肖敏
- 作品数：16 被引量：43H指数：4
- 供职机构：温州医学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省教育厅科研计划浙江省科技厅实验动物科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- HPLC法检测大鼠血浆中吡非尼酮的浓度及其药动学研究被引量：2
- 2012年
- 目的:建立大鼠血浆吡非尼酮检测的高效液相色谱方法,研究吡非尼酮的药代动力学。方法:血浆经乙酸乙酯,采用ZORBAX SB-C18色谱柱;流动相为乙腈-水-0.1%TFA(三氟乙酸),流速为1.0 mL·min-1;检测波长为318(0～8 min)、246nm(8～10 min)。6只雄性大鼠单剂量灌胃给予15 mg.kg-1吡非尼酮,分别在给药后多点尾静脉采血;用该方法检测血浆中吡非尼酮的浓度。用DAS(数据采集系统)计算药代动力学参数。结果:吡非尼酮浓度在0.025～4.00 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 9);定量下限为0.025 mg·L-1;低、中、高3个浓度的相对回收率分别为(100.40±4.66)%、(102.17±4.02)%和(101.12±2.89)%;日内RSD分别为4.6%,3.9%,2.9%,日间RSD分别为5.5%,4.8%,3.7%。大鼠吡非尼酮灌胃后,血浆吡非尼酮在0.39 h达到1.69 mg·L-1的峰值浓度,血浆半衰期为2.21 h。吡非尼酮在大鼠体内符合一级吸收的二室模型。结论:本方法准确可靠、简便快速,适用于大鼠血浆吡非尼酮浓度的测定及其药代动力学研究。
- 肖敏李军伟孙未罗顺斌胡国新
- 关键词：吡非尼酮生物样品血药浓度
- 铁过负荷对大鼠眼、泪腺中铁血黄素的沉积及转铁蛋白表达的影响
- 2010年
- 通过饲喂高铁饲料、腹腔注射或静脉注射多糖铁复合物的方法复制SD(Sprague Dawley)大鼠(Rattus norregicus)的铁过负荷模型。取动物的眼和泪腺组织染色显微观察发现,静脉注射多糖铁复合物大鼠眼巩膜、虹膜、睫状体、脉络膜间质细胞及泪腺小叶间结缔组织中巨噬细胞铁血黄素沉积明显;而腹腔注射多糖铁复合物或饲喂高铁饲料大鼠的眼和泪腺中铁血黄素沉积较少或未见沉积。不同方法造成的铁过负荷大鼠眼和泪腺组织中均未见转铁蛋白的表达。结果表明,铁血黄素在眼及泪腺的沉着很可能是眼晶状体混浊和眼底血管样条纹产生的主要原因。
- 刘重斌肖敏叶光华
- 关键词：泪腺转铁蛋白
- 重复性“饥饿/再投喂”对高脂饮食诱导肥胖大鼠的作用及其机制研究
- 2011年
- 目的探究重复性"饥饿/再投喂"饲喂方式处理对高脂饮食诱导肥胖大鼠的作用及其机制。方法设计"重复性饥饿1 d/再投喂1 d,持续6 w"的方式(基础饲料)饲喂模型动物,6 w末实验组(RFR)大鼠改为每天喂以高脂饲料(RFR-CF/HF),并将对照组随机分为两组,一组饲喂高脂饲料(HF),另一组饲喂基础饲料(CF)至第12 w。分别于实验第6 w和第12 w末处死动物,比较各组大鼠体重、Lee’s指数和脂体比的差异,检测血脂、血清中生长激素、甲状腺素、瘦素、胰岛素、血浆促肾上腺皮质激素及下丘脑匀浆神经肽Y(NPY)含量,应用RT-PCR法检测下丘脑NPY、阿片黑皮素原(POMC)mRNA的表达水平。结果 RFR-LF/HF组Lee’s指数、脂体比、血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、瘦素和胰岛素水平均显著低于HF组而高于CF组,下丘脑匀浆NPY含量和NPY mRNA表达水平显著高于HF组和CF组,POMC mRNA表达水平显著低于HF组和CF组。结论重复性"饥饿/再投喂"饲喂处理可降低高脂饮食诱导的肥胖程度,减轻外周血的瘦素抵抗和胰岛素抵抗,但可能会引起中枢神经内分泌肽表达的极度紊乱。
- 刘重斌吴博肖敏卢波杜友爱
- 关键词：肥胖瘦素高脂饮食
