。该属可分为6个典型种,包括羊种、牛种、猪种、沙林鼠种、绵羊附睾种以及犬种布鲁菌等。此分类是基于其致病性以及宿主偏好性的差异划分。尽管6个种通过传统表型试验能区分,但布鲁菌种内采用DNA-DNA杂交证明DNA同源性高度一致(相似性大于90%)。因此有人提议布鲁菌由单一种组成,即布鲁菌属中只有羊种布鲁菌,其他种都是羊种菌的生物亚型之一。然而基于其他分子技术的基因分型表明其DNA多态性表现明显,说明目前对这个种的分型还是比较准确。而最近分离的海洋种布鲁氏菌分离株(鳍型和鲸型)采用传统分型标准和一些特异的分子标记也证明这种分型比较正确。本文对目前布鲁菌种属进化和分类学进行综述,希望对研究其进化和分类有所帮助。
- 钟志军于爽徐杰王玉飞白耀霞陈燕芬付思美王同坤汪舟佳杜昕颖彭广能黄克和陈泽良
- 关键词：布鲁氏菌进化分类学
- 布鲁氏菌自杀载体的改建及其在突变株构建中的应用被引量：3
- 2007年
- 目的:改建布鲁氏菌自杀载体.方法:用NdeⅠ将pKOBEG-SacB质粒中的反向筛选基因SacB切下来,与同样酶切处理的pUC19质粒连接,得到pUC19-SacB,经测序和蔗糖筛选实验证实.结果:成功将SacB从pKOBEG-SacB中切下来并插入到pUC19质粒中,构建得到了pUC19- SacB.测序和蔗糖筛选实验证实.插入的sacB基因具有较好的反筛功能.我们利用该质粒,成功的构建了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统的突变株,改建的载体能高效的应用于布鲁氏菌染色体的精确修饰.结论:构建了一个新的自杀质粒pUC19-SacB,该质粒能用于布鲁氏菌无痕缺失突变株的构建.
- 王玉飞陈泽良乔凤汪舟佳杜昕颖苑锡铜黄留玉
- 关键词：布鲁氏菌
- O1群霍乱弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立被引量：5
- 2010年
- 目的:建立针对O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,并进行模拟粪便标本的检测评价。方法:根据O1群霍乱弧菌O抗原编码基因rfb的特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立检测O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,对所建立的方法分别进行实验室内的灵敏度及特异性评价;将O1群霍乱弧菌灭活菌株悬液倍比稀释后与健康成人新鲜粪便混匀,制备成模拟带菌者粪便标本,提取DNA,进行Taq-Man PCR检测,用以评价该方法。结果:建立了快速检测O1群霍乱弧菌的实时荧光定量TaqMan PCR方法,灵敏度为每反应体系104拷贝;该方法对其他14种肠道菌DNA没有扩增;该方法对模拟粪便标本的检测灵敏度为每反应体系102 CFU。结论:建立了一种快速、高效检测O1群霍乱弧菌的荧光定量PCR检测方法,该方法可用于O1群霍乱弧菌临床粪便标本的检测。
- 杜昕颖孙宏迪王玉飞陈泽良张伶宋宏彬孙岩松黄留玉
- 关键词：O1群霍乱弧菌荧光定量PCR
- 布病患者血清microRNA-146a表达及其与抗体滴度的关系研究被引量：3
- 2016年
- 目的:研究microRNA-146a在布病患者血清中表达规律及其与血清滴度的关系。方法:采用定量PCR方法,测定布病患者和健康人血清中miR-146a的表达,并分析表达水平与血清抗体水平、就诊时间等彼此的相关性。结果:利用阳性参考品建立了miR-146a定量检测工作曲线,对20例布病阳性病例和20例正常人血清miR-146a进行了检测,布病患者血清中miR-146a显著低于正常人(P<0.001),miR-146a的水平与血清抗体滴度呈负相关(P<0.05)。结论:布鲁氏菌感染后患者血清中miR-146a表达被抑制,并且患者血清抗体滴度越高,抑制程度越高。
- 于玖轩徐晓阳雷霜霜陈泽良王季秋王大力郑源强石艳春
- 关键词：布病血清抗体滴度
- PCR产物直接测序快速识别病原菌被引量：2
- 2008年
- [目的]结合PCR和DNA测序技术,建立一种适用于传染性疾病预防控制的快速准确地识别病原细菌的分子检测方法。[方法]以布鲁氏菌为例,利用PCR分别从纯培养物、模拟标本中扩增布鲁氏菌16S和31kd基因,并对扩增产物测序,与数据库进行比对,根据比对结果确定扩增产物是否来源于布氏菌。[结果]从纯培养物和模拟标本成功扩增特异产物,测定序列与数据库比对,能很快准确确定病原的种类,优于单纯的PCR扩增。[结论]结合PCR扩增和产物测序的分子检测方法切实可行,为疾病预防控制体系中病原菌的快速识别提供了一个快速、高效和准确的方法。
- 陈泽良王玉飞赵瑾赵红庆苑锡铜贾雷立杜昕颖刘京梅宋宏彬张伶黄留玉
- 关键词：布鲁氏菌PCRDNA测序病原细菌
