胡凡
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 供职机构：湖北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金国家自然科学基金河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程更多>>
- 类弹性蛋白ELPs融合表达在抗菌肽分离纯化中的应用(简报)被引量：6
- 2008年
- 抗菌肽（Antimicrobial polypeptides，AMPs）是两性带电分子，广泛存在于多种生物体内，具有广谱抗菌、调节免疫、抑制肿瘤等多种生物学功能。一些抗菌肽不仅对耐药性的病原细菌有很好的抑制和杀灭作用，而且还对真菌、原生动物、病毒等有很好的抑制作用。近年研究还发现，某些抗菌肽还可选择性杀伤肿瘤细胞，
- 胡凡柯涛李鑫惠丰立徐丽马向东马立新
- 关键词：抗菌肽抑菌活性
- 抗菌肽高效克隆和准确表达研究
- 抗菌肽(Antimicrobial polypeptides，AMPS)是两性带电分子，广泛存在于多种生物体内，具有广谱抗菌、调节免疫、抑制肿瘤等多种生物学功能。一些抗菌肽不仅对耐药性的病原细菌有很好的抑制和杀灭作用，而...
- 马向东胡凡张贞梁苏孙婧马立新
- 关键词：抗菌肽基因工程克隆技术
- 牛凝乳酶原基因的合成及其在乳酸克鲁维酵母中的表达被引量：7
- 2010年
- 凝乳酶在奶酪加工中应用广泛,为获得高活性的凝乳酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母为宿主,首次对经密码子优化的牛凝乳酶原基因进行表达。利用DNAWorks3.0软件辅助设计,用两步PCR法合成了小牛凝乳酶原基因(GenBank Accession No.AA30448)。将该基因插入酵母表达载体pKLAC1,构建了重组载体pKLAC1-Prochy,并用电脉冲法将线性化的重组质粒转化到乳酸克鲁维酵母GG799中。通过含1%酪蛋白的YEPD平板活性筛选,PCR鉴定,最后获得了一株多拷贝整合的基因工程菌chy1。该菌株可分泌表达牛凝乳酶原,经SDS-PAGE分析,证明重组牛凝乳酶原的分子量约为41kDa,符合预期大小,酸化处理后为36kDa,证明可以正确自我剪切。液体培养96h后,酶活最高达到99.67SU/mL。分别以半乳糖和葡萄糖为碳源的条件下表达,其酶活性差异不大,说明在发酵期间,可以不经过半乳糖诱导即可产生高水平的牛凝乳酶原产物。该工程菌的获得为进一步优化产酶条件及放大工艺提供了条件,并为凝乳酶的工业化生产奠定了基础。
- 袁伟柯涛杜敏华褚学英胡凡惠丰立
- 关键词：乳酸克鲁维酵母基因合成密码子优化
- 一种用于高效筛选极端酶突变基因的质粒营救法被引量：1
- 2009年
- 为简化定向进化筛选突变耐高温和耐酸碱酶等极端酶的繁复工作，建立了一种快速质粒营救法，可直接从加热处理的平板中回收携带有突变基因的质粒，用于进一步的随机突变基因的筛选和基因测序等。研究了在不同的热处理条件下的质粒营救效率，获得了质粒营救转化效率最高的处理条件。结果表明，本方法适于质粒大小在2-10kb范围的载体，可用于平板筛选最适酶活性温度在60-100℃、pH4-10的突变体酶，并可将一轮的筛选过程缩短1-2d。
- 柯涛胡凡石晴芳马向东
- 关键词：定向进化极端酶