- 重复性“饥饿/再投喂”对大鼠体重控制与能量平衡调节的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨经过重复性"饥饿/再投喂"饲喂方式处理的大鼠再摄取高脂食物时,与体重控制和能量平衡调节有关的瘦素(leptin)和一系列神经内分泌因子及激素的表达变化。方法设计"重复性饥饿1天/再投喂1天,持续6周"的饲喂方式(基础饲料)处理实验组(RFR),实验-高脂饲料组大鼠(RFR-LF/HF)另6周改为每天喂以高脂饲料。对照组随机分为3组,对照组喂基础饲料6周后处死,高脂饲料组改用高脂饲料,基础饲料组继续用基础饲料喂养至12周。比较各组大鼠体重、Lee’s指数和脂体比的差异,检测血脂、血清生长激素、甲状腺素、瘦素、胰岛素和血浆促肾上腺皮质激素含量,应用RT-PCR法检测下丘脑神经肽Y(NPY)、前阿黑皮素原(POMC)mRNA的表达水平。结果 RFR-LF/HF组Lee’s指数、脂体比、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、瘦素和胰岛素水平均显著低于高脂饲料组而高于基础饲料组,下丘脑NPY mRNA表达水平显著高于高脂饲料组和基础饲料组,POMC mRNA表达水平显著低于高脂饲料组和基础饲料组。结论重复性"饥饿/再投喂"饲喂处理可降低高脂饮食诱导的肥胖程度,减轻瘦素抵抗和胰岛素抵抗,但会引起中枢神经内分泌肽表达的极度紊乱。
- 吴博杜友爱刘重斌杜舟肖敏卢波
- 关键词：肥胖瘦素激素
- 低铁/高锰饮食对孕鼠运动行为和脑氧化应激的影响
- 2011年
- 目的观察低铁/高锰饮食对孕鼠运动行为和脑氧化应激的影响,并探讨其作用机制。方法 24只SD孕鼠按体重随机分为空白对照组(CN组:饲料含35 mg/kg铁,10 mg/kg锰),低铁组(ID组:饲料含3 mg/kg铁,10 mg/kg锰),高锰组(MnH组:饲料含35 mg/kg铁,100 mg/kg锰)和低铁/高锰组(IDMnH组:饲料含3 mg/kg铁,100 mg/kg锰)4组,持续饲喂40 w。Morris水迷宫实验观察大鼠运动行为的改变;采用血细胞计数仪和试剂盒检测方法测定血液中血红蛋白(Hb)、铁(Fe)、转铁蛋白(Tf)和总铁结合力(TIBC);抗原竞争ELISA法测定脑组织中8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)含量,原子吸收光谱法测定脑组织中铁和锰含量。结果 Morris水迷宫实验显示,IDMnH组与CN,ID组比较,平均逃逸时间明显增加,而靶象限活动时间却明显下降。IDMnH组与CN组比较,体重明显下降。IDMnH组与CN,ID组比较,Hb和血清、小脑、中脑和纹状体中Fe含量明显下降,Tf和TIBC明显增加,海马组织中铁和锰含量显著增加;小脑、海马和纹状体组织中8-iso-PGF2α含量显著升高。但MnH组与CN组比较,小脑、海马和纹状体组织中8-iso-PGF2α含量也有显著升高。结论孕期锰染毒对缺铁雌性大鼠血液和脑组织造成明显的毒性损害,并导致脑的氧化应激,认知行为和空间记忆等功能下降。
- 刘重斌肖敏冯彦红
- 关键词：低铁高锰氧化应激水迷宫
- 补锌对小鼠酒精性肝病的作用及对HNF-4α的影响
- 2011年
- 目的 检测膳食补充锌改善肝再生是否能通过增加肝细胞核因子-4α （HNF-4α）的表达来实现.方法 选用12周雄性C57BL/6小鼠40只,按随机数字表法分为4组：正常对照组、酒精中毒组、正常补锌组及酒精补锌组,予不同的饮食喂养6个月后通过增殖细胞核抗原（PCNA）阳性标记的肝细胞数目评价肝细胞再生状况,Western blotting法检测HNF-4α蛋白表达,检测超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量评估肝损伤的氧化应激状态.结果 酒精中毒组小鼠HNF-4α表达减少,与正常对照组小鼠的差异有统计学意义（P＜0.05）,而酒精补锌组小鼠PCNA阳性肝细胞数目增加及HNF-4α蛋白表达水平升高,与酒精中毒组的差异有统计学意义（P＜0.05）.酒精中毒组MDA含量增多,SOD含量下降与正常对照组的差异有统计学意义（P＜0.05）,而酒精补锌组SOD增多,MDA下降,与酒精中毒组的差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 长期酒精喂养导致小鼠抗氧化能力下降,而补锌可逆转氧化还原失衡的状态.酒精喂养小鼠补充锌可以增强肝再生,这与HNF-4α的增加有关,膳食补锌可能对酒精性肝病有较好的影响.
