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分光光度法测定金黄色葡萄球菌菌液浓度方法的建立被引量：21: 2014年; 为了建立一种通过吸光度测定,能够快速准确检测奶牛乳房炎多联苗中金黄色葡萄球菌抗原浓度的方法。用血平板培养至生长高峰期的金黄色葡萄球菌用生理盐水将菌苔洗下,稀释成不同浓度的细菌悬浮液,然后用平板计数法测定不同浓度菌液的活菌数,同时在波长450nm条件下测定其相应的吸光度,进而研究两者之间的相关性。结果表明,金黄色葡萄球菌的细菌数与其吸光度呈直线线性相关。建立了金黄色葡萄球菌菌液浓度与吸光度之间的回归方程式y=8.410 6x-0.272 6(R2=0.975 8)。通过测定细菌悬浮液的吸光度,可以快速计算出该菌的菌液浓度。为了验证该方法的准确性,通过平板培养了4批金黄色葡萄球菌菌液,进行了传统平板计数方法和吸光度法的比较和验证,证明吸光度测定法更为简单、快速和准确,且优于平板计数法,可以作为奶牛乳房炎多联苗中金黄色葡萄球菌抗原浓度的测定方法。; 肖敏杨峰王旭荣罗金印李新圃陈炅然李宏胜; 关键词：奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌活菌数吸光度

奶牛乳房炎无乳链球菌活菌数与吸光度之间相关性研究被引量：10: 2014年; 为了建立一种通过吸光度测定能够快速准确检测奶牛乳房炎疫苗中无乳链球菌抗原浓度的方法,本试验将血平板培养的无乳链球菌用生理盐水将菌苔洗下,稀释成不同浓度的细菌悬浮液,然后用平板计数法测定不同浓度菌液的活菌数,同时测定其相应的吸光度,进而研究二者之间的相关性,建立标准曲线。结果表明,无乳链球菌的活菌数与其吸光度呈直线线性相关,无乳链球菌菌液浓度与吸光度之间的回归方程为y=7.5861x-0.0805,R2=0.9735,通过测定细菌悬浮液的吸光度,可以快速计算出该菌的菌液浓度。笔者对发酵罐培养的5批无乳链球菌菌液进行了吸光度测定和传统平板计数方法的比较及验证,证明了吸光度测定法优于平板计数法,具有简单、快速、准确的特点。; 肖敏杨峰王旭荣罗金印李新圃贾宁李宏胜; 关键词：奶牛乳房炎无乳链球菌活菌数吸光度

猪支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ基因的克隆表达及多抗血清的制备被引量：1: 2018年; 为研究猪源性支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ的功能及免疫原性，本研究参照GenBank中支气管败血波氏杆菌S798株的外膜蛋白OmF·Q基因序列设计引物，通过PCR扩增技术获得OmpQ基因，测序后进行同源性分析，并将其克隆至pET-28a（＋）载体，构建重组质粒pET-OmpQ，转化大肠杆菌Transetta（DE3），经IPTG诱导表达纯化目的蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体，Western blot分析其免疫原性。结果显示，表达蛋白相对分子质量大小约为36000，且以包涵体的形式存在。间接ELISA和Western blot结果表明，表达产物具有较好的免疫原性。研究结果为支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ的后续生物学功能研究奠定基础，并为支气管败血波氏杆菌的快速诊断提供数据支持。; 宁建刚冯娜肖敏高翔温峰琴包世俊邢小勇胡永浩; 关键词：支气管败血波氏杆菌多克隆抗体

牛源肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定及遗传进化分析被引量：25: 2016年; 为了对兰州市榆中县某奶牛场犊牛疑似肺炎克雷伯氏菌感染病例进行确诊,本研究采集病死犊牛的脏器组织并从中分离到1株革兰阴性短杆菌,进而对分离菌进行了生化鉴定、16S r RN A鉴定及khe基因鉴定,在此基础上,完成了分离菌的致病性试验、耐药性分析及主要毒力基因的遗传进化分析。结果显示,除H2S试验外,分离菌生化特性均符合肺炎克雷伯氏菌的生化反应特性,其16S r RNA及khe基因序列与G enB ank中肺炎克雷伯氏菌株之间的同源性均高达99%,因此,可将分离菌确定为肺炎克雷伯氏菌,并将其命名为YZ2015。动物试验及耐药性试验结果表明,分离菌具有较强的致病性和多重耐药性。遗传进化分析表明,分离菌的fim H、mrk D及wab G基因与肺炎克雷伯氏菌其他菌株具有很高的同源性,其核酸序列相似性高达95%以上。; 冯娜高翔肖敏宁建刚邢小勇包世俊; 关键词：肺炎克雷伯氏菌药敏试验

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌基因分型及毒力基因和耐药基因研究: 奶牛乳房炎是全世界范围内奶牛的常见病和多发病之一,其病因复杂,难以防治,不仅给奶牛业带来了巨大的经济损失,还危害到人类健康.利用疫苗来预防和控制奶牛乳房炎是一种安全有效的方法.本研究为建立有关奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌新的...; 肖敏贾宁李宏胜; 关键词：奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌基因分型 PCR 毒力基因耐药基因

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肖敏