- 肖敏李军伟孙未董缪武陈锡文
- 关键词：酒精性肝病锌HNF-4Α
- 大蒜素对慢性铁中毒大鼠氧化应激与肝细胞自噬的抑制作用被引量：4
- 2012年
- 目的探讨大蒜素(allicin)对慢性铁中毒大鼠氧化应激与肝细胞自噬的抑制作用及可能机制。方法 36只SD大鼠按体质量随机分为6组,即正常对照(饲喂基础饲料)、慢性铁中毒模型(饲喂高铁饲料)、正常+大蒜素40 mg·kg-1、慢性铁中毒+大蒜素30,40和60 mg·kg-1组,每组6只。持续饲喂6周后,取血及肝、结肠和肾组织用试剂盒测定铁含量、总铁结合力、丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性。透射电镜和免疫组织化学方法观察肝细胞形态结构、自噬以及胱天蛋白酶3凋亡蛋白、Ki-67细胞增殖抗原和LC3-B微管相关蛋白表达的变化。结果与正常对照组比较,模型组血清铁含量增加(P<0.01),总铁结合力下降(P<0.01),肝和结肠组织铁含量增加(P<0.05)。与模型组比较,饲喂不同剂量大蒜素大鼠血清铁含量显著下降(P<0.05),总铁结合力显著增加(P<0.05),结肠组织铁含量显著下降(P<0.05);饲喂大蒜素40和60 mg·kg-1肝组织铁含量显著下降(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组肝和结肠组织MDA含量显著增加(P<0.05),肝组织T-SOD活性增加(P<0.01),结肠组织T-SOD活性下降(P<0.01)。与模型组比较,饲喂大蒜素组肝组织MDA含量显著下降(P<0.05),结肠和肾组织T-SOD活性显著增加(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组肝实质细胞和肝非实质细胞Ki-67增殖抗原表达显著增加(P<0.05),胱天蛋白酶3凋亡蛋白表达无明显变化(P>0.05)。观察肝细胞超微结构,模型组大鼠肝细胞有大量铁蛋白颗粒累积,线粒体和内质网膜膨胀,胞质中形成自噬前体。模型组大鼠肝细胞LC3-B微管相关蛋白有较强表达,正常对照和正常+大蒜素组肝细胞未发现LC3-B免疫阳性染色。结论大蒜素能有效清除体内自由基,增强机体抗氧化能力,降低肝中铁诱导的氧化压力、线粒体膜的改变和细胞自噬,对慢性铁中毒肝细胞具有一定的保护作用。
- 刘重斌王瑞董缪武吴博肖敏
- 关键词：大蒜素氧化应激自噬
- 硝苯地平对慢性铁过负荷大鼠铁沉积和营养代谢的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察硝苯地平对慢性铁过负荷大鼠肝、肾和脾组织铁沉积与营养代谢的影响,探讨硝苯地平治疗铁过负荷等代谢疾病的可能性。方法雄性SD大鼠连续8周喂饲铁含量为3.5 g.kg-1的高铁饲料,制备慢性铁过负荷动物模型。8周后,模型大鼠ip给予硝苯地平1,3和5 mg.kg-1,连续7 d。组织学染色观察肝、肾和脾组织铁沉积,用试剂盒分别测定血脂、脂质过氧化及抗氧化指标,同时测定血清铁蛋白(SF)和总铁结合力(TIBC);用全自动生化分析仪或荧光分光光度计检测血清中营养元素铁、钙、锌和硒的含量。结果与正常对照组比较,慢性铁过负荷模型组大鼠肝、肾和脾组织中铁沉积明显;与模型组比较,硝苯地平5 mg.kg-1组组织中铁沉积明显降低(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,模型组血清甘油三酯(TG)含量由1.25±0.21升高到(1.86±0.75)mmol.L-1,总胆固醇(TC)由1.52±0.17升高到(1.91±0.34)mmol.L-1,丙二醛(MDA)由11.2±2.8升高到(15.3±3.6)μmol.L-1,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性由204±52升高到(286±75)kU.L-1(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性无明显变化;与模型组比较,硝苯地平5 mg.kg-1组TC降低到(1.65±0.36)mmol.L-1,LDL由1.14±0.15降低到(0.86±0.16)mmol.L-1,MDA含量降低到(11.9±3.5)μmol.L-1(P<0.05),TG,HDL,SOD和GSH-Px无明显变化;硝苯地平1和3 mg.kg-1对上述指标无明显影响。与正常对照组比较,模型组血清中铁含量由1.21±0.11升高到(1.57±0.25)mg.L-1,SF由232±17升高到(348±46)mg.L-1,锌、硒和钙含量分别由1.8±0.6,0.096±0.018和(120±26)mg.L-1降低到1.4±0.4,0.072±0.012和(77±15)mg.L-1(P<0.05,P<0.01),TIBC无明显变化;与模型组比较,硝苯地平5 mg.kg-1组血清铁含量降低到(1.32±0.14)mg.L-1,硒含量升高到(0.087±0.017)mg.L-1,钙含量升高到(97±16)mg.L-1(P<0.05),对SF,TIBC和锌含量无明显影响;硝苯地平1和3 mg.kg-1对上述指标无明显影响�
- 刘重斌吴博肖敏王利群
- 关键词：硝苯地平铁负荷脂质过氧化
- 水溶氧对三疣梭子蟹(crab Portunus trituberculatus,Miers,1876)生理应答的影响(英文)被引量：7
- 2011年
- 本研究旨在探究不同水溶氧水平对三疣梭子蟹生理应答的影响。将50只成体三疣梭子蟹（CrabPortunus trituberculatus）分别饲养在不同水溶氧水平（1、2、4、8、12 mg/L）的密封水槽中,10 d后测定其耗氧率,同时比较血液中蛋白质、氧合血蓝蛋白、血细胞含量;测定消化腺代谢产物（糖原、蛋白质、葡萄糖、胆固醇、酰基甘油、乳酸）含量;比较消化酶活性及乳酸脱氢酶活性的差异。结果显示：三疣梭子蟹生存关键的溶氧水平为2~4 mg/L;血液中蛋白质和氧合血蓝蛋白含量与耗氧率一致;消化腺代谢产物糖原和蛋白质含量不随溶氧水平的变化而变化（P〉0.05）,但葡萄糖、胆固醇和酰基甘油含量随溶氧水平降低而呈直线下降;水溶氧对消化酶活性影响不大（P〉0.05）,但乳酸脱氢酶活性和乳酸含量却随溶氧水平降低而显著增加（P〈0.05）;较低的水溶氧还通过明显降低血细胞含量（P〈0.05）来影响三疣梭子蟹的免疫功能。研究表明：三疣梭子蟹可通过改变血液中氧合血蓝蛋白含量、某些消化腺代谢产物含量以及厌氧呼吸等生理机制来适应较低的水溶氧生态环境。
- 刘重斌肖敏冯彦红王瑞卢波
- 关键词：营养代谢三疣梭子蟹
- α-硫辛酸和维生素C对慢性砷染毒大鼠氧化应激的保护作用被引量：1
- 2010年
- 目的 探究α-硫辛酸（α-LA）和维生素C对慢性砷染毒大鼠氧化应激的保护作用.方法 50只雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、饮水慢性砷染毒组（As组）、α-LA干预组、维生素C干预组、α-LA＋维生素C干预组.除空白对照组自由饮用去离子水6周外,其余4组均自由饮用含有50mg/L砷酸钠的饮用水6周;α-LA干预组同时灌胃α-LA 10mg·kg-1·d-1,维生素C干预组同时灌胃维生素C 25 mg·kg-1·-1,α-LA＋维生素C干预组同时灌胃α-LA 10 mg·k g-1·d-1和维生素C 25 mg·kg-1·d-1.6周后,各组动物由腹主动脉取血,并分别测定血液、脑和肝组织中δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶（δ-ALAD）、半胱天冬蛋白酶（Caspase-3）、ATPase、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力,测定还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）、硫代巴比妥酸反应产物（TBARS）和活性氧（ROS）含量.结果 与对照组[ROS为（10260.72±525.28）U/ml,δ-ALAD为（19.78±2.27）nmol/ml]比较,As组血清中ROS含量[（14930.49±647.41）U/ml]明显增加,δ-ALAD活力[（6.45±0.73）nmol/ml]明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）;与As组比较,α-LA和维生素C干预组δ-ALAD活力[分别为（10.15±0.38）、（10.2 1±0.45）、（15.04±0.36）nmol/ml]明显增加,α-LA＋维生素C干预组ROS含量[（1 1305.20±568.58）U/ml]明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）.与对照组比较,As组脑和肝组织匀浆中ROS含量、Caspase-3活力、TBARS含量明显增加,而ATPase、SOD、GSH-Px和CAT活力均明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与As组比较,α-LA和维生素C干预组脑组织中ROS含量均明显下降,α-LA＋维生素C干预组Caspase-3活力和TBARS含量明显下降,SOD、GSH-Px和CAT活力均明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 α-LA和维生素C干预对慢性砷染毒大鼠氧化应激具有保护作用.
- 刘重斌冯彦红叶光华肖敏
- 关键词：砷剂硫辛酸抗坏血酸氧化性应激
